昆明小鼠胚胎干细胞培养体系的优化     

任卫青  张志平  许晓婷  邓立新  李小佳  吕婧玉  翟明胜  王新庄 《畜牧兽医学报》2013,(2):316-321

为了更高效地分离昆明小鼠胚胎干细胞,本研究从饲养层、胚胎发育阶段和培养液方面进行优化。将3代以内的小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)用丝裂霉素C处理后,分别按1×104、1×105、1×106·mL-1密度接种,以H-DMEM+15%KSR+LIF为培养液,观察不同密度饲养层对昆明小鼠胚胎干细胞(ES细胞)生长的影响,并研究胚胎发育阶段和培养液中分别添加干细胞生长因子(SCF)、SCF+胰岛素对昆明小鼠ES细胞分离克隆的影响。结果显示,胚胎在密度为1×105·mL-1的饲养层上,F1代和F2代ES细胞克隆形成率均显著高于其他2组(P<0.05)。囊胚的F2代ES细胞克隆形成率显著高于桑椹胚(P<0.05),培养液中添加SCF显著提高昆明小鼠胚胎贴壁率(P<0.05),同时添加SCF和胰岛素得到昆明小鼠最高胚胎贴壁率及F1、F2代ES细胞克隆形成率。所分离的ES细胞显示AKP染色强阳性,Oct-4、SSEA-1的免疫荧光检测阳性,具有ES细胞的特点。由此认为,发育至囊胚的胚胎在MEF密度为1×105·mL-1上,培养液中同时添加SCF和胰岛素更适合昆明小鼠ES细胞的分离培养。  相似文献   

兔骨髓间充质干细胞的分离培养     

闫颖颖  张静芳  和小娥  王新庄 《河南农业科学》2010,(2)

为探讨体外分离及培养扩增兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,无菌采取兔股骨,用含20%FBS的DMEM培养液冲骨髓腔,采用全骨髓细胞贴壁培养法对MSCs进行纯化扩增,倒置显微镜下观察原代及传代细胞的形态、生长情况、绘制细胞生长曲线。结果显示,MSCs为贴壁生长细胞,形态均匀呈纤维样,增殖能力强,多次传代仍能保持其生物学特性。采用全骨髓贴壁培养法能够较好地纯化和扩增MSCs。  相似文献   

滩羊成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究   总被引：2，自引：1，他引：1  

陈亮  刘丑生  王新庄  赵俊金  李天达  孟飞 《中国畜牧兽医》2010,37(6):50-54

试验以滩羊耳缘组织为材料,采用组织块贴壁培养法和细胞冷冻保存技术构建了35个滩羊成纤维细胞系,并对其进行了形态学、生长动力学、细胞活力测定、核型分析、微生物检测和荧光蛋白报告质粒(PEGFP-N3)基因转染等生物学特性的研究。结果表明,细胞群体倍增时间(PDT)约为36h,细胞冻存后活力为95.8%,细胞染色体中二倍体(2n=54)占主体,镜检细胞的百分比约为97.5%。细菌、真菌、病毒和支原体检测结果为阴性,该细胞库的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准。  相似文献   

γ-氨基丁酸(GABA)的生殖生理作用   总被引：17，自引：0，他引：17  

包华琼  王新庄 《动物医学进展》2002,23(3):39-41

γ－氨基丁酸（GABA）作为一种抑制性神经递质，通过下丘脑－垂体－性腺轴本和性腺生理机能，从而参与激素的分泌调节。GABA对卵巢颗粒细胞孕酮的分泌调节随动情期不同而呈现抑制和促进作用。GABA也可能过多巴胺抑制系统抑制垂体激素LH和PRL的分泌。GABA与孕酮协同作用，能明显促进精子的获能，提高精子的体外能力。  相似文献   

