鄂马铃薯3号遗传转化体系的构建与表达     

高志鹏  杜玉萧  冯霞  余土元  李亚男  陈大清 《湖北农业科学》2022,61(9):162-167+191

以鄂马铃薯（Solanum tuberosum L.）3号为试验材料，将含有来源于黄芪的硒代半胱氨酸甲基转移酶基因（AbSMT）的质粒pBinAr进行PCR扩增以及酶切连接构建重组转化子pBI121-AbSMT，运用农杆菌转化法，设置农杆菌菌液浓度梯度、侵染时间以及共培养时间组合进行遗传转化，并且通过PCR鉴定以及GUS组织化学染色进行基因表达验证。结果表明，筛选抗生素是50.00 mg/L的Kan，农杆菌菌液浓度为0.50(OD600 nm)，侵染时间为8 min，共培养时间为3 d，能够实现鄂马铃薯3号高效遗传转化，同时成功构建了AbSMT基因转化的鄂马铃薯3号。  相似文献   

草鱼血红蛋白通过诱导头肾巨噬细胞表达的炎症因子激活免疫反应          下载免费PDF全文

秦真东  詹凡玢  李亚男  施斐  杨敏璇  卢志杰  李军  林蠡 《水产学报》2023,47(3):039415-039415

为了探究鱼类体内过量游离血红蛋白对鱼体的影响，本实验以草鱼为研究对象，通过体内注射血红蛋白模拟体内出血，探究血红蛋白对组织和组织中巨噬细胞的免疫调控作用。体内注射血红蛋白的实验结果显示，血红蛋白的刺激导致头肾和中肾组织中出现明显的血红蛋白沉淀，同时提高了鱼体血清中的抗氧化相关酶活性，促进了头肾组织中炎症因子基因TNF-α、IL-1β和IL-10的mRNA表达水平。普鲁士蓝和间接免疫荧光实验结果显示，头肾巨噬细胞对血红蛋白表现出了吞噬活性。荧光定量PCR检测结果显示，血红蛋白的刺激显著激活了头肾巨噬细胞中CD68、CD86、CSF和MHC-Ⅱ的mRNA表达水平。进一步的细胞因子检测结果显示，血红蛋白刺激12 h后，头肾巨噬细胞中的炎症因子基因(TNF-α、IL-1β和IL-4)、趋化因子基因(CCL20和CCL4)、IFN-α和TLR4的mRNA表达水平被显著上调表达。研究表明，草鱼头肾巨噬细胞对血红蛋白具有吞噬能力，同时血红蛋白也激活了巨噬细胞中多种细胞因子的表达。本研究结果首次阐述了草鱼血红蛋白与巨噬细胞的相互作用关系，丰富了鱼类血液基础免疫学理论，同时也为鱼类健康养殖提供了新的参考...  相似文献   

优质抗稻瘟病杂交水稻新组合荃9优117     

李亚男  杨隆维  王建平  杨俊武  张丰勇  宋超新  杨龙  郑杰鑫  徐建龙  徐俊英 《杂交水稻》2023,(1):75-77

荃9优117是长江大学主要粮食作物产业化湖北省协同创新中心、中国农业科学院深圳农业基因组研究所和安徽荃银高科种业股份有限公司以荃9311A为母本，以长恢117为父本配组育成的迟熟三系杂交中籼新组合。该组合具有米质优、高产稳产、抗稻瘟病、综合农艺性状优良等特点，2021年通过湖北省农作物品种审定委员会审定。  相似文献   

