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猪瘟病毒FJFQ-39株的毒力鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
为探索一种相对客观、稳定的方法鉴定猪瘟病毒(CSFV)FJFQ-39株的毒力.本研究采用2×103TCID50的FJFQ-39株分别肌肉接种6头敏感猪,通过RT-nPCR 检测扁桃体和血液监测动物感染情况,对动物临床症状和病理变化进行系统评分,结合体温分析,判定病毒毒力.同时用相同剂量的石门株接种4头敏感猪作对照.FJFQ-39和石门接种猪的扁桃体和血液均检测到CSFV核酸;FJFQ-39接种猪的最大临床症状评分(CS)平均值为3.53.5±1.0、病理评分(PS)平均值为3.3±0.9(低于5),平均最高体温为39.3±0.2℃(低于40℃);石门接种猪的最大CS平均值为25.5±2.1、PS平均值为29.5±2.4(大于15),平均最高体温为41.8±0.2℃(高于41.0℃).实验结果表明:猪瘟病毒FJFQ-39株和石门株均成功感染了动物;评分系统结合体温测定评价CSFV毒力是可行的;FJFQ-39 属于低毒力株,而石门属于强毒株. 相似文献
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为制备和标定兔体中和试验用猪瘟病毒阴、阳性血清国家参考品,本试验制备了猪瘟病毒阴性、弱阳性和强阳性血清,通过过滤、分装、冻干、熔封,获得3亚批候选物,并进行了检验、协作标定和定值。结果显示:物理性状、无菌检验、安全检验、支原体检验、真空度测定、均匀性检验和保存有效期试验均合格;剩余水分均小于4%;特异性检验结果均为口蹄疫、伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征、猪细小病毒病、牛病毒性腹泻/粘膜病抗体阴性,并且弱阳性和强阳性血清能中和猪瘟兔化弱毒而阴性血清不能中和;残余猪瘟病毒免疫荧光和套式RT—PCR核酸检测结果均为阴性;经协作标定定值,其兔体中和效价分别为:阴性、1:100.928±0.103、1:102.928±0.103,表明该候选物可以作为国家参考品。 相似文献
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8株布氏杆菌BCSP31基因的序列分析 总被引:4,自引:0,他引:4
参照GenBank中布氏杆菌的全基因组序列,设计一对特异性引物,通过PCR方法,扩增了8株来自3个布氏杆菌种的布氏杆菌表面蛋白31(BCSP31)全基因。PCR产物经克隆和序列分析后发现,该基因非常保守,8株不同菌株间的同源性高于99.3%;进化关系分析显示,5株中国来源的菌株(S2,M5,M111,M28,A387)显示了最近的同源关系,其中2个弱毒菌株S2和M5的BCSP31基因序列100%同源。3株外国来源的菌株(S19,2308,Rev.1)中,S19和2308同源性为100%。Rev.1与其他7株布氏杆菌BCSP31基因均有较大的差异。序列分析结果表明,BCSP31基因序列差异与布氏杆菌的种属和毒力无相关性。 相似文献
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用三色间接流式细胞术检测猪外周血粒细胞、B细胞和单核细胞亚群。来源于2头猪的12个猪外周血液样品裂解红细胞后,用3种SWC(swine workshop cluster)单抗和不同标记的二抗染色,对全体细胞设门,测定了SWC1、SWC3、SWC8在外周血白细胞上的表达,分析了嗜中性粒细胞(SWCI^+SWC3^+SWC8^+)、嗜酸性粒细胞(SWCI^-SWC3^+SWC8^+)、B细胞(SWC1^-SWC3^-SWC8^+)、单核细胞(SWC1^+SWC3^+SWC8^-)在外周血白细胞中的比例。结果显示,细胞分群情况良好,两组测定结果的均值及方差无显著差异,其中嗜中性粒细胞占(32.6±0.8)%,嗜酸性粒细胞占(4.7±0.3)%,B淋巴细胞占(3.7±0.2)%,单核细胞占(2.2±0.2)%。 相似文献
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通过检测接种后不同时期的家兔血清猪瘟抗体水平,确定了家兔猪瘟抗体检测时间为10d.监测注射不同稀释度猪瘟兔化弱毒后家兔体温反应变化,同时检测第10天家兔血清中猪瘟抗体水平.比较两项结果表明,家兔体温反应与ELISA抗体检测结果具有较高的正相关性,在24组出现典型的热反应家兔中,有23组血清猪瘟抗体检测结果均为阳性,两者符合率为95.83%,4组未出现典型的热反应的家兔猪瘟抗体ELISA结果比体温反应表现出更好的的敏感性和准确性.这一结果为猪瘟兔化弱毒疫苗家兔效力检验ELISA方法的建立提供了依据. 相似文献
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根据《中华人民共和国兽用生物制品规程》2000年版制备牛型提纯结核菌素(牛PPD)国家标准品候选物4批。根据多糖、核酸和氮含量测定结果,筛选200804批制备为待检国家标准品,其检验结果为:物理性状为乳白色疏松团块,加生理盐水后在5s内溶解;无菌检验合格。200804批准检国家标准品于稀释前各样品变异系数为1.4%,冻干后各样品变异系数为4.8%。效价测定:待检国家标准品4个稀释度引起的豚鼠皮肤红肿面积与国际标准品相对应的稀释度引起的皮肤红肿面积的差值平均值都在10%以内,2者的剂量反应曲线基本平行,即待检国家标准品效价与国际标准品基本相同。200804批待检国家标准品于50℃保存21d之内效价下降程度平均值小于10%,保存28d效价下降程度平均值大于10%。其特异性和安全性均符合要求。 相似文献
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用间接免疫荧光检测方法评价猪瘟兔化弱毒活疫苗效力的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为用体外试验方法评价猪瘟兔化弱毒活疫苗效力,以猪瘟病毒抗体(兔源)为一抗、荧光素标记羊抗兔IgG 为二抗,建立了CSFV兔化弱毒株的间接免疫荧光检测方法( IFA)。特异性试验表明,用该IFA方法检测CSFV兔化弱毒株接种的RK细胞为阳性,而检测伪狂犬病毒、猪细小病毒病、牛病毒性腹泻/粘膜病毒接种的RK细胞均为阴性。 CSFV兔化弱毒株和活疫苗的兔体感染量( RID)用兔体测定,半数组织感染量( TCID50)用IFA测定,拟合RID与TCID50的线性回归方程,确定1RID/mL=( TCID50/0.1mL+200)/12。 相似文献