双重RT-PCR同时快速检测H5亚型禽流感病毒和新城疫病毒强毒株     

张斌  汤承  张兆敏  马莉  刘小银  李明义  岳华 《中国动物检疫》2009,26(2):24-28

本研究针对AIV H5的血凝素(HA)基因和vNDV的融合蛋白(F)基因设计两对引物,建立了单管同时检测AIVH5和vNDV的双重RT-PCR(dRT-PCR),该方法能在单一反应管内同时检测AIVH5和vNDV,不与其它亚型AIV、弱毒NDV毒株以及其它病原体发生非特异性扩增;对含有AIV H5 HA基因和vNDV F基因重组质粒DNA的最低检测限分别为20.6和406fg,敏感性与单项RT-PCR相同;从样本处理到报告结果仅需5h。对24份临床疑似样本进行检测,AIVH5均为阴性,vNDV阳性18份,PCR产物测序证明为靶基因序列,其具有vNDV F基因的特征性序列,随机选9份vNDV阳性样本接种SPF鸡胚,分离出6株vNDV,病毒分离率为6/9;对100 ELD50的AIV H5N1和100 ELD50的vNDV人工同时感染5日龄SPF鸡的脑、肝脏、肺脏和泄殖腔棉拭子进行dRT-PCR检测,AIV H5的检测率为4/5,3/5,5/5,4/5,vNDV的检测率为3/5,5/5,4/5,3/5,而对H9N2和LaSota毒株实验同时感染样本及阴性对照样本的检测均为阴性。可见本研究建立的dRT-PCR为AIV H5和vNDV诊断、监测、检疫及分子流行病学调查提供了特异性强、操作简单、检测速度快、成本低廉的新方法。  相似文献   

鸭大肠杆菌脑炎诊断及防治报告     

王英  汤承  岳华 《四川畜牧兽医》2009,36(5)

对成都市郊区5个商品肉鸭场的以神经症状为特征的发病鸭群进行了实验室诊断,确诊为大肠杆菌性脑炎.比对24种抗菌药物的药敏试验结果显示,该分离菌对阿米卡星高度敏感,对其它抗菌药物均存在不同程度的耐药性,而且还存在多重耐药现象.选择敏感药物有效地控制了本病在发病鸭场的流行.  相似文献   

草坪过渡带优质草坪建植与管理综合技术研究—Ⅰ坪床配方   总被引：12，自引：0，他引：12  

周嘉友  汤承 《草业科学》1998,15(5):44-48

根据在草坪过渡带地区草坪草对床上要求较为严格和不同类型草坪草对床土要求不同的特点,选用２种冷季型草和２种暖季型草,在８种坪床配方处理下进行了连续３年的坪床配方筛选及对草坪质量的影响试验研究,测定再生速度,建坪速度和持续生存能力。结果表明：冷,暖季型草坪草的坪床配方均以４０％－６０％加沙＋复合化肥＝有机底肥＋泥炭为最好;床土中加入有机底肥和泥炭会明显提高草坪的质量和成坪速度;实际建坪时应根据草种类型  相似文献   

安宁河流域鸭瘟、鸭霍乱综合防制研究──免疫鸭体内巴氏杆菌抗体消长规律   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘亚刚  刘内生  岳华  袁圣蓉  汤承  马蓉  余琼  李建  蒋朝龙  马正忠  廖品丽  刘斌  撒建军  刘晓钢 《中国兽医学报》1998,(1)

以巴氏杆菌Ａ群菌苗免疫建昌鸭后,测定其抗体消长规律,对攻毒前后抗体进行比较,并用血凝抑制试验鉴别其抗体类型。结果表明：（１）注苗后５～６ｄ抗体就可达４个ｌｏｇ２及其以上,２９日龄鸭免疫后４０ｄ内,抗体在４个ｌｏｇ２及其以上,５０ｄ时不足４个ｌｏｇ２;３月龄鸭免疫后１１３ｄ内,抗体在４个ｌｏｇ２及其以上,１４６ｄ时为３．８１个ｌｏｇ２,１６５ｄ为２．４１个ｌｏｇ２;（２）攻毒后１５ｄ,抗体普遍比攻毒前下降约１个滴度,但攻毒后３０ｄ抗体比攻毒前高１～２个滴度。当抗体达４个ｌｏｇ２时,具有完全保护性,能抵抗人工感染和自然感染;（３）巴氏杆菌抗体以ＩｇＭ为主（ＩｇＧ甚微）,注苗后的回忆反应很不明显,这可能是巴氏杆菌苗免疫期较短的重要原因。  相似文献   

转基因植物生长亚单位疫苗的研究进展（下）     

岳华  汤承 《四川畜牧兽医》2006,33(3):34-35

植物生产高附加值的医药制品是分子农业的重要研究领域，植物生产疫苗技术，开辟了疫苗生产的新纪元。与传统的动物反应器相比，植物反应器生产可食疫苗具有生产简便、成本低廉、易贮存和运输、使用方便、无需训练有素的医务人员等诸多优势，目前已经用于乙型和丙型肝炎、麻疹、霍乱等二十多种人和动物疫苗的开发研究，至少已有4种疫苗进入了临床实验阶段。本文就转基因植物生产亚单位疫苗的现状、作用机理、优越性、存在的问题和对策进行综述。  相似文献   

