E.tenella端粒酶逆转录酶基因3'端序列的克隆及分析     

杨桂连  李建华  张西臣  赵权  宫鹏涛  蔡亚南  任保彦  张国才 《中国兽医杂志》2009,45(12)

为了获得E.tenella TERT全长cDNA序列,本试验根据已报道的其他,原虫TERT氨基酸序列,利用CODEHOP方法设计简并引物,同时利用Trizol法提取总RNA并反转录为cDNA,然后采用3'-RACE方法克隆获得E.tenella TERT 3'cDNA序列,并采用生物信息学技术进行序列分析.结果表明,该序列具有TERT蛋白家族特征性基序,证明成功克隆了E.tenella TERT 3'cDNA序列.  相似文献   

寄生虫端粒及端粒酶的研究进展     

杨桂连  李建华  张西臣 《中国预防兽医学报》2009,31(5)

端粒(Telomere)是真核生物染色体末端由重复DNA序列和蛋白质结合形成的复合结构,能够稳定和维持染色体的完整性,在DNA的复制过程中防止染色体末端融合及有丝分裂时染色体分离方面起着重要作用.  相似文献   

乳酸菌对肠粘膜免疫调节的影响     

赵洪梅  杨金生  杨文涛  杨桂连  王春凤 《吉林农业》2011,(5):328-329

乳酸菌是消化道内的主要微生物菌群,乳酸菌作为一种活的有机体能够在肠道内定植,维持肠道菌群平衡,能够刺激肠粘膜免疫组织产生免疫球蛋白、细胞因子,促进免疫细胞的分化,对肠粘膜免疫具有重要的影响。在此基础上简要介绍肠粘膜免疫系统以及乳酸菌对肠粘膜免疫调节的影响。  相似文献   

口服猪A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌对BALB/c小鼠的免疫保护作用     

叶丽萍  郝凤奇  王春凤  杨桂连 《中国兽医学报》2010,30(7)

将轮状病毒pW425et-Vp4乳酸菌重组质粒口服免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间眼球采血脱臼处死,收集小鼠血清、脾细胞及肠道内容物,用ELISA方法检测血清IgG水平,用试剂盒检测肠黏膜SIgA水平,以流式细胞仪检测CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群和CD19+B细胞亚群的变化情况,最后进行攻毒试验。结果显示,pW425et-Vp4基因工程乳酸菌口服免疫小鼠血清IgG及肠黏膜SIgA水平较对照组有明显差异,且S/N2.0,CD4+/CD8+比值显著高于对照组,且比值大于2:1;表明猪A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌重组表达质粒可以增强小鼠机体免疫保护能力。  相似文献   

柔嫩艾美耳球虫端粒DNA重复序列的South-ern印迹杂交分析     

杨桂连  李建华  张西臣  赵权  宫鹏涛  蔡亚南 《吉林农业大学学报》2010,32(2):205-208

为进一步确定柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)端粒DNA的重复序列,为下一步端粒酶活性检测奠定基础,根据已克隆发表的E.tenella端粒DNA重复序列信息,设计了由4个端粒重复序列串联的寡聚核苷酸探针(TTTAGGG)4,并以生物素地高辛标记。将该探针与经BAL31-EcoRⅠ酶切后的E.tenella基因组DNA进行Southern印迹杂交分析。结果显示:E.tenella基因组DNA与探针杂交获得了清晰的杂交条带,随BAL31酶切时间的延长,杂交信号逐渐减弱,进一步证明了E.tenella端粒DNA重复序列为5-′TTTAGGG-3′,且此重复序列在E.tenella染色体的末端。  相似文献   

牛乳中乳酸乳球菌nisRK基因的克隆与序列分析     

郝凤奇  王春凤  杨桂连  叶丽萍  杨中娜 《吉林农业大学学报》2010,32(1):108-112

以一株分离自牛乳中乳酸乳球菌染色体DNA为模板,采用PCR技术扩增出乳链菌肽生物合成的双组分调控元件(nisRK基因)。试剂盒回收纯化nisRK基因后将其克隆入以氨苄青霉素为选择压力的pGEM-T克隆载体中,再转化E.coliDH5α感受态细胞,筛选阳性克隆,提取重组体,进行酶切鉴定和PCR鉴定,并对nisRK基因进行序列测定,与已知序列进行同源性比较。结果表明成功地克隆出nisRK基因,全长为2 035 bp,与国外报道的nisRK基因同源性高达99.9%。  相似文献   

