猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ-ELISA鉴别诊断试剂盒的研制与应用     

贾凡  胡军勇  王建银  石碧  李树清  陈焕春  周锐 《农业生物技术学报》2007,15(6):911-917

胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)是一种严重危害世界养猪业的重要病原菌,至少有15种血清型,根据所有血清型菌株仅在感染猪体内产生外毒素ApxⅣ的特点,建立了一种能够区分感染猪与免疫猪的鉴别诊断方法ApxⅣ-ELISA。研究在反应条件方面加以优化,将该诊断方法进一步研制成试剂盒,对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行了测试,与间接血凝试验及IDEXX公司的CHEKIT-APP-APXⅣ试剂盒进行了对比研究,并用该试剂盒检测了来自中国、英国、丹麦、美国、加拿大、澳大利亚等国的临床猪血清1453份。结果表明,ApxⅣ-ELISA试剂盒具有很高的特异性和敏感性,与CHEKIT-APP-APXⅣ试剂盒的检测符合率为91.37%;3批试剂盒的批内和批间重复性良好(变异系数均<15%);试剂盒在2～8℃保存9个月内稳定性良好。所检种猪血样中,来自中国猪场1、中国猪场2、美国、加拿大、丹麦、澳大利亚和英国的ApxⅣ抗体阳性率分别为30.05%、70.69%、39.72%、0.64%、42.22%、1.85%和93.94%;所检我国2个规模化猪场的仔猪ApxIV抗体阳性率分别为21.77%和27.15%,育肥猪的阳性率分别为5.51%和11.07%。研究表明,ApxⅣ-ELISA试剂盒能够有效区分APP感染猪与三价灭活疫苗或亚单位疫苗免疫猪。  相似文献   

利用套式PCR检测牛羊乏质体     

李树清  王贵强  陈志飞  赵俊龙  王巧全  张子群  由轩  胡永强  杜凯  姚宝安 《畜牧兽医学报》2011,42(12)

为同时检测和鉴定牛边缘乏质体、中央乏质体及绵羊乏质体,根据这3种病原体的msp4基因核苷酸序列,自行设计、合成了针对3种乏质体的2对通用引物,及分别针对三者的特异引物,通过PCR条件优化,建立了检测乏质体及分别鉴定3种乏质体的套式PCR方法,并与OIE推荐的msp5半套式PCR比较.结果显示:该方法对牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、羊莫氏巴贝斯虫、山羊泰勒虫、温氏附红细胞体、东方巴贝斯虫、刚地弓形虫、伊氏锥虫均未扩增出特异性片段.套式PCR检测乏质体DNA量为0.2 pg(相当于6个感染红细胞).检测l 119份来自6个不同地区的奶牛、肉牛、水牛及羊的临床样品,阳性106份,经鉴定边缘乏质体46份,中央乏质体15份,绵羊乏质体35份,混合感染中央乏质体和绵羊乏质体4份,混合感染边缘乏质体和绵羊乏质体3份,混合感染边缘乏质体和中央乏质体3份.首次在分子生物学水平证明中央乏质体存在于中国.同时,证明牛可以混合感染边缘乏质体和中央乏质体或绵羊乏质体,以及混合感染中央乏质体和绵羊乏质体.上述848份样品用OIE推荐的msp5半套式PCR同时检测,两者符合率为98.5％(835/848).检测结果表明,msp4套式PCR特异、敏感,可用于边缘乏质体、中央乏质体、绵羊乏质体的检测和鉴定.  相似文献   

裸鼠过度角化症牛棒状杆菌的分离鉴定     

张强  熊炜  李健  李树清  王巧全  黄忠荣  陈粹 《中国预防兽医学报》2011,33(8)

2010年8月一批进口入境的裸鼠在隔离期间发生了疑似国外文献报道的过度角化性皮炎,为了确诊该病及鉴定该病的病原,本研究从患病裸鼠皮肤组织分离到一株革兰氏阳性杆菌。细菌纯化后经Biolog自动生物鉴定仪系统初步鉴定为牛棒状杆菌(C.bovis);提取细菌基因组,PCR扩增16S rRNA基因,测序结果经比对与GenBank中的C.bovis同源性在99%以上;培养物感染裸鼠没有出现临床症状,但组织学检查显示,感染裸鼠表皮棘皮层增厚,表现出轻微的C.bovis感染特有的棘皮症。由此可以确认这次入境裸鼠暴发的疫病为过度角化症,病原为C.bovis。本研究首次报道了在我国实验动物设施暴发的裸鼠过度角化症,提示裸鼠感染C.bovis导致的过度角化症是实验动物质量监测中不可忽视的传染病。  相似文献   

