Nsp9基因实时荧光定量PCR检测方法的建立及其在感染细胞过程中表达量的变化     

赵孟孟  冯松林  王文佳  邢星  冯嘉萍  张桂红 《中国畜牧兽医》2016,43(10):2534-2540

试验旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）Nsp9基因的实时荧光定量PCR检测方法,并探究其在感染细胞过程中表达量的变化。根据PPRSVNsp9基因序列设计引物,建立基于SYBR Green Ⅰ检测模式的实时荧光定量PCR。结果显示,PRRSV Nsp9基因在1×10⁴~1×10⁸拷贝/μL范围内有很好的线性关系,扩增产物的熔解曲线只有1个单特异峰,无引物二聚体。该方法与猪戊肝病毒（HEV）、猪流感病毒（SIV）、伪狂犬病病毒（PRV）基因组均无交叉反应,可重复性好,组内变异系数小,可用于临床PRRSV检测。在病毒感染细胞过程中,Nsp9基因表达量逐步升高,36 h达到最高。本研究为探究病毒复制规律与临床疫苗生产奠定了理论基础。  相似文献   

牛诺如病毒及牛嵴病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用     

师志海  徐照学  兰亚莉  王文佳 《中国动物传染病学报》2020,(1):28-32

本研究根据BNoV和BKoV基因组的保守区域设计2对特异性引物,建立了能同时检测牛诺如病毒(Bovine norovirus,BNo V)和牛嵴病毒(Bovine kobuvirus,BKo V)的双重PCR检测方法。该方法能特异性扩增BNo V和BKo V的目的条带,且未扩增出其他犊牛腹泻病毒性病原;BNoV和BKoV的最低检测限分别为5.39×105 copies/μL和2.23×106 copies/μL;对临床采集的127份犊牛腹泻样品检测结果显示,BNoV的阳性率为6.30%(8/127),BKoV的阳性率为4.72%(6/127),两者与单一PCR检测结果相一致,符合率为100%。本研究建立的双重PCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性,可用于BNoV和BKoV的快速检测和流行病学调查。  相似文献   

牛星状病毒EvaGreen实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用     

师志海  王文佳  张彬  孟红丽  王亚州  金磊  兰亚莉  徐照学 《中国兽医学报》2021,(1):50-55

牛星状病毒(BAstV)是我国新发的犊牛腹泻病原,本试验的目的是建立检测BAstV的Real-time PCR方法.根据BAstV流行株的ORFla基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BAstV的Real-time PCR方法.结果表明,该检测方法的Ct值与标准品模板在1.36×1...  相似文献   

亚洲棉、雷蒙德棉和陆地棉NRAMP基因家族的鉴定和进化分析     

卢婷婷  王文佳  李存法  侯春彬 《分子植物育种》2019,17(7):2077-2085

  相似文献   

水分胁迫对春大豆叶片保护酶活性及相对电导率的影响   总被引：1，自引：1，他引：0  

王文佳  李爽  马泽众  马玉玲  刘丽君  董守坤 《中国农学通报》2019,35(11):14-18

为了研究了水分胁迫对大豆叶片保护酶活性和相对含水率的影响，以3 个大豆品种‘黑农57’、‘改良168’、‘绥农26’为材料，采用盆栽控水试验，设置中度干旱、重度干旱和适宜水分处理。结果显示：（1）在适宜水分条件下，叶片超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性表现为先增加后降低的趋势，过氧化氢酶(CAT)活性和相对电导率表现为降低的趋势。（2）各时期SOD和CAT活性为中度胁迫>重度胁迫>适宜水分，差异显著；各时期POD活性和苗期-盛花期的相对电导率为重度胁迫>中度胁迫>适宜水分，差异显著。（3）在干旱胁迫条件下，POD活性和SOD活性，‘黑农57’>‘改良168’>‘绥农26’；CAT活性品种间差异不显著。综上，在干旱胁迫下，春大豆叶片保护酶活性和相对电导率比在适宜水分下活性要高，体现了春大豆对干旱环境的自我调节能力。  相似文献   