河南省规模化奶牛场牛病毒性腹泻流行病学调查     

杨德新  沈菩秀  于井成  闫磊  闫琛博  张震  王新庄 《中国兽医杂志》2022,(2):95-98

为了解河南省奶牛场牛病毒性腹泻(BVD)的流行情况,本试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对2019年12月—2020年9月采集的河南省40个规模化奶牛场5 486份血清进行检测。结果显示：河南省奶牛场5 486份血清中,BVDV抗原阳性率为1.77%;泌乳牛、后备牛和犊牛的BVDV抗原阳性率分别为1.73%、2.31%和1.12%;豫东、豫南、豫西、豫北和豫中地区的BVDV抗原阳性率分别为1.16%、3.49%、1.62%、1.59%和1.48%,豫东和豫南地区间BVDV抗原阳性率差异显著(P<0.05);不同年龄间BVDV抗原阳性率差异不显著(P>0.05)。由此可见,河南省奶牛场存在BVDV感染,其中豫南地区的BVDV感染率最高,后备牛的BVDV感染率最高。  相似文献   

奶牛乳房炎诊断方法研究进展     

薛永康  王新庄  闫跃飞  杨文华  任小丽  闫磊 《湖北畜牧兽医》2016,(8):15-18

奶牛乳房炎是造成奶牛业损失最主要的原因。随着科学技术的发展与应用,奶牛乳房炎的诊断方法也有了长足的发展。特别是现代生物技术在微生物检测领域应用之后,奶牛乳房炎的诊断周期大大缩短、操作简单快捷、检测成本降低、灵敏度提高。环介导等温扩增(LAMP)技术在奶牛乳房炎主要病原诊断中的应用也极大地推动了奶牛乳房炎检测技术的发展。  相似文献   

中药益加康对AA+肉鸡的应用效果     

杜坤鹏  王新庄  张宝龙  王伟伟  闫颖颖  张静芳 《西北农业学报》2009,18(5):35-38

旨在研究益加康对AA+肉鸡的应用效果.将1日龄240只AA+肉仔鸡随机分为A、B、C、D四组,试验组添加不同浓度的相应产品,饲喂1～42日龄,取不同日龄肉鸡检测其生产性能及血液生化指标.结果表明,与空白组相比A、B组肉鸡日增体质量、脾指数、胸腺指数、血清TP和AKP的活性显著增加(P＜0.05或P＜0.01);血清Urea及血清中CK、LDH的活性显著降低(P＜0.05或P＜0.01).结果提示益加康对AA+肉鸡有明显促进生长,降低料肉比,提高机体免疫力和抗应激能力.  相似文献   

乙醇和电场激活小鼠早期卵母细胞的研究     

李裕强  张涌  王新庄 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1999,27(2):58-61

分别用７０ｍＬ·Ｌ－１乙醇２ｍｉｎ和５５Ｖ·ｍｍ－１电场６４０μｓ一次脉冲,对注射ｈＣＧ１５ｈ的小鼠卵母细胞作激活处理。结果表明：虽然乙醇处理的活化率（５５．４０％）略高于电刺激（４６．９０％）,但二者没有显著差异;与乙醇比较,电激活的卵母细胞能保持良好的发育能力,二者的桑椹胚发育率分别为３１．５１％和９１．３７％,差异极显著（Ｐ＜０．０１）．说明电场作用后卵母细胞的活动更符合其正常的活化规律。  相似文献   

牛病毒性腹泻/粘膜病研究进展     

杨德新  王新庄  闫磊  朱小洁  赵玉玺  薛永康  刘晓曼  张震 《中国牛业科学》2021,47(4):36-39

牛病毒性腹泻(BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(BVDV)引起的一种传染病。被感染后,会导致牛群腹泻、发热、黏膜糜烂溃疡、先天性免疫等症状。本文通过对牛病毒性腹泻流行情况、检测方法、临床类型以及预防与防控等进行论述,为我国的牛病毒性腹泻防治研究提供参考。  相似文献   

奶牛超数排卵期间血浆P4、E2和LH水平变化   总被引：1，自引：0，他引：1  

王居强肖杰  牛晖梁家奎  杜松现王新庄 《河南农业科学》2005,(10):93-96

对8头成年黑白花奶牛超排处理期间及冲胚前的血浆P4、E2和LH水平的变化进行了研究。血浆E2、LH的峰值和血浆P4在PGs注射时、发情时、采卵时的水平与排卵数呈正相关(r=0.8462~0.9925;P<0.05或P<0.01);LH峰值与可用胚数呈正相关(r=0.8814,P<0.01)。超排处理开始后3~6 d较高的E2(pg/ml)/P4(ng/ml)比值有利于受精和胚胎发育。  相似文献