猪囊尾蚴头节单克隆抗体的制备及特性鉴定     

蔡亚南  张晓雷  王泽  徐鹏  杨桂连  刘春杰  姜晶  赵权 《中国预防兽医学报》2010,32(6)

为制备抗猪囊尾蚴头节单克隆抗体(MAb),本研究采用纯化的猪囊尾蚴头节(Cysticercus Cellulosae Scolex)作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术,获得3株分泌抗猪囊尾蚴头节MAb的杂交瘤细胞系(分别命名为2C6、3A5和4G10)。对这3株MAb进行生物学特性鉴定,其染色体平均记数为92±10对,经间接ELISA检测腹水效价分别为1:12800、1:6400和1:25600。亚类鉴定证实,这3株亚类均为IgG1型。Westernblot检测表明,3株纯化的MAb均可与猪囊尾蚴头节抗原发生特异反应;而与猪囊尾蚴囊壁和囊液抗原均不发生反应。本研究获得的3株MAb为猪囊尾蚴病免疫学诊断研究奠定技术基础。  相似文献   

绿色荧光蛋白标记穿梭表达载体构建及重组乳酸菌制备   总被引：1，自引：1，他引：0  

陈晓雷  杨桂连  王春凤 《吉林农业大学学报》2009,31(3)

以红霉素耐药性基因/thy A基因双筛选压力大肠杆菌-乳酸杆菌穿梭表达载体pW425et为基本骨架,将绿色荧光蛋白(GFP)基因插入该载体,构建GFP标记的穿梭表达载体pW425et-GFP.通过连续的荧光强度检测,验证gfp基因能否在重组菌中得到稳定表达.重组表达质粒pW425et-GFP酶切和PCR鉴定结果与预期片段大小相符,SDS-PAGE显示27 kD的绿色荧光蛋白获得表达,在蓝光的激发下,可见明显的绿色荧光,且荧光稳定性强,连续传代30次仍可见荧光.结果表明已成功构建了GFP标记穿梭表达载体pW425et-GFP,为乳酸菌作为益生生理菌载体进行体内定植规律研究和食品级、疫苗级乳酸菌产品的开发奠定了基础.  相似文献   

不同地理株柔嫩艾美耳球虫卵囊排出量的比较研究     

姜晶  姜鑫  杨桂连  蔡亚南  秦守涛  赵权 《吉林农业大学学报》2007,29(5):572-575

试验采用来自吉林省怀德县、伊通县头道乡和伊通县大虎山等地的柔嫩艾美耳球虫的孢子化卵囊,以每只鸡5000,1×104,1×105个的剂量,口服接种7日龄和14日龄无球虫AA肉鸡,对感染后6~13 d每日24 h内所排出的卵囊计数,并对其进行统计分析。结果表明:7日龄雏鸡接种剂量为5000,1×104个时伊通大虎山株的排卵囊量最多,接种剂量为1×105个时怀德株的排卵囊量最多。14日龄雏鸡接种剂量为5000,1×104个时伊通大虎山株的排卵囊量最多,接种剂量为1×105个时怀德株的排卵囊量最多。结果还显示无论接种剂量相同与否,各虫株均从接种后第6 d开始排卵囊,第7 d达到高峰,第8,9 d开始减少,至第13 d趋于0。  相似文献   

益生菌在维护宠物健康及疾病防治中的应用及作用研究进展     

李虹晔  王春凤  杨桂连 《吉林农业大学学报》2023,(5):513-522

随着养宠家庭数量增多，人们对宠物健康越来越关注。肠道微生物群在动物健康中起着至关重要的作用，不仅影响宿主营养物质的代谢和吸收，还能调节宿主健康。目前已有研究证明，益生菌在宠物犬、猫生长发育过程中发挥诸多有益功能，如促进生长发育、增强营养代谢及免疫功能，保护犬、猫免受病原微生物感染等。宠物益生菌的应用、宠物肠道微生物群特征、益生菌作用机制进行探讨，以期为益生菌在宠物疾病防治中应用提供理论依据。  相似文献