矮牵牛果实特异表达启动子FBP7的基因克隆及序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

柏锡  纪巍  才华  李勇  张秀芹  朱延明 《东北农业大学学报》2008,39(6)

为进一步实现外源基因在草莓果实中的特异表达,克隆了矮牵牛果实特异表达启动子FBP7。根据GenBank发表序列设计引物,以矮牵牛(Petunia hybrida)总DNA为模板,通过PCR扩增获得约500 bp的DNA片段,回收该片段并克隆至PUC18载体上,测序后将所得序列与原序列进行比对,其同源性为97%。为分析这些差异序列是否影响启动子功能,进行了启动子功能预测及顺式作用元件分析。结果表明,所克隆的启动子序列应具有启动子功能,且能实现果实特异表达,其序列分析差异可能是由于个体差异及多态性的影响,为草莓果实特异表达启动子的选择提供新思路。  相似文献   

红掌组织培养中不定芽诱导及增殖研究     

郑萍  黄才华  郁琳洁 《吉林农业》2018,(12)

目的:探析优化红掌组织培养中不定芽诱导及增殖的培养基比例。方法:选用"红粉佳人"品种红掌组织,以叶柄作为初代培养,分别选用MS培养基(100%比例)、MS培养基(50%)、MS培养基(25%)进行诱导不定芽培养;对红掌愈伤组织做分化处理,添入浓度不一的细胞分裂素6-BA(0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L),生长素IBA(0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L),生长素NAA(0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L),评估红粉佳人愈伤外植体培养不定芽诱导及分化增殖的变化特征。结果:MS培养基(100%比例)对红粉佳人品种红掌组织愈伤不定芽诱导效果及增殖系数最高,MS培养基(25%)最低,不同梯度MS培养基的诱导效率、增殖系数差异明显(P0.05);0.5mg/L的6-BA对红掌愈伤组织的不定芽诱导率、增殖系数最小,1.0mg/L的6-BA可明显促进不定芽诱导率、增殖系数提升;0.1mg/L生长素IBA对红掌愈伤组织的不定芽诱导率最小,当生长素IBA≥0.3mg/L可明显促进不定芽诱导率提升(P0.05),0.1mg/L生长素NAA对不定芽诱导率为57.39%,0.3mg/L生长素NAA对不定芽诱导率为72.03%,0.5mg/L生长素NAA对不定芽诱导率为64.37%,0.7mg/L生长素N AA对不定芽诱导率为91.89%,表明生长素N AA用于红掌愈伤组织不定芽诱导仅在0.7mg/L水平才具备良好效果。结论:红掌组织培养中选用100%完整配比的MS培养基与1.0mg/L细胞分裂素平6-BA联合0.3 mg/L生长素IBA作为不定芽诱导及增殖的最佳培养配比。  相似文献   

两个大豆灰斑病抗性相关SCAR标记的发现与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

丁俊杰  文景芝  束永俊  李勇  柏锡  才华  纪巍  季佐军  朱延明 《东北农业大学学报》2010,41(12)

大豆灰斑病是一种由大豆灰斑病菌引起的真菌性病害,会导致大豆叶片出现病斑、大豆籽粒斑驳,造成减产和品质下降,对大豆生产有重要影响。研究通过田间试验对142份育成大豆新品种(系)的灰斑病抗性进行鉴定,进而对大豆灰斑病抗性资源进行评估。利用前期开发的功能分子标记进行候选基因关联分析,筛选得到两个与大豆灰斑病抗性相关的SCAR标记,可用于大豆抗灰斑病的分子辅助育种研究。测序分析发现,它们定位于两个磷脂酶D基因内含子上,是由大豆转座子插入突变形成的。这两个SCAR标记具有功能基因靶向和操作简便等优点,具有广阔的大豆抗灰斑病育种应用前景。  相似文献   

