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禽流感病毒HA基因的分子克隆和测序 总被引：14，自引：0，他引：14
血凝素（HA）是禽流感病毒诱导机体产生保护性体液免疫反应的主要靶抗原。本研究的目的是克隆HA基因，为以后的表达及基因工程疫苗的研制奠定基础。收获接毒鸡胚的尿囊液，超速离心沉淀病毒，采用异硫氰酸胍法提取病毒RNA，利用反转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）技术扩增出禽流感病毒（H9N2亚型）血凝素的cDNA。PCR产物加A尾后，用玻璃奶试剂盒回收纯化目的片段，通过T－A连接将加尾PCR产物连接到线状克隆载体pGEM-T easy vector，转化DH5α感受态细胞，在含氨苄青霉素的LB平板上筛选阳性克隆，提取质粒，经酶切鉴定，对目的片段进行测序，结果获得了HA基因全长，约1．7kb，与已知序列进行同源性比较，同源性最高的可达97％，所克隆的基因为禽流感HA基因工程疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
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为了解玉米甘薯间套作模式下不同株高玉米对种间甘薯农艺性状的影响,采用双因素(不同株高玉米(A)和不同类型甘薯(B))三水平(玉米品种和甘薯类型均设3个水平,分别为郑单958(Y1)、先玉335(Y2)、豫单9953(Y3);商薯19(G1)、商薯K8(G2)、商薯X6(G3))随机区组设计,通过不同玉米甘薯间套作模式,研究了不同株高玉米对甘薯地上部蔓长、茎粗、分枝数、叶面积指数(LAI)等性状的影响。结果表明,玉米生长前期,随着玉米植株不断增高,对甘薯各种农艺性状的影响也在不断变化;而在甘薯幼苗栽培70 d后,玉米株高保持稳定,对甘薯农艺性状的影响也保持不变。在不同玉米、甘薯品种和不同间套作模式下,甘薯幼苗栽培70 d时,蔓长表现为Y2G1组合甘薯最长,Y3G2组合蔓长最短;茎粗表现为Y1G2组合甘薯最大,Y2G3组合最小;分枝数表现为Y2G3组合甘薯最多,Y3G2组合最少;LAI表现为Y3G1组合甘薯最高,Y1G3组合最低。综合甘薯各种农艺性状表现可知,豫单9953与商薯19的组合效果最佳。研究结果可为玉米甘薯合理间套作的品种选择提供科学依据。 相似文献
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本试验根据已发表的新城疫病毒(NDV)的F基因序列设计特异性引物,对山东地区两株NDV流行株的F基因进行了克隆与序列分析,分别扩增到了A株和B株F蛋白编码区全基因,ORF全长均为1662bp。应用分子生物学软件对A株和B株的核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行了分析。两毒株核苷酸序列同源率为87%,都编码553个氨基酸,氨基酸同源率为91%。与部分已发表的毒株相比:A株与～株同源率最高,为98%,B株与JS鹅株同源率最高,为98%。抗原位点、糖基化位点的数量和位置高度保守,半胱氨酸残基数量不同,A株13个,B株12个。分离株都具有3个强疏水区。A株、B株裂解区氨基酸序列符合强毒株特点,二者均为强毒株。从基因分型情况看,A株属于基因Ⅸ,B株属于基因Ⅶ。A株与F48E9株遗传距离最近,B株与JS鹅株遗传距离最近。 相似文献
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随着人们对居住环境的日益关注和城市建设的快速发展,树木移植已成为绿化建设的重要组成部分。但现实中经常性出现树木移植后长势差、成活难等不良现象,直接影响城市绿化质量,而且造成资源的巨大浪费。依据实践经验,就树木移植保证成活的基本条件、移植后是否能成活的简易诊断和日常养护等内容与同行进行探讨。 相似文献
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城市绿化在改善生态环境、提高环境质量方面有着不可替代的作用,但随着时间的推移其不良症状日益显现,改造成为日常管理中的必然措施。结合多年的现场管理经验,分析目前绿化改造工作的重点及相应方案。 相似文献
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