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旨在探究缺失、小的、同源异形1(absent,small,or homeotic 1-like,ASH1L)甲基转移酶在牛卵丘细胞中的表达与功能。本研究通过免疫荧光染色在健康母牛卵丘细胞中对ASH1L甲基转移酶进行定位,并分析细胞的组蛋白H3第36位赖氨酸(histone H3 lysine36,H3K36)甲基化修饰模式;合成靶向Ash1L基因的siRNA,对siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及对照组进行荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹,筛选有效siRNA;采用荧光定量PCR分析干扰Ash1L表达对处理组及对照组中凋亡相关基因及多梳抑制复合体(polycomb repressive complex 2,PRC2)组成基因的表达水平的影响。结果显示,ASH1L甲基转移酶位于牛卵丘细胞的细胞核中,呈点状分布。成功筛选到能有效干扰牛Ash1L基因的siRNA-2,其干扰效率为60%~70%。将siRNA-2转染卵丘细胞后,该干扰组细胞中H3K36的单甲基化、二甲基化及三甲基化3种甲基化水平均显著低于对照组(P<0.05);干扰Ash1L导致凋亡相关基因Bax、Bcl-2及caspase-3表达水平显著上调,凋亡基因Bax和caspase-3表达量高于抗凋亡相关基因Bcl-2(1.311和1.179 vs 1.146);同时,干扰Ash1L基因表达也引起PRC2蛋白亚基EZH2和Suz12基因的mRNA表达量显著升高(P<0.05)。综上所述,本研究探讨了ASH1L甲基转移酶在牛卵丘细胞中的表达和功能,ASH1L在牛卵丘细胞中呈点状分布,且Ash1L基因的抑制导致H3K36me1/2/3水平均显著下降及凋亡基因和PRC2蛋白相关亚基EZH2和Suz12基因表达的升高,为进一步研究其对家畜胚胎的调控作用提供技术和理论基础。 相似文献
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摘本研究旨在对部分中国荷斯坦种公牛脊柱畸形综合征(Complex vertebral malformation,CVM)致病基因的携带状况进行筛查.应用错配PCR突变分析技术(PCR mismatch amplification mutation assay,PCR-MAMA)建立了针对CVM致病基因的特异性检测方法.利用PCR-MAMA法检测了154头荷斯坦种公牛,发现了24头CVM阳性个体,阳性率为15.58%.结果显示,应对中国荷斯坦种公牛进行全面的针对CVM的检测. 相似文献
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牛体内囊胚全转录组模式解析 总被引:2,自引:1,他引:1
旨在解析牛体内囊胚的全转录组模式。本研究选择3头15月龄以上、健康状况良好的泌乳奶牛,采用超排获得体内囊胚,采用单细胞全转录组测序技术检测囊胚mRNA、lncRNA、circRNA转录模式,并采用生物信息学工具对其进行分析。试验获得牛体内囊胚约19 975个mRNAs、12 715个novel lncRNAs及887个circRNAs。mRNA有12种可变剪切方法,以转录起始区域可变剪切(TSS)为主。采用基因本体(GO)和相关信号通路(KEGG)对其分析发现,生物功能主要富集在新陈代谢、细胞膜和蛋白结合、细胞通讯、细胞组织成分、生长发育等功能,Pathway主要富集在细胞周期、膜运输、染色体组织调控等通路;circRNA有6种类型,其中CLASSIC类型circRNA数量最多,这种剪切方式会形成成环的外显子circRNA (EcircRNA)。本研究阐明了牛体内囊胚的全转录组模式,为全面了解牛体内囊胚提供了新的思路。 相似文献
75.
