不同遗传背景猪群体黏病毒耐药蛋白1基因多态性分析     

张立春  李兆华  李梦姝  孙福亮  曹阳  朴庆林  金海国  张树敏 《中国畜牧兽医》2017,44(4):1046-1053

为探讨不同遗传背景猪黏病毒耐药蛋白1（myxovirus resistance,Mx1）基因的遗传多态性,本试验采用RT-PCR方法扩增克隆出猪Mx1基因并进行生物信息学分析,采用高分辨率熔解曲线法（HRM）对民猪、长白山野猪与民猪杂交猪（简称野杂猪）和大白猪3个群体Mx1基因外显子2区多态性进行分析。结果显示,从民猪及野杂猪中成功克隆出4条Mx1基因mRNA序列。该序列含有1个1 992 bp的完整开放阅读框（ORF）,编码663个氨基酸。比较发现4条Mx1基因序列中共含有30个SNPs位点,其中17个SNPs位点引起了氨基酸序列的变异。功能结构域分析发现,大部分氨基酸突变位点位于Mx1基因功能结构域两侧。HRM多态性分析显示,Mx1基因外显子2区DD基因型作为优势基因型在3个群体中具有最高的基因型频率,其中大白猪中DD基因型频率为100%,野杂猪为62.5%,民猪为56.2%。基因多态性分析还发现该区域存在更多的核苷酸及氨基酸突变位点,表明民猪和野杂猪Mx1基因存在更丰富的基因多态性。  相似文献   

山羊乳腺特异性表达慢病毒载体的构建与验证     

朴庆林  于永生  罗晓彤  金海国 《安徽农业科学》2009,37(31):15177-15179

[目的]构建山羊乳腺特异性表达尿激酶原突变体的重组慢病毒载体,证明其表达的有效性。[方法]将劳氏肉瘤病毒增强子／启动子、复制缺陷型艾滋病病毒（HIV-1）的5’端长重复序列（LTR）、HIV-1ψ卫包装信号、HIVRev反应元件、山羊B-casein调控序列、pro—UKM13、△U3／3’LTR依次连接,构建乳腺特异性表达的慢病毒载体;通过体外转染人乳腺癌细胞系（MCF-7）、仓鼠卵巢细胞（CHO）和泌乳山羊乳腺注射证明其表达有效性。[结果]构建的山羊乳腺特异性表达载体酶切鉴定是正确的;利用该载体转染细胞,采用溶圈法和Westernblot检测证实了其表达的有效性;慢病毒载体注射到泌乳山羊的乳腺,在乳汁中也检测到了尿激酶原的表达。[结论]为在转基因动物的乳腺中表达尿激酶原突变体奠定了基础。  相似文献   

朝鲜牛尿黑酸酶基因的遗传多样性分析     

李赵志  曹阳  李静  周国利  张立春  于永生  刘晓辉  王晓阳  朴庆林  金海国  严昌国 《安徽农业科学》2009,37(32):15701-15702

采用PCR—SSCP技术分析了尿黑酶基因（14CO）在朝鲜牛群体中的多态性。结果表明,HGD基因在2对引物扩增片段中均存在PCR-SSCP多态性。P1引物扩增的群体出现了1Tr和CC2种基因型,基因型频率分别为0．90和0．10;P2引物扩增的群体出现了Gc、AA和GA3种基因型,基因型频率分别为0．53、0．07和0．40。测序结果表明,P1引物扩增的片段存在1个g．24581T〉c的突变,落在HGD基因第6内含子上;P2引物扩增的片段存在1个g．29858G〉A的突变,落在HGD基因第10外显子上,并导致了Arg—His氨基酸的改变。2个SNPs形成TG、TA和CG3种单倍型,频率分别为0．47、0．43和0．10。  相似文献   

酵素对育肥羊生长性能和血清生化指标的影响     

刘海燕  刘晓辉  张鹏举  谭成成  朴庆林  王伟霞  李信涛 《饲料研究》2020,43(9):11-13

  相似文献   

耐盐抗寒优质牧草-碱茅     

齐宝林  高国臣  赵云鹏  朴庆林 《吉林林业科技》2005,34(5):4-6,9

本文概述了国内外治理盐碱地的历史与现状；分析了碱茅的生物学特性、耐盐性及其耐盐机理；阐述了碱茅的饲用价值和栽培技术。  相似文献   

论草地在生态省建设中的作用   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐安凯  王志锋  朴庆林  孙祎龙  王红军 《吉林畜牧兽医》2005,(7):3-5

草地占世界陆地总面积25％，占我国国土面积40％，占吉林省土地面积16％。草地既是生态环境绿色屏障，又是生态农业和生态环保型效益经济重要组成部分。本文针对草地的上述功能，详细论述了吉林生态省建设中草地的作用。  相似文献   

