胶体金作为免疫佐剂的初探     

袁秀芳  王一成  徐丽华  张存  叶伟成 《浙江农业科学》2008,(2):228-231

利用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，经扫描电镜观察，粒径大小为15～20nm。以牛血清白蛋白为指示抗原，以小白鼠为模式动物，设立弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂作对比，探索胶体金作为免疫佐剂的可能性。试验结果显示，胶体金能够显著提高鼠体内抗牛血清白蛋白抗体的水平，其抗体水平高于弗氏不完全佐剂试验组，而略低于弗氏完全佐剂试验组。因此，胶体金有可能开发成为新一代免疫佐剂。  相似文献   

棉花地下滴灌试验初报     

聂新富  王一成  孙武 《新疆农机化》2002,(5):22-22

为推动节水灌溉的发展，近几年１２３团在棉花种植中采用了电力加压滴灌、柴油机加压滴灌、低压软管灌和喷灌等灌溉技术。２００２年又对地下滴灌技术进行试验，取得了较好的效果。１地下滴灌的主要技术特征地下滴灌是采用以色列耐特菲姆公司的滴灌带和布管机械，用大马力轮式拖拉机牵引，一次性将毛管布于地下３５cm处，可连续使用３～５年，地面不见管子和管件，不影响诸如犁地、整地、播种、中耕、化控等各种机械作业和其它地面工作，管道和管件不易损坏丢失，而且还节约很多的地面辅助管件。而目前所采用的其它几种节水灌溉方式，主干管…  相似文献   

鸭疫里氏杆菌赘生物提取及其理化特性研究          下载免费PDF全文

韦强  鲍国连  王一成  徐丽华  季权安 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2005,31(3):250-254

为了提取纯净的鸭疫里氏杆菌赘生物,比较了4种培养基培养RAⅡ型菌和4种提取赘生物试验的方法,结果表明,马丁琼脂培养的RA菌赘生物含量较高,杂质少,适宜于作为提取赘生物用的培养基;差速离心结合滤膜过滤法能有效地把细菌和赘生物分离开来,提取到较纯的赘生物.赘生物的核酸检测和蛋白质电泳分析表明,赘生物无核酸存在,蛋白质电泳图谱与菌体相似形态学观察表明,提取的赘生物可分为大、中、小三类,大的和中等的赘生物外层为一层厚的壁,中央为三角形或四边形样的核物质;小的赘生物为圆形,有一层很薄的外膜,中央为点状或星状的核.研究结果为该菌的分类提供了一定的科学依据.  相似文献   

当前仔猪流行性腹泻防控建议   总被引：1，自引：1，他引：0  

秦云  林燕清  赵永旭  王一成 《猪业科学》2013,(12):86-87

猪流行性腹泻给养猪业带来严重的经济损失。为减少该病造成的损失,从流行现状和流行病学新特点探讨该病突然暴发的原因,并提出有效的综合防治措施来控制猪流行性腹泻的暴发。  相似文献   

副猪嗜血杆菌四环素耐药基因TetB的PCR检测方法建立     

江军  李军星  康磊  袁秀芳  徐丽华  王一成 《浙江农业科学》2014,1(12):1924-1927

在本实验室前期研究的基础上,选取与四环素耐药表型相关性较好的TetB基因,建立PCR方法,以探索副猪嗜血杆菌耐药性的快速检测方法。本研究利用四环素主要耐药基因TetB的引物,对PCR反应条件进行优化,以副猪嗜血杆菌基因组DNA为模板,未出现非特异性扩增条带,PCR扩增条带单一。将TetB基因克隆至pMD 19T载体,以重组质粒为标准品,确定了最低检测拷贝数,经测定,最低检测拷贝数为154×103。以不同稀释度的21A7菌株基因组DNA为模板,确定了最低细菌检出量,经测定,最低检测细菌数量为46×103个。该方法为建立临床快速检测副猪嗜血杆菌耐药性奠定了基础。  相似文献   

猪主要DNA病毒多重二温式PCR检测方法的建立及初步应用     

申世川  王一成  姜平  袁秀芳  徐丽华  李军星 《畜牧与兽医》2012,44(2):60-64

通过对GenBank发布的猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的核苷酸序列进行比对分析,找出PPV的VP2基因,PRV的gH基因和PCV2的ORF2基因的相对保守区域。利用生物学软件在保守序列分别设计高溶解温度引物,将常规三温式PCR过程中的退火与延伸合并为一步,通过对PCR反应条件的优化,确定最佳引物浓度、最佳聚合酶浓度、最佳退火温度以及最佳反应体积,建立了多重二温式PCR方法检测PPV、PRV和PCV2,其扩增的目的片断大小分别为PPV(142 bp)、PRV(300 bp)和PCV2(469 bp),从而节省临床检测时间,同时又能通过一个反应体系对PPV、PRV和PCV2 3种猪主要DNA病毒进行检测。用30份临床病料对本研究多重PCR技术和单项PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为95%以上。表明建立的多重PCR检测方法,具有高度特异、快速、敏感等特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。  相似文献   

