水泡性口炎病毒血清型特异LUX实时荧光RT-PCR检测方法的建立   总被引：5，自引：0，他引：5  

陈茹  刘中勇  曾碧健  曹永长  陈俊伟  赵吟  林志雄  毕英佐 《畜牧兽医学报》2008,39(4):522-528

采用LUX荧光核酸扩增技术原理,以水泡性口炎病毒（VSV）NJ、IND型NS基因为模板分别设计并合成单标记LUX荧光引物,建立血清型特异的VSV荧光RT—PCR检测方法。试验表明,两种型特异的LUX荧光RT-PCR能分别特异地鉴定VSV血清型,对口蹄疫、猪水泡病等病毒以及对照细胞、健康动物组织RNA样品的检测结果均为阴性。对比检测试验表明,LUX荧光RT—PCR的检测敏感性比常规RT-PCR提高达10倍以上,对VSV细胞增殖病毒液的检测灵敏度可达1 TCID50。对人工感染豚鼠样品以及临床样品的检测试验证实,该LUX荧光RT—PCR可有效检测到人工感染动物组织以及进口牛临床样品中的水泡性口炎病毒,并能鉴定感染病毒血清型。所报道的检测方法,包括样品核酸提取、LUX荧光RT—PCR以及熔解曲线分析,可在3h内完成。  相似文献   

应用荧光RT-PCR技术检测高致病性猪蓝耳病病毒     

罗长保  肖性龙  鱼海琼  田纯见  林志雄  余以刚  吴晖 《中国兽医杂志》2008,44(1):85-86

猪繁殖与呼吸综合症（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种猪病毒性传染病。该病主要引起妊娠母猪早产、晚期流产、死胎、弱胎以及木乃伊胎。仔猪和育肥猪呼吸困难,呈间质性肺炎。公猪性功能下降,精液质量和精子活力受到影响。该病是进出口猪必须检疫的一种重要的猪传染病。  相似文献   

猕猴属实验动物的动物福利要求     

邱索平  耿聪  李丹丹  陈永红  林志雄 《中国动物检疫》2016,33(7):62-64

为了确保猕猴属实验动物的顺利出口,满足国际上对实验用猴越来越高的动物福利要求,本文从制度建设,人员要求,以及饲养、隔离、运输环节的动物福利要求进行了分析,起草了一套完整的动物福利规范,供国内养殖企业和检验检疫部门参考。  相似文献   

俄罗斯禽流感疫情及防控简介     

马保华  鱼海琼  叶文彬  田纯见  林志雄 《中国动物检疫》2016,33(10):75-78

俄罗斯曾多次暴发高致病性禽流感疫情(HPAI),造成3千多万只禽类死亡或被销毁,给该国养禽业造成了重大损失。俄罗斯禽流感疫情主要以H5亚型的野禽疫情为主,呈散发状态。针对国内散放的禽流感疫情,俄罗斯并没有实施大范围的免疫措施,仅在局部高风险地区实施免疫预防,重点采取定期监测、建立应急和保障机制等控制措施。这些防控经验提示我国在禽流感防控方面,应进一步健全兽医法规体系,加强多方合作,强化候鸟监测。  相似文献   

病毒性出血性败血症病毒RNA标准物质的研制     

刘志玲  陈茹  朱道中  吴晓薇  林志雄  田纯见  罗琼  段燕喻 《中国兽医杂志》2018,(3)

利用基因克隆和体外转录技术制备病毒性出血性败血症病毒(VHSV)核酸检测标准物质。设计VHSV N基因的克隆引物,RT-PCR获得相应片段,连接至pGEM-T载体,测序后采用体外转录方法制备RNA纯品。初步定量稀释后,混合分装作为核酸标准物质候选物。采用核酸浓度测定与拷贝数换算的方法对转录的RNA片段进行定值。通过绘制荧光定量标准扩增曲线计算标准物质含量(拷贝数),并根据委托单位的定值结果进行不确定度的估算。均一性结果显示瓶间差异小于5%,稳定性试验表明室温20℃~25℃(相对湿度20%~25%)7 d,2℃~8℃保存1个月及-20℃保存6个月的含量均无明显变化。核酸标准物质定值为(6.625±0.149)×10~8copies/μL,可用作VHSV核酸检测的标准质控品。  相似文献   

