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为建立一种犬癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)免疫梳检测方法，将包被鼠抗CEA捕获抗体固定于硝酸纤维膜(nitrocellulose filter membrane, NC膜)上，筛选出合适的包被液、包被温度、封闭液、封闭条件、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)标记抗体反应条件等，制备免疫梳。对建立的犬癌胚抗原免疫梳检测方法进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验，并采用化学发光法和所建立的免疫梳检测方法对10份患恶性乳腺肿瘤病犬只的血清样品进行检测。优化条件：CEA捕获抗体质量浓度为100μg/mL,HRP标记抗体按1∶400(体积比)稀释，包被液为碳酸盐缓冲液(pH 9.6),包被温度为37℃,封闭液为3%BSA-PBS[含3%(质量分数)牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液(pH 7.4)],封闭条件为4℃过夜，HRP标记抗体反应条件为37℃孵育1 h。建立的犬癌胚抗原免疫梳检测方法中CEA最低检出限为5 ng/mL,同时肿瘤标志物角蛋白8抗原、甲胎蛋白和前列腺抗原的检测结果均为阴性，重复性和稳定性良好；临床血清样品的... 相似文献
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为探索冻干剂、咀嚼剂和喷剂三种剂型的rAd5-ΔE1/E3-CGS狂犬病口服疫苗在运输、保存、反复冻融及不同温度下投放时疫苗效价的消减规律，将三种剂型的疫苗经过2～8℃运输48 h,重新入库的疫苗分别-20℃保存1年和反复冻融5次，再将冻融后疫苗分别于2～8℃保存4个月、15℃放置1个月、25℃放置1周和37℃放置3 d,于不同时间点取样检测疫苗效价(lgTCID50/头份)。结果显示，三种口服疫苗经过2～8℃运输48 h后，效价分别下降至6.25、5.75和6.25,再经过-20℃保存1年和反复冻融5次后效价分别下降至5.67、5.33、5.33和5.33、5.00、5.67。在2～8℃保存4个月后，三种剂型口服疫苗效价均能达到5.00以上；在15℃放置1个月、25℃放置1周以及在37℃放置3 d后，疫苗效价最低分别为3.75、2.50和1.00。研究表明，三种剂型口服疫苗在冷链运输、冷冻保存、反复冻融和低温环境释放条件下具有良好的稳定性，常温环境对咀嚼剂的稳定性影响较小，高温环境会严重降低口服疫苗效价，建议在气温不高于15℃条件下进行rAd5-ΔE1/E3-C... 相似文献