猪流感诊断方法研究进展   总被引：7，自引：0，他引：7  

王方昆  王一成  袁秀芳  徐丽华 《动物医学进展》2006,27(4):17-21

猪流感即猪流行性感冒,是由正黏病毒科A型流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。其特征为突发,高热,精神沉郁,食欲废绝,呼吸困难,阵发性咳嗽。猪流感的病死率不高,病猪可康复。近年来,随着集约化养猪规模的不断扩大,猪流感对养猪业构成了较大的威胁。此外,猪流感在人流感和禽流感之间发挥着关键性作用,具有重要的公共卫生意义。自1918年首次报道以来,猪流感一直受到人们的广泛关注。研究快速、科学、准确的诊断方法,对于本病的检测和控制具有重要的意义。除常规的临床症状及病理变化诊断外,流感的确诊依赖于实验室诊断方法。文章从病原学、血清学和分子生物学等几个方面对该病的诊断研究进展做了综述。  相似文献   

猪病诊治专家系统的研制与应用     

胡为群  王一成  祝利莉  郑可锋  叶少挺  朱旭斌 《中国农学通报》2006,22(8):5-5

为了有效地向养殖户提供猪病诊治技术,将人工智能、多媒体等信息技术与农业技术有机结合,开发出基于PAID4.0开发平台的猪病诊治专家系统。该系统包括了知识浏览型的猪病介绍和智能推理的临床诊断等功能,对主要猪病的诊断与治疗提供远程在线决策,涉及70余种猪病种类,140余幅相关图片,本文对系统的功能和应用也作了介绍。  相似文献   

副猪嗜血杆菌毒力与非毒力菌株菌体蛋白的比较蛋白质组学分析     

曹会敏  李军星  袁秀芳  徐丽华  周晓丽  杜晓莉  姜平  王一成 《农业生物技术学报》2013,21(7)

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)是猪群上呼吸道的一种共栖菌群,在一定的条件下能侵入机体并导致严重的全身性疾病,区分出正常栖生菌株和致病性菌株是确诊该病的关键.为了筛选副猪嗜血杆菌毒力株与非毒力株之间的差异蛋白,本研究通过比较蛋白质组学分析临床分离的毒力菌株14A7-2和非毒力菌株20A3-2之间2-DE图谱的差异,提取两个菌株的菌体蛋白进行双向电泳分离,Imagemaster 2D Platinum 7.0软件分析处理凝胶图像,MALDI-TOF/MS鉴定差异蛋白.在副猪嗜血杆菌毒力菌株中检测到596±10个蛋白质点而在非毒力菌株中检测到568±10个蛋白点,其中表达量差异达5倍以上及毒力菌株或非毒力菌株特有的蛋白点共有80个.选取毒力菌株或非毒力菌株特有的44个差异蛋白点进行质谱鉴定,成功鉴定42个蛋白点,对应37种蛋白.其中,毒力菌株特有蛋白27种,非毒力菌株特有蛋白5种,在毒力菌株特有蛋白中鉴定出潜在毒力因子铁摄取调节蛋白、触发因子、3-脱氢奎尼酸脱水酶等.研究结果为进一步研究副猪嗜血杆菌的毒力因子和致病机理以及鉴别诊断不同毒力株新技术提供新信息.  相似文献   

副猪嗜血杆菌分离株的耐药性及耐药基因分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

忽占利  李军星  胡松华  王一成  袁秀芳  徐丽华 《华北农学报》2013,(4)

为了解浙江省规模化猪场患病猪副猪嗜血杆菌的耐药性,采用K-B琼脂法对73株HPS浙江株进行了18种临床药物的敏感性试验,同时应用PCR技术对11个相关耐药基因进行扩增、测序和比对分析。药敏试验结果显示：对磺胺类耐药的分离株比例高达86．30％,对四环素类、氨基糖苷类、喹诺酮类、β-内酰胺类和氯霉素类耐药的比例分别为65．75％,60．27％,50．68％,50．68％,46．58％,对大环内酯类耐药仅为28．77％。 PCR分析显示：97．26％的菌株中检测到耐药基因,多重耐药的占84．93％。其中喹诺酮类耐药基因Aac（6′）-1b的检出率为76．71％,氨基糖苷类耐药基因AadA1的检出率为65．75％,磺胺类耐药基因Sul1和Sul2的检出率为45．2％和10．96％,氯霉素类耐药基因Flor、CmLA、Cat1的检出率为15．07％,8．22％,58．9％,四环素类耐药基因 TetA和 TetB 的检出率为4．11％和49.32％,β-内酰胺类耐药基因Tem-11的检出率为35．62％,大环内酯类耐药基因ErmB的检出率为1．37％。耐药基因型和表型符合率为：磺胺类62．07％,β-内酰胺类74．29％,氯霉素类81．48％,四环素类75.00％,大环内酯类0,喹诺酮类75．68％,氨基糖苷类72．09％。因此,HPS在浙江规模化猪场对临床药物已产生了耐药性,通过耐药基因检测结果确定耐药菌株具有一定的参考价值。  相似文献