水貂阿留申病毒实验室检测方法研究进展     

庄金秋  梅建国  王玉茂  姚春阳  莫玲  沈志强 《中国动物检疫》2017,34(10):50-54

水貂阿留申病是一种在世界范围内广泛流行的、严重危害水貂养殖业的病毒性免疫抑制性传染病。本文介绍了水貂阿留申病毒的分离与鉴定、血清学和分子生物学最新实验室检测方法研究进展,以期为防控本病提供参考。  相似文献   

细胞规模化生产过程中的质量控制     

赵蕾  管宇  梅建国  唐娜  李坤林 《山东畜牧兽医》2010,31(6):78-80

<正>细胞大规模培养在生物制药和疫苗生产领域是一项基础工作,是整个生产工艺过程中的中心环节,具有十分重要的地位。细胞培养基质的优劣直接决定终端产品的质量与疗效,因此严格做好细胞培养过程的质量控制显得尤为  相似文献   

兽用生物制品常用的菌种保存方法探讨     

赵蕾  沈志强  梅建国  李坤林 《畜牧兽医科技信息》2010,(7):8-9

<正>菌种的保存是兽用生物制品生产和研发一项重要的基础工作,每一类型的菌种都具有不同的特性,如果连续不断地培养传代,将花费大量的人力、财力,同时在多种理化和生  相似文献   

低血清培养PK-15细胞及其增殖猪圆环病毒2型的研究     

张瑞永  管宇  吴信明  梅建国  姚春阳  沈志强  雷连成 《动物医学进展》2016,(9):16-20

依次采用含60、30、20、10mL/L血清浓度的低血清培养基驯化PK-15细胞,并给驯化好的细胞上接种猪圆环病毒2型(PCV-2),以确定PCV-2在该培养体系下的生长情况。结果用含60、30、20mL/L血清浓度的低血清培养基各进行3代次驯化,PK-15细胞能完全适应且生长状态良好;当血清浓度降至10mL/L时,传代1次细胞无法保持良好状态,细胞出现贴壁较差、生长停滞等现象。各血清浓度培养体系中细胞生长曲线测定结果显示,在细胞培养的0、24、48、72、96h各组细胞密度与常规培养的对照组差别不明显。因此用该低血清培养体系培养PK-15细胞时,血清最低添加量为20mL/L。用该体系培养的PK-15细胞接种PCV-2后,通过荧光抗体染色测定病毒滴度。结果显示,低血清培养的PCV-2病毒滴度为10~(6.5)TCID_(50)/mL,与常规条件培养的PCV-2对照(病毒滴度为10~(6.375 )TCID_(50)/mL)差别不明显,表明该体系可用于PCV-2的增殖。表明研究建立了PK-15细胞低血清培养PCV-2体系,为PCV-2的相关研究奠定了基础。  相似文献   

新型CephodexD微载体在猪瘟病毒大规模增殖中的应用研究     

梅建国  庄金秋  吴信明  刘吉山  苗立中  张颖  谢金文  林初文  王本琢  丁壮 《畜牧与兽医》2018,(8)

旨在应用新型Cephodex D微载体悬浮培养ST细胞增殖猪瘟病毒。通过优化工艺条件初步实现了病毒抗原的大规模高效生产,培养过程采用流加方式保证ST细胞的营养供应。用含6%(v/v)无牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)及其抗体的双阴牛血清MEM生长液培养ST细胞。当达到3.8×109个细胞时,接种入生物反应器中,Cephodex D微载体用量为4 g/L。当反应器内ST细胞生长至48 h,接种猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)液。继续培养4 d后进行首次病毒收获,之后每3 d收获1次,直至第5次收毒结束。整个培养过程持续18d,细胞培养至72 h,密度可达2.8×106cells/m L,生产的CSFV滴度均在100万兔体反应量(RID)/m L以上。较现有的国家标准相比,应用生物反应器和新型Cephodex D微载体悬浮培养技术,不仅病毒滴度提高了1倍,而且整个生产周期缩短了5 d,大大提高了生产效率。因此,本研究采用的新型微载体悬浮培养工艺在CSFV大规模生产中具有重要的应用价值。  相似文献   

