间接ELISA检测羊伪狂犬病抗体的研究   总被引：3，自引：1，他引：2  

崔保安  杨明凡  李瑞芳  张素梅  王学斌  王莉 《畜牧与兽医》2003,35(1):10-12

利用差速离心纯化MDBK细胞增殖伪狂犬病毒 (PRV)为抗原 ,建立间接ELISA检测伪狂犬病抗体方法。选用抗原最佳包被浓度为 1∶80 0(4μg/mL) ,酶标兔抗山羊IgG最佳稀释浓度为 1∶80 0 ,作用时间为 60min,封闭物采用 4 %明胶 ,抗原抗体最佳作用时间为 60min。根据建立的最佳反应条件检测伪狂犬病毒油乳剂灭活苗、氢氧化铝凝胶灭活苗、基因缺失油乳剂灭活苗接种山羊后的抗体消长规律。试验表明间接ELISA检测PRV抗体具有快速、敏感、特异等特点 ,适合于大量样品的检测 ,也便于畜群免疫效果的检测和免疫程序的制定  相似文献   

微量元素硒与动物营养   总被引：4，自引：0，他引：4  

杨明凡  崔保安 《畜牧兽医杂志》2003,22(1):20-21

硒是动物体内必需的营养元素，通过谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）发挥活性必需的组成成分，参与谷胱甘肽的过氧化反应，从而保护细胞膜结构的完整性和维护细胞的正常功能。本文综合论述了元素硒的生物活性和营养功能，并就硒在动物体内的需要量和动物缺乏症及防治进行了详细的论述。  相似文献   

开产蛋鸡传染性喉气管炎的PCR诊断及防治     

郭小参  崔保安  杨明凡  陈红英  管倩  吕晓丽  王东方 《中国畜牧兽医》2007,34(9):100-101

鸡传染性喉气管炎(infectious laryngotrache-itis,ILT)是由鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起的鸡的一种急性接触性呼吸道传染病。病鸡主要表现呼吸困难、咳嗽、喘气、甩头,严重者咳出血样粘液。病理剖检可见喉头及气管黏膜肿胀、弥漫性出血,表面附着带血的渗出物或黄色干酪样假  相似文献   

分子生物学技术在兽医上的应用     

张素梅  杨明凡 《河南畜牧兽医(综合版)》2001,22(11):9-10

随着分子生物学的发展，分子生物学常见实验技术的应用日益广泛，其对畜牧兽医高层次的研究与发展以及临床疾病防治与诊断起着重要的作用。１限制性内切酶及其应用限制性内切酶ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎ-ｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ简称限制酶的发现和应用在基因工程和分子生物学的发展过程中起着举足轻重的作用。它和其它修饰酶是分子生物学家在ＤＮＡ操作过程中所使用的基本工具。由于这些酶的使用，使分子克隆方法不断创新，简化了分子克隆的操作，而且拓宽了它的研究领域。１．１限制性内切酶的发现及分析技术原理Ａｒｂｅｒ等１９６３根据…  相似文献   

鸡传染性喉气管炎病毒gD基因在重组痘病毒中表达及其免疫效力     

杨明凡  崔保安  陈红英  张素梅  魏战勇  李祥瑞 《南京农业大学学报》2009,32(1)

将鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV) 河南长葛株gD基因重组到鸡痘病毒基因组中,获得了能高效表达糖蛋白D的重组鸡痘病毒(rFPV-gD) .将rFPV-gD经皮下刺种途径接种30日龄的固始鸡,用ILTV商品弱毒疫苗经滴鼻、点眼途径免疫试验鸡,同时设非免疫对照鸡群.分别于免疫后7、14、21、28、35和42 d采血分离血清,用微量血清中和试验测定ILTV抗体效价,并于免疫后42 d用ILTV强毒攻击所有试验鸡只.血清中和抗体检测结果表明:疫苗对照组与重组病毒组差异不显著(P>0.05) ,而重绀病毒组和疫苗对照组与空白对照组相比筹异均显著(P<0.05) .免疫42 d攻毒后鸡的发病情况表明,重组病毒组和疫苗对照组对ILTV强毒攻击的保护率均为96.67%,而空白对照组为6.67%,说明该重组病毒作为弱毒疫苗能够抵抗ILTV强毒的攻击,对免疫鸡群有较好的保护作用.  相似文献   

