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为了建立猪圆环病毒2型（PCV2）SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,采用PCR扩增PCV2 ORF2基因242 bp片段,并克隆入pMD18-T载体中,以纯化的重组质粒为模板作荧光定量PCR扩增,建立了PCV2荧光定量PCR检测方法,该方法检测灵敏度可达1.2×101拷贝/μL,与猪圆环病毒1型（PCV1）、猪瘟病毒（CSFV）、猪蓝耳病病毒（PRRSV）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、乙型脑炎病毒（JEV）核酸均不发生扩增反应,具有很好的特异性和重复性。结果表明：建立的PCV2实时荧光定量PCR检测方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PCV2的检测。 相似文献
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猪圆环病毒3型感染猪后能引起猪厌食、皮炎和肾病综合征、母猪繁殖障碍、仔猪先天性震颤、多系统衰竭综合征等多种疾病,是一种新发的猪传染病,未来可能会给养猪业造成巨大的经济损失。文章综述了6种猪圆环病毒3型分子生物学检测方法,主要包括核酸探针、常规PCR法、套式PCR法、多种PCR、荧光PCR方法、环介导等温扩增技术等。 相似文献
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根椐Gen Bank中登录的猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)核苷酸序列,分别设计2对引物,在建立各病毒单项PCR技术的基础上,优化双重PCR反应条件,建立了2种病毒的双重PCR检测方法,用这2对引物对同一样品中的PCV2和PPV核酸模板进行双重PCR扩增,结果可同时扩增PCV2的245 bp、PPV的475 bp的特异性片段,而对其他4种病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,该双重PCR技术能检出1 pg的PCV2和1 pg的PPV模板。用105份临床病料对本研究双重PCR技术和单项PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为100%。表明建立的双重PCR检测方法具有特异、快速、准确的特点,可用于对这两种病毒的同时检测和鉴别诊断。 相似文献
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口蹄疫基因工程疫苗研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
正口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-andmouth disease virus,FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,可感染猪、牛、羊等70多种动物~([1])。该病传染性强、传播快、在世界范围广泛流行。OIE将其列在15个A类动物疫病之首,我国政府也将其排在一类动物传染病的第一位。一年四季均可发病,多发于冬、春寒冷季节~([2])。FMDV是小RNA病毒科口蹄疫病毒属,其核酸为单股正链RNA,大小约8.5kb,由L基因、P1结构 相似文献
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从鲁北地区某猪场疑似患链球菌的仔猪群中采取病料组织,进行病原菌的分离;对分离细菌进行形态观察、染色镜检、生化试验、药敏试验、PCR鉴定与动物致病性试验。镜检结果发现,分离菌为革兰氏阳性、长链、球菌;生化试验该菌可发酵葡萄糖、果糖、半乳糖、山梨醇、麦芽糖、柳醇、水杨素、蔗糖、海藻糖和乳糖等;接种试验动物小白鼠全部死亡;药敏试验显示,该菌对头孢噻呋、万古霉素、红霉素、庆大霉素、克林霉素、克拉霉素等高度敏感。确定分离到一株猪链球菌,临床采用敏感药物治疗迅速控制疫情蔓延,取得良好效果。 相似文献
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基于16S rRNA基因的枯草芽孢杆菌PCR快速检测方法的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
参照GenBank中登录的枯草芽孢杆菌16S rRNA基因,设计1对引物,扩增片段大小为460bp的基因片段,该方法对枯草芽孢杆菌检测的灵敏性为1pg总DNA量,对枯草芽孢杆菌DNA的扩增结果为阳性,对照菌株扩增结果均为阴性,成功地建立了枯草芽孢杆菌PCR检测方法。该方法具有快速、灵敏度高、特异性强等优点,为枯草芽孢杆菌的分离及鉴定奠定了良好的基础。 相似文献