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猪L-Myc基因的分子克隆及在细胞重编程中的应用 总被引：1，自引：1，他引：0
【目的】克隆猪L-Myc基因,并在蛋白水平表达的情况下探索其在细胞重编程中的作用,为深入研究猪L-Myc基因替代c-Myc诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cell,iPSC）奠定基础。【方法】先通过NCBI序列比对,采用RT-PCR克隆猪L-Myc基因cDNA,生物信息学分析猪L-Myc基因与人和小鼠的同源性,构建融合表达载体pEGFP/L-Myc-C1,通过载体转染和免疫印记检测猪L-Myc基因cDNA的蛋白水平表达;再将L-Myc基因装入逆转录病毒载体中,分别使用不同的转录因子诱导猪胎儿成纤维细胞（porcine embryo fibroblast,PEF）,通过形态变化和碱性磷酸酶（AP）染色验证猪L-Myc基因在细胞重编程中的作用。【结果】①获得了1 113 bp的猪L-Myc基因cDNA,编码364个氨基酸,理论分子质量为40 kD;②生物信息学分析显示猪L-Myc基因与人和小鼠高度同源;③免疫印记检测结果说明猪L-Myc基因cDNA能够在蛋白水平表达;④细胞诱导试验和AP染色结果显示转录因子Oct4、Sox2、Klf4和L-Myc（OSKL）组合诱导的细胞阳性克隆率明显高于Oct4、Sox2和Klf4（OSK）组合的阳性克隆率。【结论】获得了猪L-Myc基因,并且该基因在蛋白水平表达且在细胞重编程过程中起到了重要的作用。 相似文献
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通过设置花椰菜(Brassica oleracea var.botrytis L.)横向与纵向的氮肥施肥田间试验,来探讨花椰菜最佳氮肥用量和最佳氮肥运筹。结果表明,当花椰菜的氮肥施用量为369.45kg/hm2时,其产量最高,为25 920kg/hm2;在同样磷钾肥背景条件下,氮肥最佳运筹比例为5:5,其产量均高于其他处理。这为上海地区花椰菜科学施肥决策提供了依据。 相似文献
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Fox类转录因子在细胞生长、增殖、分化和胚胎发育等过程中发挥重要功能,SGF-1是家蚕丝腺细胞转录因子,属于Fox类转录因子家族。家蚕SGF-1(BGIBMGA005101-TA)基因位于第25号染色体nscaf2823:112743~113792(+strand),含有1个外显子,CDS全长1 050 bp,编码349个氨基酸。家蚕品种大造5龄第3天幼虫的基因芯片表达谱显示,SGF-1基因在大多数组织中有表达,在丝腺中高量表达,其中在前部和中部丝腺的表达量略高于后部丝腺,在雄蚕中的表达量略高于雌蚕。氨基酸组成分析显示,SGF-1蛋白富含脯氨酸、丝氨酸、丙氨酸和亮氨酸,且多数为亲水性氨基酸。序列结构分析表明,SGF-1包含典型的Forkhead结构域,其两端分别为Forkhead_N末端结构域和HNF3_C末端结构域,其中大多数氨基酸残基形成了无规则卷曲结构,α-螺旋与β-折叠结构分别约占18.0%和0.6%。从家蚕后部丝腺克隆了SGF-1基因,并构建麦芽糖结合蛋白标签融合表达载体,表达并纯化了重组SGF-1蛋白。通过RT-PCR与Western blotting检测分别从基因转录水平和蛋白质表达水平上证实,SGF-1在家蚕5龄第3天幼虫丝腺中高量表达。亚细胞定位实验显示SGF-1定位于细胞核中。这些结果为深入研究SGF-1的结构和功能提供了有益的基础信息。 相似文献
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植物基因工程及其在蔬菜育种方面的应用前景 总被引：1，自引：0，他引：1
概述了植物基因工程的主要环节、获得转基因植物后需进行的追踪研究工作以及植物基因工程在蔬菜育种方面的应用前景。 相似文献
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精氨酸对笼养育雏期蛋鸭生产性能及抗氧化功能的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
试验旨在研究饲粮中添加不同水平精氨酸对0~4周龄笼养蛋雏鸭生长性能及抗氧化功能的影响,探讨笼养育雏期蛋鸭适宜的精氨酸添加水平。试验采用单因素完全随机分组设计,选择健康1日龄金定蛋雏鸭180只,随机分为5组,每组6个重复,每个重复6只鸭,对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂在玉米-豆粕型基础饲粮基础上分别添加0.10%、0.20%、0.30%、0.40%精氨酸的试验饲粮,试验期4周。