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【目的】克隆克氏原螯虾(Procambarus clarkii)过氧化物还原酶4基因(Pc-prx4),分析Pc-prx4基因的正常组织表达以及细菌刺激后的相对表达情况,分析其抗氧化功能,为Pc-prx4在病原刺激后的先天免疫机制以及抗氧化功能研究提供参考依据。【方法】以Pc-prx4为目的基因,通过相关网站和软件(Expasy、 Translate tool、SMART、Expasy ProtParam tool、BLASTx、MEGA-X)进行生物信息学分析。通过qRT-PCR检测Pc-prx4在正常组织中的表达量以及金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、鲶爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)刺激下的表达量;通过构建表达菌株、诱导纯化r Pc-PRX4蛋白,对重组蛋白进行抗氧化功能研究。【结果】Pc-prx4开放阅读框744 bp,编码247个氨基酸,含有烷基氢过氧化物还原酶(AhpC)结构域、巯基特异性抗氧化结构域和1-Cys prx过氧铁氧酶的C末端结构域;Pc-PRX4蛋白分子式为C1249H1934... 相似文献
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以刺梨果总多酚提取率为考察指标,使用乙醇回流法提取刺梨果总多酚。基于单因素试验,正交试验优化提取工艺,并探讨刺梨果总多酚的抗氧化活性。结果表明:最佳提取工艺参数:料液比1∶20(g/ml),提取温度60℃,乙醇体积分数55%,提取时间3 h,提取次数1次。在该工艺条件下,刺梨果总多酚提取率为(1.76±0.03)%。刺梨果总多酚对1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)氧自由基和2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)氮自由基的清除能力均优于抗坏血酸,表明刺梨果总多酚对DPPH氧自由基和ABTS氮自由基均有较好的清除作用,IC50值分别为7.5μg/ml和8.3μg/ml,提示刺梨果总多酚具有较好的抗氧化活性。研究结果为刺梨果总多酚的开发利用提供基础。 相似文献