酶标兔抗鸡IgG的制备   总被引：3，自引：0，他引：3  

王彦彬  李艳伍  郑杰  张红英 《河南农业科学》2004,(2):53-54

无菌采健康鸡心脏血 ,辛酸—硫酸铵法提取血清IgG ,SephadexG2 5柱层析 ,SDS -PAGE电泳检测IgG纯度 ,分光光度计测定含量 ,透析袋浓缩。与福氏完全佐剂和不完全佐剂乳化后 ,免疫 4只雄性健康家兔 ,1 0d心脏采血。用同样方法纯化兔IgG。过碘酸钠氧化法标记辣根过氧物酶 ,即得酶标兔抗鸡IgG。  相似文献   

紫椴的组织培养技术研究   总被引：7，自引：1，他引：6  

王彦彬  颉玉敏  陈荣  祁永会 《防护林科技》2002,(2):37-38,46

通过对来源于 2 0～ 30年优树、5～ 8年生幼树、1～ 2年生超级苗及伐根 1～ 2年生萌生条上的顶芽、侧芽为外植体 ,对紫椴进行组织培养。采用正交试验法对基本培养基、激素种类与激素浓度进行了筛选 ,找出影响芽分化的主要因子及最佳组合试验。  相似文献   

豫州褐壳蛋鸡Ⅱ系部分数量性状的遗传分析     

宋素芳  康相涛  李明  牛广论  王彦彬 《中国家禽》2004,8(Z1):110-113

用父系半同胞组内相关法对豫州褐壳蛋鸡Ⅱ系第四世代的部分数量性状的遗传参数进行了估测与分析,结果为:开产日龄的遗传力为0.6214,蛋重的遗传力为0.2637～0.4039,体重的遗传力为0.2447～0.3981,产蛋量的遗传力为0.3587～0.4024;开产日龄与40周龄和72周龄产蛋量的遗传相关系数为-0.5822和-0.7475,40周龄产蛋量与72周龄产蛋量的遗传相关系数为0.7674,40周龄蛋重与72周龄蛋重的遗传相关系数为0.8716,开产蛋重与40周龄和72周龄蛋重的遗传相关系数分别为0.7119和0.8790.  相似文献   

猪干扰素α和γ在杆状病毒中共表达及对PRRSV抑制作用   总被引：2，自引：0，他引：2  

王彦彬  孙向丽  魏战勇  陈红英  杨明凡  崔保安 《中国农业科学》2011,44(9):1931-1938

[目的]制备复合型猪干扰素α和γ进行应用抗病毒研究.[方法]本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码猪干扰素α和γ成熟蛋白基因插入供体质粒pFastBacDual,分别置于PH和P10启动子控制下,引入蜂素信号肽(honeybee melittin signal peptide,HBM)基因取代猪干扰素α和γ原有信号肽基因以实现分泌型表达,并在C端分别融合6个组氨酸标签以利于纯化.将构建质粒转化DH10感受态细胞进行同源重组,获得重组穿梭质粒Bacmid,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒.重组杆状病毒感染昆虫细胞,鉴定重组蛋白的活性.[结果]通过问接免疫荧光、Western-blot证明猪干扰素α和γ重组蛋白在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中均获得表达,表达产物主要分布在培养上清中.通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测重组蛋白的抗病毒活性,结果表明:昆虫细胞上清的抗病毒效价达到3.24×10<'7>U·mL<'-1>.在Marc-145细胞,昆虫细胞上清经2<'-11>稀释能够抑制100个TCID<,50>的PRRSV的致细胞病变作用.[结论]应用杆状病毒表达系统实现猪干扰素α和γ在昆虫细胞上分泌共表达,重组蛋白在细胞上对PRRSV具有抑制作用.  相似文献   

蜂素信号肽介导猪干扰素-γ在杆状病毒中分泌表达及抗病毒活性检测   总被引：1，自引：0，他引：1  

王彦彬  魏战勇  陈红英  王建举  郭小参  崔保安 《中国兽医学报》2010,30(11)

应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码成熟的猪干扰素-γ基因插入供体质粒pFastBacTM1polyhedrin启动子控制下的多克隆位点,引入昆虫细胞可识别的蜂素信号肽(Honeybee melittin signal peptide)取代猪干扰素-γ原有信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以利于纯化。将构建质粒转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭载体质粒,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。重组蛋白通过SDS-PAGE、间接免疫荧光、Western-blot证明在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中获得分泌表达。通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测重组蛋白的抗病毒活性是1.38×106U/mL。  相似文献   

加大对农服务力度、提高农村广播节目的向心力     

韩建人  刘彦静  王彦彬 《农民致富之友》2009,(7):1-1

近年来,随着国家大力实施广播电视村村通工程和城乡有线电视网的迅速铺开,农村广播电视覆盖率大大提高。面对众多的频道、频率,如何让广大农民对农村广播节目情有独钟,是我们必须首先考虑的头等大事。这就要求我们的农村广播节目切实落实“三贴近”。面向基层、面向农村、面向群众。尤其在宣传报道的内容上要贴近实际,讲究实在,追求实效。做到想农民之所想,急农民之所急,写农民之所需,播农民之所盼,把政策送到农民心坎上。这些报道的推出,不但维护了农民的合法权益,树立了电台的威信,也架起了群众与政府沟通的桥梁。  相似文献   

固始鸡白细胞介素2基因的克隆、表达及其表达蛋白活性的检测     

王彦彬  卢中华  康相涛 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2006,34(5):66-71

参照GenBank上已发表的鸡白细胞介素2序列设计引物,运用RT-PCR技术,从经ConA诱导的 20～35日龄固始鸡脾细胞总RNA中扩增出目的片段,IL-2基因,将其插入到pGEM-T载体上,构建了克隆质粒 pGEM-T-chIL-2。测序结果表明,本试验克隆的固始鸡白细胞介素2基因与GenBank上已发表的序列相比,存在2 个核苷酸变异。重新设计表达引物,以克隆质粒pGEM-T—chIL一2为模板PCR扩增表达片段,对表达片段进行 Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切,连接到作同样双酶切的pET28a表达载体上,鉴定后转化大肠杆菌BL21并进行IPTG 诱导表达,然后对表达产物进行SDS-PAGE电泳鉴定,结果表明,表达蛋白主要以包涵体的形式存在,表达蛋白分子质量约为18 ku;目的蛋白表达量占总量的18％。体外活性检测表明,重组蛋白具有促进淋巴细胞增殖的活性。  相似文献