结果表明：①饲粮中添加精氨酸平均日增重Ⅲ组显著高于其他各组(P<0.05),Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组间差异均不显著(P>0.05),Ⅱ、Ⅳ组显著高于Ⅰ组(P<0.05);平均日采食量以Ⅰ组最高,但各组间差异均不显著(P>0.05);料重比以Ⅲ组最低,显著低于其他各组(P<0.05),Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组间差异不显著(P>0.05),同时,Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组显著低于对照组(P<0.05)。②Ⅲ组血清和肝脏总抗氧化能力(T-AOC)与对照组相比差异显著（P<0.05),Ⅱ组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性与对照组相比差异显著(P<0.05);Ⅳ组肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性与对照组相比差异显著(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肝脏丙二醛(MDA)含量与对照组相比差异显著(P<0.05),根据试验中有效评价精氨酸营养需要量的抗氧化指标,估测精氨酸添加水平分别为0.183%、0.198%、0.093%、0.208%。由此可见,蛋雏鸭采食玉米-豆粕型基础饲粮,精氨酸的适宜添加水平为0.093%~0.208%。 相似文献
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通过设定不同浓度的BTH和BABA对2年生龙井43进行喷雾处理,探讨两种物质对茶树新梢部分生长指标、茶鲜叶主要品质化学成分的含量和相关代谢酶活性的影响。结果表明,与对照相比,处理后新梢芽长和芽重、含水量、干物质量差异不显著（P>0.05）。鲜叶中多酚类物质、总氨基酸、咖啡碱和可溶性蛋白的含量均有不同程度的提高,75 mg·L-1 BTH处理后含量分别增加了29.32%、49.10%、23.77%、96.34%;400 mg·L-1 BABA处理后含量分别增加了15.75%、45.50%、21.31%、87.18%。可溶性糖含量和酚氨比降低。PPO和GS两种酶的活性明显提高,而POD和PAL的活性相应降低。以上研究初步表明75 mg·L-1的BTH和400 mg·L-1的BABA可以通过调节茶叶的主要化学品质成分和相关酶的活性,在一定程度上改善茶叶的品质。 相似文献
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【目的】了解目前微塑料（microplastics,MPs）对淡水养殖生态系统的污染水平及其养殖生物的生态毒理效应和影响机制,为水产养殖业的微塑料污染管理和水产品的食品质量安全提供基础数据和决策参考。【方法】选取我国典型淡水养殖池塘的水体、底泥及2种水产品（大口黑鲈Micropterus salmoides、日本沼虾Macrobrachium nipponense）,对其进行MPs的定性与定量分析,在此基础上用生态风险指数法和内梅罗污染指数评价法科学评估微塑料的污染风险。同时,以前期试验结果中微塑料（聚苯乙烯,PS）为代表,以模式生物斑马鱼（Danio rerio）为受试对象,设置不同质量浓度梯度（0,200,300,450,675,1 012.5 mg/L）微塑料溶液进行急性毒性试验,在试验基础上配制不同微塑料溶液,培养0,24,48,96 h,测定斑马鱼抗氧化酶（CAT、SOD、GST、GPx）活性、还原型谷胱甘肽（GSH）活性及脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量,并分析免疫相关基因TNF-α和IL-1β的转录水平。【结果】微塑料在大口黑鲈和日本沼虾淡水养殖池塘的表层水、底泥沉积物及养殖生物中均有污染,形状多为纤维状和碎片状,其成分主要为聚苯乙烯（PS）、聚乙烯（PE）。微塑料在所调查的淡水养殖池塘中污染较轻且风险等级较低;微塑料PS对斑马鱼96 h的半致死质量浓度LC50为407.93 mg/L,具有中等毒性。随着微塑料PS质量浓度增加和暴露时间延长,斑马鱼抗氧化酶（CAT、SOD、GST）活性和GSH活性整体均呈下降趋势,而GPx活性和MDA含量则呈上升趋势,TNF-α和IL-1β基因表达量异常上升。【结论】微塑料在典型淡水养殖池塘中的表层水、底泥沉积物及养殖生物中均有检出,且主要通过对斑马鱼的抗氧化防御系统和免疫系统产生实质性损害,进而威胁生物生长与安全,应予以重视。 相似文献
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芦笋连作障碍克服方法 总被引：1，自引：0，他引：1
为了实现芦笋产业的可持续发展,选取了几种土壤处理剂,复合农业、物理、生物等措施,开展芦笋连作障碍土壤的综合改良修复技术研究。结果表明,深翻+氰氨化钙+"SSP"微生物有机肥复合农业和物理措施的处理方法效果最为显著,复种芦笋成活率达到100%,植株长势各项指标也显著高于常规对照。深翻+氰氨化钙+木霉菌处理效果次之,赐保康处理效果最差。该研究筛选出了克服芦笋连作障碍的有效方法。 相似文献