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为了建立高灵敏度定量检测转基因棉花(Gossypium sp.)中新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)双抗体夹心酶联免疫吸附方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),本研究以体外条件下制备NPTⅡ蛋白质为免疫原,制备兔(Lepus)抗NPTⅡ多克隆抗体为捕获抗体,小鼠(Mus musculus)抗NPTⅡ单克隆抗体为检测抗体,建立了双抗体夹心ELISA方法,以系列含量的NPTⅡ蛋白质作为标准品,建立标准曲线,对该方法各项指标进行验证,并对样品中所含NPTⅡ进行定量检测。结果表明,该双夹心ELISA对NPTⅡ检测范围为3.370~108.125 ng∕mL,最低检测限为1.97 ng/mL;准确性实验回收率为96.11%~104.69%;精密性变异系数为6.58%~7.33%;与非转基因棉花内源蛋白质及其他种类转基因蛋白质无交叉反应;应用此方法对苗期转基因棉植株各部位NPTⅡ表达量进行检测,发现有明显差异。该方法特异性强,灵敏度高,准确性、重复性和稳定性好,适用于检测转基因棉花中NPTⅡ含量,能够为今后转基因作物检测方法的建立及生物安全性评价等方面提供参考,具有良好应用价值和前景。 相似文献
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新型猪源性H1N1流感病毒能引起人和猪的呼吸道传染性疾病,自2009年4月起在全球范围内暴发,引起广泛的关注和研究,本试验拟对其分离株的气源性传播特点进行研究。2011年1月,华东某地区出现流感疫情,本研究从病死猪的鼻腔棉拭子和肺脏中分离到1株新型猪源性H1N1流感病毒A/swine/Shandong/07/2011;用荧光定量PCR方法检测发病猪场舍内、外的空气样品中病毒含量;建立气溶胶传染模型来分析该株病毒在实验条件下气源性传播的特点。结果显示:猪舍内空气样品的阳性率为26.10%,病毒含量在3.14~5.72log10copies.m-3空气之间;舍外下风向10m处空气样品的阳性率为40.70%,病毒含量在2.24~3.77log10copies.m-3空气之间;在传染模型中,A/swine/Shandong/07/2011能够造成气溶胶感染组试验猪的感染,但感染率比直接接触组低。研究表明,A/swine/Shandong/07/2011株具有形成病毒气溶胶的能力,在实验条件下能够引起气源性感染。 相似文献
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一些细菌如产气荚膜梭状芽孢杆菌的分离鉴定、增菌、菌种保存或制取毒素时都需要大量的肉汤培养基,而市售培养基昂贵。为节省开支,自行试制肉汤培养基,并与商品肉汤培养基进行了比较,结果表明,增菌效果良好。材料与方法采用正常新鲜的牛心脏肌肉,除去脂肪,分割成小块,然后用绞肉机绞碎,在80℃的烤箱中烘干15h,直到水分全部驱除,热量散发后,保存在密闭玻璃瓶内。为比较增菌效果,将标准肉汤培养基(BBL)、自制牛心肉汤培养基和狗食物罐头分别称重,加入生理盐水或双蒸馏水。具体配制和实验结果见表1。取产气荚膜梭状… 相似文献
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对五个鸭舍环境中气栽内毒素浓度与气载需氧革兰氏阴性菌浓度进行了测定,并对二者之间的数量关系进行了统计分析,同时对需氧革兰氏阴性菌的成分进行了研究。在测量的鸭舍中革兰氏阴性菌菌群占优势的是肠杆菌,其中大肠杆菌最为常见。气载内毒素与气载需氧革兰氏阴性活菌含量和气载需氧活菌总数在数值上存在弱的正相关,此结果表明不能通过测定气载需氧革兰氏阴性细菌或需氧细菌总数来估计气载内毒素的含量。舍内气载内毒素的含量介于0.19-20.081063EU/m^3之间;气载需氧革兰氏阴性活茼的含量介于1.69~90.3710^3CFU/m^3之间;气载需氧活菌含量介于1.01~55.7210^4CFU/m^3之间。 相似文献
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魏氏梭菌是人类、畜禽和野生动物肠炎的病原体之一。由它引发的坏死性肠炎可导致家禽肠管出现坏死性病变乃至死亡。它还同家禽的其它疾病 ,如气肿疽、肌胃糜烂和坏疽性皮炎等有关。已发现患有坏死性肠炎的鸡肠道内有大量魏氏梭菌。使鸡群容易发生坏死性肠炎的因素包括应激、饲料的改变及无临床症状的球虫病等。在饲料中加入大麦、小麦或黑麦能增加肠道内魏氏梭菌的数量 ,导致鸡群发生坏死性肠炎 ,使鸡群死亡率增加。已有报道 ,饲料中添加黑麦能增加鸡粪便中魏氏梭菌的数量。同饲喂不含麦芽饲料的鸡群相比 ,这些鸡群魏氏梭菌出现的频率更高 ,… 相似文献
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畜舍气溶胶颗粒直径的空气动力学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用6级ANDERSEN-微生物空气样品收集器对一个犊牛舍内外环境空气进行了收集、测量、根据生物气溶胶颗粒在收集器不同级层上的分布,得知舍内外50% ̄60%的需氧菌、厌氧菌气溶胶颗粒的空气动力学直径大于5μm如此大小的颗粒可到达气管和有支气管:而有7.2% ̄15.4%的气溶胶颗粒空气动力学直径在0.65 ̄2.1μm之间,它们能进入人,畜肺泡。 相似文献
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1 材料和方法
本研究共使用6903只鸡,其中公、母鸡各占50% 。试验分别在夏季(6~8月)、秋季(10~12月)和冬季(1~3月)三个阶段进行。在各季节,将总数1/3的鸡分为四组,在一无窗的鸡舍中,以不同饲养密度饲喂9周。鸡舍分4栏,每栏的面积为39.4m2。其中两组的饲养密度分别为12只/m2(484和483),另两组的饲养密度为15只/m2和18只/m2(607和727)。鸡舍的通风量根据鸡的日龄和季节调整,光照时间为23h/d。 相似文献
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