猪圆环病毒3型的病原学特征及检测技术研究进展     

庄金秋  梅建国  王艳  莫玲  李峰 《猪业科学》2018,(6):98-100

猪圆环病毒3型(PCV3)为新发猪病毒性传染病,严重威胁着养猪业的持续健康发展,受到了世界各国的高度重视和密切关注。通过对PCV3的病原学特征及国内外最新检测技术研究进展进行综述,以期为兽医科研工作者和广大养殖业主更好地了解和防治本病提供参考。  相似文献   

鸡传染性贫血病毒实验室检测方法研究进展     

庄金秋  梅建国  沈志强 《中国兽医杂志》2012,48(12):50-53

鸡传染性贫血(chicken infectious anemia,CIA)是由鸡传染性贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)引发,自1979年日本学者Yuasa等[1]分离到了鸡传染性贫血病毒以来,英国、德国、澳大利亚、美国等世界许多国家相继证明了该病毒的存在,我国亦于1992年由崔现兰等[2]分离到CAV.CAV在1995年的第6次国际病毒分类委员会维也纳会议报告中被归为圆环病毒科(circoviridae),环状病毒属[3].游离CAV为DNA病毒,球形,直径约23～25 nm,无囊膜,二十面体对称,是目前已知的最小病毒之一.CIA以引起雏鸡再生障碍性贫血和免疫抑制为主要特征,严重影响雏鸡生长发育和免疫反应,是危害养禽业的重要病原之一.  相似文献   

犬瘟热病毒实验室检测方法研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

庄金秋  梅建国  沈志强 《畜牧与兽医》2012,44(8):90-94

概述了犬瘟热病毒实验室检测方法的研究进展。在细胞生物学方面,主要依靠病毒分离培养、动物回归试验、包涵体检查、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等。在分子生物学方面,主要依靠国内外相继建立起核酸杂交技术、RT-PCR法和实时荧光定量PCR法等。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者建立快速、简便、准确、实用的检测方法提供参考。  相似文献   

赤羽病病毒检测方法研究进展     

庄金秋  梅建国  沈志强 《中国草食动物》2012,(2):40-43

赤羽病是目前对我国养牛业和养羊业危害较为严重的疫病,该病在我国广泛存在,一旦暴发将对我国畜牧业造成严重的经济损失。为了防制和消灭该病,必须迅速、准确地作出诊断。经过几十年的努力,赤羽病诊断技术从最早的病毒分离鉴定到血清学试验,再到分子生物学技术,已逐渐向着更敏感、更特异、更方便、更经济的方向发展。文章就赤羽病病毒的实验室检测技术研究进展作一综述。  相似文献   

应用生物反应器生产高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原     

梅建国  王玉茂  王文秀  唐世云  丁壮  沈志强 《动物医学进展》2012,(11):80-84

应用激流式生物反应器培养Marc-145细胞生产高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒,并通过工艺优化,实现了病毒抗原的高效生产。首先将Marc-145细胞用含6 0mL/L牛血清的DMEM培养液复苏放大培养,当细胞量达到3×109时,接种入反应器中。先用细胞生长液培养,当细胞达到最大量时更换生长液为维持液,并接种HP-PRRSV。整个过程采用流加方式,每8h采样测定培养上清中葡萄糖浓度。接种病毒后,每24h测定培养上清HP-PRRSV滴度。6个批次细胞生长至88h,糖耗达到最高水平。连续3个批次种毒后培养至96h,上清中HP-PRRSV滴度达到最高,平均约为每106.4 TCID50/0.1mL。因此,认为应用激流式生物反应器进行细胞培养,通过过程工艺优化,可以实现HP-PRRSV抗原的高滴度生产。  相似文献