荧光RT-PCR鉴别诊断O型与AsiaⅠ型口蹄疫病毒方法的建立     

薄清如  罗宝正  杨素  徐海聂  沙才华  罗吉新 《农业生物技术学报》2009,17(1):24-28

从GenBank中获取多个口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus, FMDV）基因组序列,进行多序列比对之后,设计对应于口蹄疫病毒的3D、VP3和3C区域的引物和探针,分别建立了FMDV群特异性实时荧光RT-PCR、O型特异性实时荧光RT-PCR和AsiaⅠ型特异性实时荧光RT-PCR检测方法。三种FMDV实时荧光RT-PCR在Lightcycler荧光PCR仪上扩增均出现标准的S型曲线,并且具有良好的特异性,可以很好地将FMDV与传染性牛鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus）、猪传染性胃肠炎病毒（Swine transmissible gastroenteritis virus）、赤羽病病毒（Akabane virus）和猪呼吸系统冠状病毒（Porcine respiratory corona virus）区分。FMDV群特异性实时荧光RT-PCR可以成功扩增O型（O1和O2毒株）和AsiaⅠ型（AsiaⅠ1和AsiaⅠ2毒株）FMDV;O型特异性实时荧光RT-PCR可成功扩增O型（O1和O2毒株）FMDV,AsiaⅠ型（AsiaⅠ1和AsiaⅠ2毒株）FMDV为阴性;AsiaⅠ型特异性实时荧光RT-PCR可成功扩增AsiaⅠ型（AsiaⅠ1和AsiaⅠ2毒株）FMDV,O型（O1和O2毒株）FMDV为阴性。FMDV群特异性实时荧光RT-PCR、O型特异性实时荧光RT-PCR和AsiaⅠ型特异性实时荧光RT-PCR都可以检测到10个拷贝的模板,灵敏度接近检测方法的极限。检测时间短,从加样到反应结束只需要70 min。该方法有潜力用于FMDV的实验室筛查与鉴别诊断。  相似文献   

荧光RT-PCR鉴别诊断O型与Asia I型口蹄疫病毒方法的建立     

薄清如  罗宝正  杨素  徐海聂  沙才华  罗吉新 《农业生物技术学报》2009,(1)

从GenBank中获取多个口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）基因组序列,进行多序列比对之后,设计对应于口蹄疫病毒的3D、VP3和3C区域的引物和探针,分别建立了FMDV群特异性实时荧光RT-PCR、O型特异性实时荧光RT-PCR和Asia I型特异性实时荧光RT-PCR检测方法。三种FMDV实时荧光RT-PCR在Lightcycler荧光PCR仪上扩增均出现标准的S型曲线,并且具有良好的特异性,可以很好地将FMDV与传染性牛鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus）、猪传染眭胃肠炎病毒（Swine transmissible gastroenteritis virus）、赤羽病病毒（Akabane virus）和猪呼吸系统冠状病毒（Porcine respiratory corona virus）区分。FMDV群特异性实时荧光RT-PCR可以成功扩增O型（O1和O2毒株）和Asia I型（Asia I1和Asia I2毒株）FMDV;O型特异性实时荧光RT-PCR可成功扩增O型（O1和O2毒株）FMDV,Asia I型（Asia I1和Asia I2毒株）FMDV为阴性;Asia I型特异性实时荧光RT-PCR可成功扩增Asia I型（Asia I1和Asia I2毒株）FMDV,O型（O1和O2毒株）FMDV为阴性。FMDV群特异性实时荧光RT-PCR、O型特异性实时荧光RT-PCR和Asia I型特异性实时荧光RT-PCR都可以检测到10个拷贝的模板,灵敏度接近检测方法的极限。检测时间短,从加样到反应结束只需要70min。该方法有潜力用于FMDV的实验室筛查与鉴别诊断。  相似文献   