牛疱疹病毒糖蛋白D的结构特点及其在疫苗研发中的应用     

马小静  李梦莹  张凯  王文佳  程成  李继东  许立华 《动物医学进展》2019,(7):111-115

来自牛疱疹病毒1和5型(BoHV-1和BoHV-5)的病毒囊膜糖蛋白D(gD)是病毒的主要组成成分,并且在疱疹病毒的致病机理中起到关键作用。gD对于病毒侵入细胞是必不可少的,是病毒感染细胞期间中和抗体的主要靶标。鉴于其在诱导保护性免疫方面的作用,已使用该糖蛋白作为主要抗原开发出亚单位疫苗、DNA疫苗和载体疫苗候选物,证明gD具有在宿主中诱导较强病毒中和抗体和细胞介导的免疫应答以及对宿主进行免疫保护的能力。论文着重介绍了BoHV-1、BoHV-5和一些人类疱疹病毒gD的结构和功能特征,阐述了gD与宿主免疫系统的反应及gD在新型疫苗设计中的应用,为全面了解gD结构特点及其在疫苗研发中的作用提供借鉴。  相似文献   

宁夏地区犊牛腹泻的病原调查   总被引：2，自引：0，他引：2  

王文佳  程成  张凯  孙鑫鹏  许立华 《畜牧与兽医》2019,(2):107-109

为了解宁夏地区奶牛犊牛腹泻的病原微生物种类及流行病学情况,2017年6月至12月对宁夏地区20个牧场有临床腹泻症状的犊牛,随机采集127份腹泻粪便样品,采用快速检测试剂盒对轮状病毒、隐孢子虫、大肠杆菌和贾第鞭毛虫4种病原微生物进行了抗原检测。结果显示:在127份腹泻粪样中,轮状病毒的阳性检出率为32. 28%(41/127),隐孢子虫的阳性检出率为25. 20%(32/127),大肠杆菌阳性检出率为11. 02%(14/127),贾第鞭毛虫阳性检出率为4. 72%(6/127)。结果表明:宁夏部分奶牛养殖区犊牛已经存在着较为严重的轮状病毒和隐孢子虫病感染,此调查为宁夏制定科学有效的综合防控措施提供了有效依据,对促进宁夏地区奶产业健康持续发展具有重要意义。  相似文献   

宁夏地区奶牛副结核病血清学调查     

程成  王文佳  张凯  马小静  李梦莹  许立华 《中国兽医杂志》2019,(2):62-64

为了解宁夏地区奶牛副结核病的感染情况及流行趋势,本试验对采集于宁夏不同地区的189份疑似副结核症状奶牛的血清样品进行了牛副结核抗体检测。结果显示,样品牛副结核抗体阳性率最高可达86.67%,最低为20%,平均阳性率为56.08%。表明宁夏地区已经存在着较为严重的牛副结核病感染。本调查为宁夏地区制定科学有效的综合防控措施及促进地区奶牛业健康可持续发展提供一定依据。  相似文献   

葛根芩连汤对小鼠血清及粪便代谢的影响     

刘茜明  李慧  杨光勇  何光志  田维毅  蔡琨  王平  黄高  王文佳  梁建东 《黑龙江畜牧兽医》2018,(12)

为了探索葛根芩连汤对小鼠血清色氨酸及主要代谢产物和粪便中部分短链脂肪酸的影响,试验通过葛根芩连汤灌胃小鼠,分别在干预7 d和14 d后采集样本,运用高效液相色谱-紫外检测器(HPLC-UVD)法测定小鼠血清中犬尿氨酸(Kyn)、色氨酸(Trp)与5-羟色胺(5-HT)浓度,气相色谱(GC)法测定小鼠粪便中乙酸、丙酸和丁酸含量。结果表明:与空白组相比,用药组小鼠血清Kyn和5-HT浓度明显升高(P0.05),Trp无明显变化(P0.05);给药7 d后粪便中丙酸浓度上升(P0.05),用药14 d后乙酸、丙酸和丁酸浓度极显著升高(P0.01)。说明葛根芩连汤对小鼠血清Trp及主要代谢产物和粪便中部分短链脂肪酸存在一定的影响。  相似文献   

衣原体毒力因子研究进展     

张凯  李凡飞  何小丽  王文佳  程成  张超  许立华 《动物医学进展》2018,(5)

衣原体(Chlamydia)是一类专性细胞内寄生、具有独特的双相型发育周期的原核微生物,对人和多种畜禽有致病性。研究表明,衣原体的致病性是其毒力因子与宿主细胞的相互作用导致。论文通过对国内外许多学者关于衣原体致病机制和毒力因子的研究进行总结梳理,阐述主要外膜蛋白(MOMP)、多形态膜蛋白(Pmps)、Ⅲ型分泌系统(T3SS)、脂多糖(LPS)、热休克蛋白(HSP)、质粒和蛋白酶样活性因子(CPAF)在衣原体的致病性方面发挥的主要作用。  相似文献