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本研究为了探索白消安对小鼠生殖能力的影响,将20只6~7周龄性成熟雄ICR鼠随机分成4组,以注射50%DMSO作为空白对照,分别以每只40、45、50 mg/kg剂量腹腔注射白消安。从注射当天开始分阶段共与母鼠合笼15次,记录了460只合笼母鼠的受孕率、窝产仔数,以及922只后代的性别,并对记录数据进行统计分析,研究了不同剂量药物对小鼠生殖能力的影响。结果表明,腹腔注射白消安能够造成小鼠的短期不育,但这种不育是可以恢复的,且低剂量比高剂量注射恢复更快。白消安虽然会对小鼠的生殖能力造成影响,但不会影响其后代的性别比例。 相似文献
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为探讨和牛超数排卵的影响因素,试验采用4 d 8次注射Folltropin-V的超数排卵方法,在不同季节对不同父系和牛供体牛群超数排卵1~10次.结果表明:①春季、夏季、秋季和冬季超数排卵和牛分别获得7.1、7.8、8.3、7.7枚头均胚胎数和5.2、4.7、5.2和5.2枚头均可用胚胎数,差异均不显著(P>0.05);夏季和秋季超数排卵和牛分别获得3.2和3.1枚头均不可用胚胎数,显著高于春季获得的1.9枚头均不可用胚胎数(P<0.05);②和牛供体重复超数排卵1~10次,头均胚胎数、头均可用胚胎数和头均不可用胚胎数分别为7.5~9.3、4.6~6.1和2.7~3.4枚,差异均不显著(P>0.05);③父系为WESFA0107的供体牛群超数排卵获得11.1枚头均胚胎数,显著高于父系为GOSFZ0302、BYWFA0015、BYWFY0342、BYWFY0350和TFWFW06290供体牛群超数排卵获得的头均胚胎数(P<0.05),6.2枚头均可用胚胎数显著高于父系为BYWFY0350的供体牛群超数排卵获得的3.6枚头均可用胚胎数(P<0.05),3.3枚头均退化胚胎数显著高于父系为BYWFA0015、BYWFY0350和TFWFW06290的供体牛群超数排卵获得的1.8、1.1和1.7枚头均退化胚胎数(P<0.05),1.6枚头均未受精卵数显著高于其他6个父系供体牛群超数排卵获得的头均未受精卵数(P<0.05);父系为BYWFY0350的供体牛群超数排卵获得的5.3枚头均胚胎数和3.6枚头均可用胚胎数在7个不同父系供体牛群胚胎生产中均为最少.因此,避开夏季高温季节,增加超数排卵次数同时选择超数排卵反应好的同一父系供体能够提高和牛超数排卵效率. 相似文献
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牛早期胚胎性别快速鉴别的研究 总被引:4,自引:2,他引:4
根据聚合酶链式反应中聚合酶的扩增特性,对PCR反应的循环参数进行研究,取消了PCR反应中延伸这1温度梯度,对2温度梯度PCR方法进行了单重PCR和多重PCR扩增研究,并采用2温度梯度多重PCR方法分别对牛基因组、成纤维细胞、胚胎样品进行了性别鉴别研究,建立了稳定、简便、快速的用于牛早期胚胎性别鉴别的2温度梯度PCR方法.同时还对2温度梯度PCR的扩增能力进行了研究,结果表明:2温度梯度PCR方法能够扩增片段的可能长度为633 bp. 相似文献
79.
过去的12年,马的繁殖技术有了很大提高,但是传统的体外受精方法并没有获得令人满意的结果。近年来,利用ICSI进行马的体外受精是一种非常有效的临床应用。一个精子通过ICSI注入到成熟卵母细胞内,在精子质量较差时,ICSI的受精卵被移入到输卵管内。与此同时,马的克隆已经成功,但效率仍比较低。 相似文献
80.
关于皮埃蒙特肉牛引进及中国肉牛育种的几点思考 总被引:1,自引:0,他引:1
由于历史上以役用为主并缺乏系统的肉用性能选育,致使中国黄牛产肉性能较低,至今中国还没有一个专门化肉牛品种。因为优越的产肉性能和与中国黄牛互补的体型,意大利皮埃蒙特肉牛被引进中国,对中国黄牛有了很大程度的遗传改进。然而要想增加中国肉牛业的国际竞争能力,必须培育自己的专门化肉牛品种。意大利皮埃蒙特肉牛的培育历史,为我们提供了宝贵的经验和深刻的教训。我们应立足于本国现有的遗传资源,借鉴这些宝贵的经验教训和先进的育种技术,建立专门的育种组织,健全品种登记制度,系统地培育中国专门化肉牛品种,促进中国养牛业的发展,为中国乃至全世界人们提供优质健康的牛肉。 相似文献