烟草黑胫病菌对两种保护性杀菌剂的敏感性测定   总被引：1，自引：0，他引：1  

许学明  王开运  林才华  段海明  迟志娟 《农药学学报》2007,9(1):39-44

采用菌落生长速率法测定了2005年从云南、贵州、山东烟区病株上分离到的38个烟草黑胫病菌Phytophthora nicotianae Breda de haan var.nicotianae Waterhouse 菌株对两种保护性杀菌剂的敏感性。结果表明:百菌清(B)对各参试菌株的EC50值在2.33~49.47 μg/mL之间,平均值为9.35(±2.77) μg/mL;代森锰锌(Z)对各参试菌株的EC50值在3.51~82.05 μg/mL之间,平均值为10.59(±4.06) μg/mL。B及Z对除XR001外的37个菌株的EC50值分别呈连续的双峰(主峰明显)和单峰频次分布;B对构成敏感性正态频次分布主峰的30个菌株的EC50均值5.99(±0.78) μg/mL 和Z对组成连续敏感性正态频次分布的37个菌株的EC50均值8.66(±1.09) μg/mL 可分别作为烟草黑胫病菌对B及Z的敏感性基线。  相似文献   

猪口蹄疫的临床诊断与防制措施     

徐博文  周傲白雪  蒋晓霞  邵建宏  黄海超  赵福振  陈轩  沙才华  廖秀云 《畜牧兽医科技信息》2022,(6):173-175

由于猪口蹄疫不同于一般的传染病,因此,本文对该病的病原特点、流行特点、病理变化、临床诊断、类症鉴别及具体防治措施等进行了详细论述,供参考。  相似文献   

新型基因芯片检测禽流感病毒、鸡新城疫病毒和鸡减蛋综合征病毒     

廖秀云  陶虹  邵建宏  罗宝正  薄清如  刘国昌  徐海聂  沙才华 《动物医学进展》2013,34(10)

建立了可同时筛选禽流感病毒(AIV)通用型、H4、H5、H6、H7、H9、N1、N2、N9亚型及鸡新城疫病毒(NDV)、鸡减蛋综合征病毒(EDSV)的基因芯片检测方法.从GenBank中下载相关序列,利用分子生物学软件设计特异性引物和杂交探针.使用Dr.chip系统进行芯片点样、杂交、显色、读数,优化反应条件后做灵敏度、特异性试验,然后应用于临床检验.结果显示,各病原间无交叉反应,探针可特异性识别靶基因;病原的最低浓度为4.83 pg/μL,灵敏度较高;每个梯度的两个反应结果一致,重复性良好.对临床样品检验,结果同病毒分离鉴定方法一致.本研究建立的基因芯片检测方法可用于禽流感通用型、H4、H5、H6、H7、H9、N1、N2、N9亚型及NDV、EDSV的鉴别检测.  相似文献   

鸽禽流感免疫防制程序的探讨     

邹永新  李剑荣  刘思伽  沙才华  余双祥  黄爱芳  罗映霞  姜文联  陈益填 《中国家禽》2006,28(14):23-25

对不同龄期鸽进行疫苗免疫和采用不同免疫间隔进行疫苗免疫后抗体消长动态及母源抗体的检测结果:在7～35日龄初免,7天后产生抗体,28～35天抗体滴度达到较高点,效果较好;首免后间隔20～90天二免,效果较优,当母鸽为高抗体水平(8.1log2)时产下的子代母源抗体至15日龄时已衰减至3.7log2。据此,提出了鸽场禽流感的免疫程序。  相似文献   

H5N1禽流感病毒核酸多重RT-PCR检测方法的建立     

廖秀云  徐海聂  徐博文  沙才华  罗宝正  薄清如  杨素 《湖北畜牧兽医》2013,34(4):5-7

根据禽流感病毒的基质蛋白(M)基因序列和H5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因、神经氨酸酶(NA)基因设计并合成了三对特异性引物,用于建立H5N1禽流感病毒核酸的RT-PCR分型鉴定方法。试验证明,建立的多重PCR方法可以将H5N1与H6N2、H9N2有效区分。该方法具有较好的灵敏度和特异性,适合在基层动物防疫和监督部门进行H5N1禽流感病毒核酸的检测。  相似文献