牛凸隆病毒HE基因分子特征分析     

赵龙  汤承  岳华 《畜牧兽医学报》2021,52(7):2065-2072

本研究旨在分析我国牛凸隆病毒（bovine torovirus,BToV）的HE基因分子特征。采用RT-PCR方法检测辽宁、河南、四川的牛腹泻样本中BToV,阳性样本扩增完整HE基因。结果显示：从94份腹泻粪便中检出10份BToV阳性,平均阳性率约为10.64%。从10份阳性样本中扩增得到15条HE基因,其中,9条为基因Ⅱ型,6条为基因Ⅲ型;10份阳性样本中有5份存在Ⅲ型和Ⅱ型毒株的混合感染,1份单独感染Ⅲ型毒株,4份单独感染Ⅱ型毒株。与GenBank中其他Ⅲ型HE基因相比,本研究获得的6条Ⅲ型HE基因具有4个相同的氨基酸突变,其中2个位于凝集素结构域,可能会影响受体结合功能。重组分析表明,BToV Ⅲ型毒株可能是Ⅱ型毒株与Ⅰ型毒株重组而来。本研究首次证实了基因Ⅲ型BToV在我国牛群中存在,报道了Ⅲ型与Ⅱ型毒株混合感染的情况,为国内牛腹泻病的防控和BToV的遗传进化研究提供了参考。  相似文献   

Erwinia chrysanthemi分离株CSCL006 hrpN基因的克隆与高效表达     

汤承  崔亚亚  吴伯骥  李名扬 《农业生物技术学报》2006,14(5):763-768

通过构建Erwiniachrysanthemi分离株CSCL006的DNA文库,克隆出hrpNCSCL006基因,测序结果显示该基因编码区长1020bp;推导的harpinCSCL006与ErwiniachrysanthemiEC16和3937编码的harpin蛋白同源性高,但与其它软腐菌的harpin蛋白同源性较低;在大肠杆菌中(Escherichiacoli)高效表达了hrpNCSCL006基因,重组harpinCSCL006蛋白分子量为34kD。以抗harpinEcc的抗体为探针,Westernblot证实该蛋白确为harpin;纯化的harpinCSCL006,能引起烟叶的过敏反应。  相似文献   

山地乌骨鸡β防御素Gal-2基因的克隆及酵母表达载体的构建     

刘海燕  岳华  汤承  杨发龙  张焕容  黄兴  张平  周光荣 《黑龙江畜牧兽医》2011,(19)

为了构建山地乌骨鸡β防御素Gal-2基因酵母表达载体,试验根据GenBank中鸡β防御素Gal-2基因序列设计引物,采用RT-PCR技术从山地乌骨鸡骨髓细胞中扩增出Gal-2基因,经PCR和酶切鉴定后测序,并采用DNAStar软件进行生物信息学分析;再根据毕赤酵母偏爱密码子和山地乌骨鸡β-防御素Gal-2成熟肽编码基因序列设计并合成1对引物,采用PCR技术从重组质粒pMD18-T-Gal-2扩增出其成熟肽编码基因,并将其插入载体pPICZaA,构建重组质粒pPICZaA-Gal-2,将pPICZaA-Gal-2线性化,通过电击转入毕赤酵母菌株GS115,用1%甲醇诱导表达120 h,表达产物纯化后进行Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定。结果表明:山地乌骨鸡β防御素Gal-2基因克隆成功;山地乌骨鸡β-防御素Gal-2成熟肽编码基因重组真核表达载体构建成功;山地乌骨鸡Gal-2基因在酵母中得到表达。  相似文献   

山羊源绵羊肺炎支原体的耐药谱型分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

陈朝喜  王华  朱晓霞  汤承 《中国畜牧兽医》2011,38(1):179-181

采用微量稀释法对从四川自贡、简阳、乐至等地分离的33株山羊源性绵羊肺炎支原体进行19种抗菌药物MIC值测定,试验数据利用WHONET5.4软件处理并分析其耐药谱型。试验结果表明,33株绵羊肺炎支原体对19种抗菌药物表现出多重耐药性,其耐药谱型以耐氯霉素、链霉素、红霉素、头孢噻呋、阿米卡星、利福平为主,约占78.79%。  相似文献   

鸭嗜水气单胞菌病的诊断及防治   总被引：3，自引：0，他引：3  

岳华  汤承  刘群  于学辉  罗薇  杨晓农  龙虎  邓一科  刘内生  吴万友 《养禽与禽病防治》2006,(1)

2004年8月,成都郊区多个鸭场中暴发临床症状和病理变化与鸭病毒性肝炎(D H)相似的传染病,用抗D H高免蛋黄液治疗无效,经病原分离鉴定诊断为鸭嗜水气单胞菌病。1发病情况发病鸭群多为8～20日龄的樱桃谷或奥白星雏鸭,突然发病,先是有个别突然死亡,第2天开始出现大量死亡,日死亡数  相似文献