鸡传染性喉气管炎病毒河南株gB基因真核表达载体的构建及表达     

管倩  崔保安  陈红英  杨明凡  王振亚  郭小参  吕小丽  王东方 《江西农业大学学报》2009,31(5)

根据已发表的传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因序列,设计并合成1对引物,以河南分离株(ILTV-HN)接种10日龄鸡胚,从含痘斑的绒毛尿囊膜中提取基因组DNA扩增gB基因,将扩增片段克隆入pGEM-T Easy载体后,经蓝白斑筛选,菌液PCR和酶切鉴定为阳性的重组菌进行测序,结果表明克隆到ILTV-HN株gB基因,全长为2 629 bp,包含一个完整的开放阅读框.然后将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核表达载体pcDNA3.1-gB,转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过RT-PCR检测,转染细胞中含gB基因的mRNA,间接免疫荧光检测,结果表明gB基因在CEF细胞中进行了瞬时表达.  相似文献   

传染性法氏囊病毒HN株的分离鉴定及应用免疫荧光检测IBDV     

杨明凡  王岩  张素梅  郭小参  陈红英 《河南农业科学》2008,(1):99-101

河南郑州地区某养鸡场的三黄肉鸡出现精神沉郁,拉水样白色粪便,剖检可见法氏囊水肿、出血;肾脏出血肿大,有尿酸盐沉淀,呈花斑状;腿肌、胸肌有出血斑点;腺胃与肌胃交界处出血。经病毒分离、鸡胚接种、琼脂扩散试验和细胞接种试验,最后确诊为传染性法氏囊病。同时,采集病料,制备冰冻切片,建立一种检测病料中的IBDV免疫荧光检测方法。  相似文献   

固始鸭白细胞介素2基因的克隆及分子进化分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈红英  李新生  杨明凡  王学斌  吕晓丽  崔保安  霍军峰 《河南农业大学学报》2008,42(1):82-85

根据已发表的鸭白细胞介素（IL-2）cDNA序列设计并合成1对引物,直接从成年固始鸭脾淋巴细胞中提取的总RNA,应用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）扩增鸭儿-2cDNA,将扩增片段克隆入pGEM—TEasy载体,并对其进行测序、结果表明,扩增片段长度为446bp,与预期大小一致,为鸭,IL-2基因的编码区全长,共编码140个氨基酸的多肽、把该基因编码的鸭IL-2氨基酸序列与已公布的禽及哺乳动物IL-2氨基酸序列进行比较,其同源性分别在54．3％～100％和15．0％～17．9％之间．分子系统进化树分析表明,固始鸭,IL-2与哺乳动物,IL-2有共同的祖先,亲源关系较近,但在免疫系统选择性压力下,形成独特的种族特异性．  相似文献   

生产性能的影响     

王学兵  崔保安  魏战勇  杨明凡 《中国农学通报》2008,24(9)

 试验将60头28日龄断奶的健康、体重相近（7.63μ0.52kg）的长大二元杂交商品仔猪按体重、性别,随机分为5组,即对照组和4个试验组,对照组即原用进口鱼粉配方组,第1、2、3、4试验组为分别用山东济宁圣齐生物生物工程生产的活性酵母蛋白粉替代25%、50%、75%和100%的进口鱼粉组,共试验4w。研究添加不同水平酵母蛋白粉对断奶仔猪生产性能的影响。结果表明：断奶仔猪日粮中添加酵母蛋白替代进口鱼粉后均没有显著改变原添加进口鱼粉仔猪断奶后0~4w的平均日采食量和平均日增重,饲喂效果较好。综合各项试验指标,酵母蛋白粉以50%~75%的比例替代进口鱼粉,添加到断奶仔猪日粮中对仔猪生产性能有明显的促进作用,且饲料成本下降。  相似文献   

应用随机扩增多态性DNA技术对产气荚腊梭菌的基因分型     

杨明凡  田永军 《中国兽医科技》2000,30(5):21-22

采用随机扩增多态性ＤＮＡ（ｒａｎｄｏｍｌｙ ａｍｐｌｉｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ,ＲＡＰＤ）技术对产气英膜梭菌进行ＰＣＲ扩菌。结果,产气英膜梭菌Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ４个型均可扩增出约４３０ｂｐ的条带,Ｂ、Ｃ型还扩增出约２１０ｂｐ的条带,Ｂ、Ｄ型还扩增出约１２１０ｂｐ的条带,Ａ型还扩增出约２４０ｂｐ和６９０ｂｐ的条带,各型之间的条带差别明显。  相似文献