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为掌握动物用疫苗中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的污染情况,抽取16份市售动物用疫苗,分别采用ELISA和荧光定量RT-PCR检测病毒抗原和核酸。结果显示,ELISA检测中有2份(猪瘟疫苗)为阳性,荧光定量RT-PCR检测均为阴性。结果表明,我国兽用疫苗中的BVDV污染水平较低,但不容忽视。 相似文献
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【目的】实现A型塞内卡病毒(Seneca virus A,SVA)VP1蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达,以建立SVA抗体液相芯片技术检测方法。【方法】根据GenBank收录的SVA VP1基因序列(登录号:KY747514.1),基于大肠杆菌的密码子偏好性优化合成VP1基因,克隆到pCold TF载体,构建重组质粒pCold TF-VP1。将重组质粒pCold TF-VP1转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,进行IPTG诱导表达。通过优化诱导时间及IPTG浓度得出最佳诱导表达条件。采用His标签镍柱纯化VP1重组蛋白,将纯化后的SVA VP1蛋白与荧光微球进行偶联,偶联好的微球与阴阳性血清反应,利用Luminex 200系统上机检测背景及阴阳性血清的中值荧光强度(MFI),从而判断阴阳性,以用于猪血清中SVA抗体的检测。【结果】重组质粒pCold TF-VP1成功转入大肠杆菌BL21感受态细胞,并以可溶性蛋白形式表达。经诱导表达在约82 ku处出现阳性条带。当重组菌株诱导条件为16 ℃、IPTG终浓度为1.2 mmol/L、诱导时间为3 h时,VP1蛋白表达量最高;经Western blotting分析,可在82 ku处出现明显条带。将VP1 蛋白与荧光微球偶联,阴性对照(背景)的平均荧光值为17(<100)。测试孔的平均MFI为2 339.5(>2 000),证明SVA VP1蛋白与微球偶联成功,偶联成功的荧光微球可用于检测猪血清中SVA抗体的检测。【结论】本研究在大肠杆菌中成功表达并纯化了SVA VP1蛋白,初步建立了SVA抗体液相芯片检测方法,为后续研究奠定了基础。 相似文献
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吊罗山自然保护区位于海南省东南部,是海南省乃至全国保存有原始热带雨林的自然保护区之一。该区雨量充沛,年降雨量1870~2760mm。雨水流向较集中,南坡主要流入吊罗河、南喜河、大里河等河流,最后汇入陵水河,北坡则主要经乘坡河、牛路岭水库,流入万泉河。吊罗山热带雨林区是陵水河的主要发源地,也是万泉河的发源地之一。对调节该区及其周围的水量平衡、保障其社会和经济的发展具有重要的意义。由于该区地形复杂,河流落差大,雨水又比较集中,因而水能蕴藏量很大,水力资源丰富,现已建成水电站6座,每年总发电量为3243万kwh,水库1座,总库容为4500万m^3。该区热量条件也十分丰富,总辐射量110kcal/cm^3,年平均日照时数1676~2150h。占可照时数的38%~49%。全年暖热,年平均气温约24.4℃,最冷月份平均气温15.4℃,相对湿度月均80%~85%。多雨月份达90%以上。 相似文献
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把政策交给群众为农民减轻负担唐海祥,李桂梅河北省永年县电力局(057150)为扎扎实实落实农村电价,让农民用上舒心电,出个合理钱,永年县电力局的电价整顿之风,吹遍了全县453个用电村,帮助农民甩掉了不合理的用电负担。他们的做法是:1.把政策交给群众。... 相似文献