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41.
鸡白细胞介素-18基因的原核表达及多克隆抗血清的制备 总被引：9，自引：0，他引：9
将编码鸡白细胞介素-18(interleukin-18，IL-18)成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达载体pPROEXTMHT中，构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IPTG于37℃诱导培养。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在，目的蛋白表达量占菌体蛋白的30％。SDS-PAGE和Western blot分析显示，表达的鸡IL-18融合蛋白相对分子质量约为23000。包涵体被6mol／L盐酸胍裂解后，通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡IL-18融合蛋白及其纯化产物经3次肌肉注射豚鼠，制备豚鼠抗鸡IL-18多克隆抗血清，并用琼脂扩散试验多克隆抗血清进行了证明。本试验成功的原核表达、纯化了鸡IL-18融合蛋白，并制备了抗鸡IL-18多克隆抗血清，为下一阶段关于鸡IL-18重组蛋白生物学特性及其应用的研究打下了坚实的基础。 相似文献
42.
1、发病情况:苗鹅300只,用陈稻草作垫料,喂莴苣叶、黄豆粉和米。饲养10天后,发现部分鹅发病死亡。畜主疑是小鹅瘟,自购抗小鹅瘟高免血清治疗,三天后发病死亡不见减少,反而增多,共死亡54只,死亡率18％。2、临诊症状:病初少食,后期不食,有时拉稀,缩头弓背,张口甩头,鼻流浆液,呼吸有“呼噜”声,一侧眼流水,下眼睑肿胀、结痂,剥去痂疤,有黄豆粒大小干酪样坏死灶,病程3-5天。3、病理变化:剖检8例。气囊明显增厚,有多量淡黄色的小结节。肌胃、肠浆膜、肺脏密集淡黄色或灰白色 相似文献
43.
猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因的克隆与同源性比较 总被引：2，自引：0，他引：2
用猪睾丸 (Swine testicle,ST)细胞繁殖并扩增猪传染性胃肠炎病毒国内分离株 TH- 98,根据 Gen Bank中已发表的TGEV S基因 c DNA序列 ,利用 Oligo4.1程序软件设计并合成两对引物 ,进行逆转录聚合酶链式反应 (RT- PCR) ,扩增出2 .3kb和 2 .1kb两个片段 ,分别命名为 Sa与 Sb,先后插入到 p UC18质粒载体上的 Eco RI和 Pst I多克隆位点上 ,构建了重组质粒 p UC- S。根据 TGEV S基因位点和 p UC18的物理图谱 ,用相应的限制性内切酶进行酶切及套式 PCR方法进行鉴定、分析 ,证明克隆的 p UC- S为 TGEV S基因。同时对 p U C- S进行序列测定分析 ,并与来自美国、英国和日本的五个毒株进行核苷酸及编码氨基酸同源性比较 ,证明了 S基因的高度保守性 相似文献
44.
本实验对TGEVS基因核酸疫苗免疫后免疫器官的变化进行了研究,同时比较了两种核酸疫苗单独免疫小鼠后免疫器官的变化,证明重组核酸疫苗诱导小鼠产生免疫应答。 相似文献
45.
感染鸡贫血病毒雏鸡接种新城疫疫苗后免疫功能和免疫调节的变化 总被引：1，自引：1，他引：0
雏鸡1日龄感染鸡贫血病毒，8日龄接种Lasota疫苗，以未感染免疫雏鸡为对照，于免疫后7、14、28d检测血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,在凝抑制抗体（HI）滴度；胸腺、法氏囊、脾脏T细胞、IgG^ 、IgM^ 、IgA^ ,抗体生成细胞数量及T、B细胞增殖反应；胸腺、脾脏细胞因子IL－2、IFN活性的变化。结果发现，感染CAV雏鸡Lasota疫苗免疫后，其血清IgG、IgM、IgA免疫球蛋白含量明显减少，HI抗体滴度降低；胸腺、法氏囊、脾脏T细胞、抗体生成细胞数量降低及T、B细胞增殖反应减弱，胸腺、脾脏IL－2及TNF诱生活性降低，表明其细胞免疫和体流免疫功能以及细胞因子免疫调节作用均未感染免疫雏鸡明显减弱。 相似文献
46.
文章通过RT-PCR方法扩增传染性支气管炎病毒（IBV）HH06株M全长基因，经抗原性和亲水性分析，将M部分序列成功亚克隆于pET-30a（+）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET30a-M转化E. coli Rosetta （DE3）感受态细胞，诱导表达获得20 ku重组M蛋白。Western blot检测表明，重组蛋白能够与IBV参考阳性血清反应。以纯化重组M蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体，其ELISA效价达到1??218；Western blot结果证实，其具有良好的反应性和特异性。间接免疫荧光试验表明，抗M蛋白多克隆抗体可检测到PVAX-M1转染BHK-21细胞表达的M蛋白，与IBV HH06毒株具有很好的特异性反应。病毒感染抑制试验表明，多抗血清对IBV Beaudette株的抑制率可达到25.9%。为IBV检测及M蛋白功能的研究奠定基础。 相似文献
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1发病情况江苏省金湖县陈桥镇养猪大户杨某,抓住本地区能繁母猪偏少、市场苗猪供不应求的机会,于2004年5月18日,从外地苗猪市场一次购进平均体重8千克仔猪317头(绝大多数为30～40日龄刚断奶猪),准备经过5～7个星期的暂养后,在本地市场出售。结果到家第3天,发现死猪1头,病猪10多 相似文献