三种绿肥种子萌发期抗旱性评价     

武瑞瑞  李亚男  程金焕  何红艳  杨旸  李贵平 《热带农业科学》2023,(3):41-46

为筛选适宜潞江坝干热河谷区种植的抗旱萌发的绿肥品种，以箭舌豌豆、硬皮豆和田菁为研究对象，采用2%的PEG-6000浓度模拟处理干旱胁迫，以蒸馏水处理为对照，测定发芽率、发芽指数、根系形态指标，并计算其相对值。以相对发芽率、相对发芽指数、相对根长、相对根鲜重、相对主根长、相对主根平均直径、相对总根体积、相对总根表面积等各指标抗旱系数为依据，利用隶属函数法进行抗旱能力的综合评价。结果表明，除了箭舌豌豆的主根平均直径外，3个绿肥种子的各指标均随PEG-6000浓度的升高而逐渐降低；但是各指标降低幅度不同。2处理中，发芽率、发芽指数大小顺序均为硬皮豆>箭舌豌豆>田菁。根系形态指标中，PEG组所有指标大小顺序均为箭舌豌豆>硬皮豆>田菁；蒸馏水组，除了总根重外，其他指标大小顺序是硬皮豆>箭舌豌豆>田菁，总根重大小顺序是硬皮豆>田菁>箭舌豌豆。根系形态指标的变化幅度顺序均是硬皮豆>田菁>箭舌豌豆，发芽率的降低幅度顺序为箭舌豌豆>硬皮豆>田菁，发芽指数的降低幅度顺序为硬皮豆>箭舌豌豆>田菁。可见各材料在各指标间的表现趋...  相似文献   

抗菌素对草鱼肠道免疫和菌群的影响          下载免费PDF全文

黄垚  秦真东  陈嘉俊  杨敏璇  徐子正  杨友成  黎烽  詹凡玢  李亚男  李清清  林蠡  施斐 《水产学报》2023,47(10):109406-109406

为探究抗菌素对草鱼免疫和肠道菌群的影响，本实验以草鱼为研究对象，设置基础饲料(对照组)、基础饲料添加恩诺沙星或氟苯尼考3组饲料，投喂草鱼2周后，通过肠道酶活检测、荧光定量PCR (qRT-PCR)和高通量测序技术分析饲料中添加抗菌素对草鱼肠道免疫及肠道菌群多样性影响。分析结果显示，(1)饲料中添加恩诺沙星和氟苯尼考降低了草鱼肠道谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量，提高丙二醛(MDA)的含量，导致草鱼肠道氧化应激。(2)氟苯尼考组中的TNF-α、IL-1β、IL-12、NF-κB-P65、MHCⅡ、s IgM等免疫因子和ZO-1、ZO-2、occludin、CLDN-1、JAM3等黏膜相关蛋白的mRNA表达量显著下降，恩诺沙星组的免疫因子TNF-α、IL-1β、IL-12、TLR4、MHCⅡ和黏膜相关基因ZO-2、occludin、CLDN-1、JAM3的mRNA表达量显著下降。(3)通过16S rRNA高通量测序来揭示拌食投喂抗菌素对草鱼肠道微生物群落结构的影响，分析结果显示，饲料中添加恩诺沙星或氟苯尼考对草鱼肠道α多样性无显著差异，但对...  相似文献   

蛙病毒PCR检测方法的建立与比较分析          下载免费PDF全文

李亚男  刘春  林华剑  秦真东  林蠡 《水产学报》2023,47(8):089415-089415

为了进一步丰富蛙虹彩病毒检测方法，实验针对蛙病毒3型(frog virus 3,FV3)核衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因保守区设计一对特异性引物，并选取另外2种蛙病毒PCR检测方法进行对比实验，通过反应体系的优化、反应特异性和敏感性实验，建立了一种针对FV3的PCR检测方法。结果显示，该方法最低检测限可达1.2个拷贝数的病毒粒子，与神经坏死病毒、虾血细胞虹彩病毒、大口黑鲈虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒、鲤浮肿病毒、传染性脾肾坏死病毒、加州鲈弹状病毒等常见水产动物致病毒株无交叉反应。临床样品检测表明，该方法所获得的检测结果与另外2种方法一致，结果可靠。本研究所建立的FV3 PCR检测方法，具有简便、快速、敏感度好、特异性高、低成本等特点，可用于FV3蛙病毒的快速诊断和分子流行病学调研。  相似文献