浅谈奶牛热应激的产生、临床表现及防治     

吕海航  耿忠诚  马君  张元哲  朴庆林 《吉林畜牧兽医》2013,34(9):43-44

奶牛热应激综合症是指奶牛受到超过本身体温调节能力的过高温度刺激时,作用于垂体-肾上腺皮质系统,所引起机体的非特异性防御反应和特异性障碍在内的全身性适应症。奶牛热应激会严重影响奶牛的生产和健康。2013年夏季我国大部分地区持续高温,奶牛的热应激反应时常发生,给奶牛生产造成严重的危害,如何尽量避免奶牛热应激综合症的发生,降低持续高温对奶牛生产的影响,保证奶牛健康生产,保证经济效益。  相似文献   

重组毛囊特异性表达载体的构建与验证     

于永生  罗晓彤  朴庆林  金海国 《安徽农业科学》2011,39(6):3615-3617

[目的]构建毛囊特异性表达绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9（KIF Ⅱ-9）cDNA的毛囊特异性表达载体,并证明其表达的有效性。[方法]根据绵羊毛角蛋白关联蛋白6-1（KAP6-1）基因已知DNA序列设计合成2个特异性引物,以绵羊基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到KAP6-15’调控序列,然后与毛角蛋白Ⅱ型中间丝基因（KIFII-9）cDNA、去除CMV启动子的表达载体pcDNA3.1连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,新生小鼠皮下注射该重组载体证明其表达有效性。[结果]PCR扩增出1042 bp的特异性片段,DNA测序结果证明,该克隆片段与KAP6-1 5’端调控区序列相比具有极高的一致性;构建的毛囊特异性表达载体PCDNA3.1-KK,皮下注射新生小鼠,皮肤内KIF Ⅱ-9得到转录。[结论]该试验构建的载体PCDNA3.1-KK具有表达特异性。  相似文献   

牛胎儿成纤维细胞的分离培养及转染线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因     

于永生罗晓彤  张立春朴庆林 《中国农学通报》2011,27(23):12-16

为了为核移植法制作转线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因克隆牛提供供体细胞,体外分离培养牛胎儿成纤维细胞并进行了线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因转染。首先采用组织块贴壁法分离培养牛胎儿成纤维细胞,线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因表达载体以脂质法介导转染牛胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的细胞克隆,PCR 鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,对阳性克隆进行传代2-3次后利用RT-PCR检测外源基因的转录。结果表明,组织块贴壁后7天可获取原代成纤维细胞,基因转染后利用G418筛选9天即可获得转基因细胞,对转基因细胞进行传代,PCR 检测显示CMV启动子和ω-3脂肪酸去饱和酶基因整合到细胞基因组中,RT-PCR检测显示ω-3脂肪酸去饱和酶基因在转基因传代细胞中得到有效转录。本研究为下一步通过核移植方法获得转基因肉牛提供了条件。  相似文献   

绵羊角蛋白关联蛋白8.2基因克隆与表达分析     

张立春  曹阳  孙福亮  尹峰  朴庆林  王晓阳  金海国  张明新 《中国畜牧兽医》2015,42(12):3140-3145

本研究旨在克隆绵羊角蛋白关联蛋白8.2(keratin-associated protein,KAP8.2)基因mRNA并分析该基因在不同组织器官的表达分布。首先提取小尾寒羊与新吉细毛羊皮肤及不同组织总RNA,RT-PCR方法克隆KAP8.2基因并进行两个品种间的比较分析,实时荧光定量PCR方法分析两个品种间KAP8.2基因的表达谱差异。结果表明已成功克隆出绵羊KAP8.2基因mRNA,该片段长574 bp,其中ORF区192 bp,编码63个氨基酸,甘氨酸(Gly)和酪氨酸(Tyr)含量依次为23.8%和20.6%,属于典型的HGT-KAP家族。多态性分析显示新吉细毛羊与小尾寒羊KAP8.2基因间存在丰富的多态性,多态位点多位于CDS区两侧,其中小尾寒羊KAP8.2基因3'UTR区c192+19-39出现一个疑似fru-let-7j的作用靶位。不同组织表达谱分析显示该基因为多组织表达基因,但两个品种羊不同组织表达谱存在较大差异,表现为小尾寒羊在脾脏、肝脏和皮肤中高表达,而新吉细毛羊则在皮肤和心脏中高表达。本研究提示小尾寒羊与新吉细毛羊KAP8.2基因在基因多态性还是组织表达分布上存在显著差异,提示该基因与毛表型性状相关。  相似文献