中兽医的研究方法与展望     

李树清 《河南畜牧兽医(综合版)》1993,(2)

任何事物的成长壮大,总是在不断的自我否定、完善中前进和发展的。在科学飞速发展的今天,探讨中兽医学术发展和面临的问题,把握机制、扬长避短,在吸收现代科学营养的基础上,进行健康发展。展望未来,以继承和发扬祖国兽医学遗产,更好地为发展和保护畜禽健康。  相似文献   

治疗黄牛疥癣病验方     

李树清 《上海畜牧兽医通讯》1987,(5)

先用适量10％盐水,擦去皮肤上的污物,再用浓盐水将局部皮肤洗擦干净,使药液能充分接触皮肤。药液配方:95％酒精100毫升,樟脑粉10克,煤酚皂溶液200毫升,常水300毫升。配成药水。用法:先试以药液抹一如铜钱大小的面积,观察半小时,如局部皮肤无异常反应,即可应用。对全身性疥癣感染者,每天只能用药涂抹全身的四分之一。  相似文献   

菌糠饲料喂猪试验     

李树清  王镇江  周雪操  杨镇友 《饲料研究》1981,(2)

农作物的秸秆、秕壳等副产品产量大,来源广,是廉价易得的饲料资源,但其缺点是,粗纤维含量高,营养价值低。为了解决这个问题,几年来,我们用简易方法进行了降解粗纤维,换取醣和蛋白质,提高粗饲料营养值的研究,使用生长在树上的冻菌和柳菌,栽培于秸秆粗糠培养料上,结果是既提高了粗饲料的营养价值,  相似文献   

荧光定量RT-PCR鉴别IBDV超强毒株与经典疫苗毒株     

汪振兴  李树清  孙建和 《上海交通大学学报(农业科学版)》2009,27(2)

鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒株的出现给该病的防控带来了新的困难,有效鉴别IBDV超强毒株对IBD的防控有着积极意义.根据IBDV VP4基因的保守序列,设计了一对通用引物RPa/RPb,特异性扩增IBDV VP4基因720 bp的目的片段.根据超强毒株和经典毒株VP4基因序列的差异,分别合成了FAM标记的超强毒荧光探针和JOE标记的经典毒荧光探针,建立了实时荧光RT-PCR鉴别IBDV超强毒株与经典疫苗毒株的方法.检测超强毒和经典毒的敏感性分别可达420和320个拷贝数.建立的实时荧光RT-PCR方法敏感性高、特异性强,可用于临床样品中IBDV超强毒和经典毒的鉴别诊断.  相似文献   

东方红林业局旅游客源市场分析及游客规模预测     

郭传合  李树清 《林业勘查设计》2009,(2)

通过对国内外及黑龙江省旅游大环境的分析,阐述了东方红林业局重要旅游资源的优势及发展前景。  相似文献   

电针穴位镇麻作黄牛剖腹产53例观察     

李树清 《青海畜牧兽医杂志》1988,(4)

近年来,家畜分散喂养,部分家畜精料过多,运动不足,使难产病例有所增加。1981—1987年笔者在临床上用电针镇麻作黄牛难产的剖腹产手术53例,现作简要介绍。一、临床资料:病例来源于本县乡村  相似文献   

流行性出血热免疫荧光试验     

徐红  李树清 《中国进出境动植检》1994,(4):30-32

我们应用间接免疫荧光试验,对农村中散户饲养的作为出口的家兔血清200份和上海地区几个饲养场的大白鼠701只,实施流行性出血热(EHF)的检疫,发现农村散户饲养的家兔血清(EHF)的阳性率为7％;饲养条件好的,隔离设施严密的大白鼠EHF检测全场均为阴性,而条件差,无严密的隔离设施的饲养场的大白鼠EHF检测阳性率为32％,并能分离到EHFV。上述结果表明,家兔中确实存  相似文献