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101.
欧洲鳗免疫球蛋白单克隆抗体的制备与特性   总被引:19,自引:2,他引:19  
林天龙 《水产学报》2001,25(6):532-537
应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了13个分泌抗欧洲鳗免疫球蛋白的单克隆抗体细胞株,并对这些单克隆抗体的特性进行了分析。经抗体级份和亚级份测定,其中IgM有3株,IgG1有5株,IgG2a有3株,IgG2b有2株;所有的单克隆抗体与欧鳗免疫球蛋白均有ELISA反应特性,抗体滴度10^4-10^7,有七株单抗具有WESTERN BLOT反应特性,能在变性条件下识别欧鳗免疫球蛋白的重链。进一步实验证实这些单抗能特异地识别欧洲鳗、日本鳗的免疫球蛋白,而与鲫、淡水白鲳、罗非鱼、胡子鲶、美洲斑点叉尾Hui血清免疫球蛋白以及水产动物常见病原菌如气单胞菌、爱德华氏菌、弧菌、柱状屈桡杆菌、沙门氏菌及大肠杆菌等无任何交叉反应。单克隆抗体9D7,对纯化的欧洲鳗免疫球蛋白的检测灵敏度为16ng。实验结果证明这些单抗具有高度特异、高度灵敏等特点,可用于鳗鲡免疫球蛋白的结构分析、免疫应答水平监测和病原诊断,具有广阔的应用前景。  相似文献   
102.
将鳗鲡疱疹病毒(AngHV)福建株(AngHV-FJ)ORF51基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-2中,构建表达质粒pGEX-4T-2-ORF51,将其转化至表达菌株E.coli BL21(DE3)中,IPTG诱导后,收集表达菌体,进行SDS-PAGE分析和免疫印迹试验验证,结果表明,获得了高效表达的AngHV-FJ ORF51融合蛋白.经割胶回收纯化,获得高纯度的融合表达蛋白.用纯化的表达蛋白免疫新西兰大白兔,获得了高效价的兔抗ORF51多克隆抗体.这为进一步研究ORF51蛋白的结构和功能及开展AngHV病的防治研究提供了重要的研究基础.  相似文献   
103.
用纯化的猪伪狂犬病病毒闽A株(PRV—FA)免疫Balb/c鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞进行细胞融合,经间接ELISA筛选,获得11株能稳定分泌伪狂犬病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中6株仅与强毒FA反应,而不与弱毒FB、Bartha及gE缺失疫苗株发生反应。特异性鉴定结果表明,各株单抗均不与猪瘟病毒、猪流感病毒、猪呼吸繁殖障碍综合症病毒、猪细小病毒等发生交叉反应。  相似文献   
104.
自1873年在红萍叶腔中发现有鱼腥藻共生以来,人们对各种红萍叶腔中的鱼腥藻是否相同有争议,许多人在血清学方面做了大量研究工作。由于用常规方法制备的抗红萍鱼腥藻血清为多克隆抗体,它与不同种红萍鱼腥藻之间总是出现不同程度的交叉反应,结果不一致。 为此,我们用蔗糖密度梯度离心提纯的卡洲  相似文献   
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