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家蚕CDK11与RNPS1和9G8相互作用的鉴定 总被引：2，自引：2，他引：0
【目的】鉴定家蚕(Bombyx mori)CDK11与RNPS1和9G8的相互作用,为解析其是否参与前体RNA的剪接打下基础。【方法】利用家蚕基因组数据库Silk DB找到本研究克隆的家蚕基因序列,采用Primer 5.0进行引物设计,通过PCR技术克隆获得家蚕的两个重要剪接因子RNPS1和9G8,并构建具有不同抗原标签的过表达载体,采用NCBI检索并获得其他物种的相关序列,利用在线预测软件SMART进行结构域预测,采用Clustal X 1.83和GENEDOC 3.2预测同源序列,利用软件MEGA 6.0构建系统进化树,通过免疫荧光验证家蚕CDK11两种剪切体CDK11A和CDK11B分别与RNPS1和9G8的共定位情况,进一步通过免疫共沉淀验证CDK11A、CDK11B分别与RNPS1和9G8的相互作用。【结果】RNPS1的开放阅读框长为882 bp,编码293个氨基酸;9G8的开放阅读框长为531 bp,编码176个氨基酸;RNPS1和9G8都属于SR蛋白家族,具有该蛋白家族成员的一个富含丝氨酸/精氨酸(S/R)重复序列的RS结构域。同源序列比对表明,RNPS1和9G8都具有典型的RRM结构域,此外9G8还含有一个锌指结构域。系统进化分析显示,RNPS1聚类于无脊椎动物一支,与同为鳞翅目昆虫的斑点木蝶、黑脉金斑蝶等亲缘关系较近;9G8也聚类于无脊椎动物一支,与同为鳞翅目昆虫的黑脉金斑蝶、金凤蝶等关系较近。荧光共定位证明,RNPS1分别与CDK11A和CDK11B共定位于细胞核中,且具有点状共聚集现象;同时发现,RNPS1还具有胞质定位,点状聚集于核外周。而9G8分别与CDK11A、CDK11B在细胞核中也具有共定位现象。进一步通过免疫共沉淀发现,在所有的总蛋白和细胞裂解离心后的上清液样品中,均能检测到对应目的条带的表达,表明共转染的细胞均能正常表达目的蛋白,并且蛋白溶于上清。同时,在所有的共沉淀条带中,均能检测到对应目的条带,以上结果表明CDK11A、CDK11B均与RNPS1和9G8具有相互作用。【结论】家蚕RNPS1和9G8具有典型的RRM结构域,属于SR家族。CDK11A和CDK11B能够与RNPS1和9G8相互作用。 相似文献
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驻马店市常见行道树的病虫害种类及防治方法 总被引：1，自引：1，他引：0
对驻马店市常见行道树如香樟、垂柳、国槐、白蜡、大叶女贞、合欢、枫杨、法桐、黄山栾等出现的病害、虫害进行概述,并提出相应的防治措施,以供行道树病虫害防治提供参考。 相似文献
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信访工作是党和政府联系群众的桥梁与纽带,是维护和实现群众民主权利的重要手段。随着农村经济的迅猛发展和农村改革的不断深化,给农村社会经济生活和人们的利益关系带来极大的变动,所引发的群众来信来访事件有所上升,有些过激行为和群体性事件对社会发展造成极其恶劣的影响。做好农村基层的信访工作,在社会危机管理中将发挥重大效用。 相似文献
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利用野外拍摄照片判读土壤粗糙度是一种简单快速的测算方法。为了克服人工判读处理效率低、结果易受人为因素影响和目前的计算机自动读取结果易受野外杂草影响、自动化程度有待提高的缺点,提出了一种基于神经网络和决策树的土壤粗糙度测量方法。该方法在建立神经网络时充分考虑土壤边界线、白板边缘及参考方框的特征选取输入特征向量,消除噪声影响,实现图像边缘检测;并在此基础上建立决策树区分白板、土壤、参考方框等信息,完成土壤边界线和比例尺的获取。野外试验中不可避免有杂草和光照的影响,考虑到阴影、土壤和杂草色彩的差异性,决策树判决准则的选择不仅包含了纹理信息而且考虑了色彩信息。试验表明,基于神经网络与决策树的土壤粗糙度测量采用带有简单方框的参考白板能快速高效地从复杂的野外照片中获取土壤粗糙度信息,降低了拍摄要求。自动提取结果与人工判读相比,所得均方根高度的误差在5%以内,相关长度的计算误差在1%以内,具有较高的精度和可靠性。该研究方法为土壤粗糙度实时在线测算提供了有效的解决方案。 相似文献
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为了确定引起某警犬基地42只犬发生趾间炎的病原菌,试验对患犬进行临床检查,并从患犬病健组织交界部位采集病料,分别通过革兰氏染色镜检、细菌分离培养、生化鉴定、PCR诊断、药敏试验对病原菌进行检测.结果 表明:患犬脚趾肿大,部分犬在脚趾及周围出现结节、脓疱、脚趾间皮肤坏死呈煤焦油样,解剖死亡犬可见胰腺部分坏死.92.86％... 相似文献
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为了研究牛血清白蛋白(BSA)对犬精液冷冻保存效果的影响,试验配制含有不同浓度(0、3%、5%、7%)BSA的精液冷冻稀释液用于保存犬精液,测定冷冻-解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量及线粒体膜电位(MMP)等指标。结果表明：3%和5%BSA组冷冻-解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和T-AOC均显著高于对照组(P<0.05);3%BSA组MDA含量显著低于其他各组(P<0.05),线粒体膜电位值显著高于其他各组(P<0.05);除精子活力外,7%BSA组和对照组之间各项指标均差异不显著(P>0.05)。说明在犬精液冷冻稀释液中添加BSA能有效改善冷冻-解冻后精液品质,对提高精子抗氧化能力及代谢能力都有显著效果,BSA的最适添加浓度为3%。 相似文献
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本实验旨在研究二甲双胍对犬冷冻-解冻后精液品质的改善效果,用含有不同浓度(0、25、50、100μmol/L)二甲双胍的Tris-卵黄稀释液冷冻保存犬精液,解冻后测定精子活力、质膜完整率、顶体完整率、活性氧(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量、线粒体膜电位状态及腺苷三磷酸(ATP)含量等指标.结果显示:二甲双胍添加组的... 相似文献
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我国大部分地区夏季气温均高于30℃,夏季高温环境使犬的饲养、管理和使用都受到很大影响和限制。本文从血液生化指标、组织机能、免疫、呼吸及心血管系统等方面综述了高温环境对犬生理生化的影响,旨在通过了解和掌握热应激如何对犬造成伤害,从而能科学合理的设计应对措施。 相似文献