H3N2亚型猪流感病毒HA1、HA2基因的原核表达及抗原性分析     

宋玉慧  王翔宇  王洁琼  潘梦梦  张剑  刘琳  李新生 《中国畜牧兽医》2016,43(10):2762-2767

血凝素（hemagglutinin,HA）蛋白是猪流感病毒（swine influenza virus,SIV）的一个重要蛋白,在疾病预防和治疗中具有重要作用。本试验旨在克隆和表达H3N2亚型猪流感病毒A/swine/Henan/1/2010（H3N2）的HA1和HA2基因。用含有H3N2亚型SIV的鸡胚尿囊液提取RNA,RT-PCR扩增后将目的基因定向克隆到pET-28a（+）原核表达载体上,并将其转入宿主菌BL21（DE3）pLyS进行表达,IPTG诱导后经SDS-PAGE检测并用该病毒重组HA蛋白制备的特异性单克隆抗体1C10作为一抗对两种蛋白进行Western blotting分析。SDS-PAGE结果显示,得到HA1和HA2大小分别为34.8、23.2 ku的重组蛋白,Western blotting结果表明,HA1蛋白与1C10单克隆抗体具有良好的反应原性,且1C10单克隆抗体表位在HA1蛋白上。本试验结果为进一步研究血凝素蛋白的结构和功能,以及建立快速诊断方法和基因工程疫苗提供材料。  相似文献   

玉米源、库、流研究进展   总被引：3，自引：0，他引：3  

梁引库  王美妮  李新生  陈德经  江海 《陕西农业科学》2006,(6):107-110

源、库、流理论是作物高产育种的热点问题之一,回顾了近年来玉米源、库、流的研究成果并阐述了玉米源、库、流的发展方向。并指出玉米源、库、流的协调发展是玉米高产育种的必要条件。  相似文献   

菌粮间作效益高     

李新生 《农业科技与信息》2004,(7):34-34

山东新泰市食用菌研究所在玉米地里栽培鸡腿菇获得高产。鸡腿菇是现在新发展的一个食用菌品种,味鲜美脆嫩,通常在室内和大棚内栽培,低温季节出菇。该所在玉米地里栽培,8月  相似文献   

黄瓜新品种“甜露”     

李新生 《北京农业》2002,(8):13-13

近年来,黄瓜杂交制种迅速发展,已成为一大支柱产业,广大农户的采种栽培技术日臻成熟,种子产量由最初的667米2单产20～30公斤提高到60公斤左右,最高单产已达155公斤,创下了黄瓜制种史上的最高记录.但种子质量参差不齐,直接影响到种子的加工及销售.根据多年来的实践,笔者认为在种子采收及加工过程中按照以下几个步骤操作,可确保质量达到国家标准,即净度99%,含水量低于8%,种子无粘连现象.  相似文献   

苗木生产莫跟风     

李新生 《农技服务》2002

  相似文献   

贮存时间对造纸法再造烟叶内在质量的影响     

赵东辉  李新生  苏雷  林晓利 《安徽农业科学》2015,(36)

[目的]研究贮存时间对再造烟叶内在质量的影响。[方法]采取实验室试验,用现代分析方法检测再造烟叶的p H、多酚、有机酸和糖类含量,并进行感官评吸。[结果]试验表明,再造烟叶的颜色稳定性良好,p H逐渐下降;3种多酚含量均先减小后增加;7种有机酸和2种糖类含量均先增加后减小;再造烟叶的感官质量总体变化不大,中后期略有下降。[结论]了解贮存时间对再造烟叶内在质量的影响,对获取最佳储存时间和优化库存结构有一定指导意义。  相似文献   

利用HPLC法测定狼牙刺种子氧化苦参碱含量   总被引：1，自引：1，他引：0  

江海  吴三桥  李新生 《江苏农业科学》2008,(6)

采用高效液相色谱法分析测定狼牙刺氧化苦参碱含量.色谱条件:色谱柱为ZORBAX -C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相为0.04 mol/L磷酸溶液-甲醇(90 ∶10);流速1.0 ml/min;检测波长220 nm;柱温20 ℃;试样进样量10 μl;检测时间12 min.测定结果,氧化苦参碱与其他组分能达到基线分离.该方法能够用于狼牙刺及其他生物材料的氧化苦参碱分析测定.  相似文献   

EDSV HN03株纤维蛋白基因的克隆与序列分析     

陈红英  李新生  崔保安 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2008,36(9):1-4

【目的】研究减蛋综合征病毒(EDSV)河南HN03株纤维蛋白基因全序列,为进一步分析EDSV纤维蛋白基因的结构、功能以及EDSV基因工程疫苗的研究奠定基础。【方法】根据GenBank中收录的EDSV纤维蛋白基因序列(Z86065),设计并合成了1对引物,PCR扩增EDSV河南HN03株纤维蛋白基因。将扩增产物克隆入pTG19-T载体并测序。【结果】测序结果表明,HN03株纤维蛋白基因为1935 bp,包含一个完整的开放阅读框,编码644个氨基酸,推导的氨基酸序列有5个潜在的N-糖基化位点,有5个与二硫键形成有关的半胱氨酸。序列分析表明,EDSV HN03株与EDSV国际标准株AV-127纤维蛋白基因核苷酸同源性为99.3%,氨基酸同源性为99.2%;与鹌鹑腺病毒QU株纤维蛋白基因核苷酸同源性为98.9%,氨基酸同源性为98.4%。【结论】腺病毒纤维蛋白基因相当保守。  相似文献   

基于TaqMan探针的猪细小病毒实时荧光定量PCR方法的建立     

陈红英  李新生  崔保安  杨明凡  金钺  刘金朋 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2008,34(6)

根据GenBank公布的猪细小病毒VP2基因序列,利用Premierexpress软件设计并合成了1对引物和1条相应的TaqMan探针,从猪细小病毒感染的PK．15细胞中提取DNA,经PCR扩增VP2基因,纯化的PCR产物克隆入pGEM-TEasy载体中,构建重组质粒．转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线．在25此扩增反应体系中,对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度和退火温度进行优化,建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序．该方法能够特异、定量检测猪细小病毒,灵敏度达1．12TCID50／mL．  相似文献   

村官“城居”越来越多令人忧     

李新生 《山西农业:致富科技版》2008,(2):20-20

村官新的现象：“城居” 村官“城居”成了“走读干部”,是农村群众对那些工作在村里、居住在城里的农村干部的一种说法。以前,这种现象曾普遍存在于乡镇干部中间,但随着经济社会的不断发展,城乡—体化的快速推进,这种“城居”现象逐步发展到了本是土生土长的农村干部身上。  相似文献