基于PIC单片机智能联网型电动机保护     

郑金辉  林志雄 《福建农林大学学报(自然科学版)》2009,38(3)

基于PIC单片机智能联网型电动机保护器利用PIC单片机的软硬件资源,具有自动检测、自动保护、远程控制等优点,在工业控制、小型电动机领域具有广泛应用前景.  相似文献   

新型保果剂果得保对糯米糍荔枝的保果效应     

袁沛元  潘建平  曾杨  林志雄  匡石滋 《广东农业科学》2006,(12):40-41

2002~2003年对糯米糍荔枝开展果得保、赤霉素保果试验,结果显示:在糯米糍荔枝雌花谢花后10天和40天各喷施果得保1次,能显著提高座果率和穗重,从而增加产量,且不影响果实大小,与喷施清水相比增产148.19%~183.08%;雌花谢花后10天喷施果得保1次对提高座果率有一定作用,与喷施清水相比增产85.54%~98.17%。  相似文献   

猪生殖和呼吸综合征病毒中国分离株B13株ORF5基因在杆状病毒系统中的表达   总被引：2，自引：0，他引：2  

赵耘  罗长宝  林志雄  陈茹  李树根  陈博文  刘尚高 《农业生物技术学报》2000,8(3)

本研究将PRRSV B13株ORF5基因克隆到杆状病毒转移载体质粒pVL1393中,构建了重组转移载体质粒pVL1393-ORF5.用该重组转移载体质粒与线性化苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV-SVI-G)基因组DNA(BaculoGold Linearized Baculovirus DNA)共转染草地夜蛾(Spodoptera frugiperda,sf9)细胞,得到重组病毒AcMNPV-OCC-- ORF5 .在感染了重组病毒的sf9细胞中成功地检测到分子量为25kD的ORF5基因表达产物,其能被猪抗PRRSV B13株多克隆血清特异识别.表明sf9细胞表达了所期望的产物,进而也说明基因片段的正确性.猪抗PRRSV VR-2332株多克隆血清对ORF5基因的表达产物无反应,而猪抗LV株多克隆血清则能特异识别,说明PRRSV中国分离株B13株在抗原性上更接近欧洲亚群分离株LV株的抗原性,进一步证实了PRRSV中国分离株B13株属于欧洲亚群.ORF5基因表达产物与天然蛋白分子量十分接近,说明杆状病毒表达系统能较适当的进行合成蛋白的加工和修饰.本研究的结果为PRRS基因工程疫苗的研究奠定了基础.  相似文献   

寄接梨栽培技术在广东低海拔地区的应用初报     

陆育生  曾杨  潘建平  邱继水  梁容森  林志雄 《中国果业信息》2015,44(2)

以广东省中山市坦洲镇种植的砂梨品种“棠梨”和“早脆梨”为寄接母树,于2012年12月及2013年1月两次从广东省北部山区阳山县采集已满足低温需冷量、饱满的“早脆梨”花芽进行寄接栽培。结果表明,不同砧木及不同时间嫁接处理对寄接花芽的成活率、成花率、坐果率以及果实的内外品质有一定的影响;与花芽采集母树正常着生的梨果相比,采用寄接技术能够生产出与其品质相当的梨果,且果实采收期可提前30天左右。以上试验结果为寄接梨栽培技术在广东低海拔地区的应用推广提供了依据。  相似文献   

林分改造对马占相思林水土和养分保持效能的影响     

林志雄 《现代园艺》2018,(16)

针对林分改造实施以后,分析不同改造方法马占相思林凋落物地表内径流量、氮磷及泥沙流失情况的对比差异。结果显示:试验A组及试验B组的凋落物现存量及最大持水量均要明显高于对照组,且试验A组同时高于试验B组。而在林地的地表内径流量、磷氮及泥沙流失量对比方面,改造后的试验A组与B组均明显高于对照组,且不同改造模式在水分及养分保持效果方面无典型差异。  相似文献