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为建立同时检测禽波氏杆菌(Bordetella avium)、沙门氏茵(Salmonella)、大肠杆菌(Escherichia coli)和绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)4种导致鸡胚死亡病原菌的多重PCR方法,本研究根据B.aviun的ompA基因、Salmonella的invA基因、E.coli的phoA基因和P.aeruginosa的toxR基因序列,各设计一对特异性引物进行多重PCR反应,并对反应体系和条件进行优化.结果显示,4对引物分别扩增出597bp、724bp、372bp和278bp的目的条带;并且特异性强不与其他非目的茵发生反应.经优化B.aviun、P.aeruginosa和E.coli多重PCR检测灵敏度达到104cfu/mL,而Salmonella为103cfu/mL.本研究建立的多重PCR方法为相关病原茵的快速检测提供方法. 相似文献
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通常情况下,相比肉鸡和种鸡养殖,蛋鸡养殖中存在饲料水平相对较差、饲养环节中疾病较多等问题。近些年来,随着食品安全和饲料安全理念为更多的人所关注,在蛋鸡饲料生产中新技术和新产品的应用层出不穷,植物性饲料添加剂(Phytogenic Feed Additives,PFA)即是其中新兴的一类。随着生产实践发展的要求,需要正确和合理地选择使用植物性饲料添加剂。文中就植物性饲料添加剂在海兰褐蛋鸡养殖中的实际应用进行验证,以实际生产的实践数据为在海兰褐蛋鸡养殖中合理使用PFA提供基础数据。 相似文献
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多重PCR检测三种重要食源性致病菌方法的建立及应用 总被引:3,自引:0,他引:3
【目的】建立快速检测奇异变形杆菌、沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏杆菌3种食源性致病菌的多重PCR方法。【方法】根据奇异变形杆菌尿素酶合成的正向调节因子R基因(ureR)、沙门氏菌侵袭性抗原保守基因(invA)和单核细胞增生李斯特氏杆菌编码溶血素O(LLO)的 hlyA基因,分别设计3对特异性引物,对单基因PCR和单管多重PCR扩增的特异性、敏感性分析以及建立L16(43)正交试验对单管多重PCR扩增条件,如引物浓度、Tm值、模板量等的优化,建立快速检测奇异变形杆菌、沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏杆菌的稳定的单管多重PCR方法。【结果】针对奇异变形杆菌、沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏杆菌3种食源性致病菌所设计的3对引物分别能扩增出374、724和215 bp的目的条带,具有高度特异性,反应条件优化后,3种目的菌在105 CFU/mL均可同时扩增出较清晰条带(奇异变形杆菌和单核细胞增生李斯特氏杆菌在104 CFU/mL浓度下仍然可见到条带),比单基因PCR低一个稀释度,并且人工模拟试验和市售食品试验检测结果稳定。【结论】该方法操作简单、快速、特异性强和灵敏度高,能够实现对奇异变形杆菌、沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏杆菌3种食源性致病菌的快速诊断检测和监控。 相似文献
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研究了离体培养条件下不同浓度激素、活性炭、低温及其处理方式和种皮等因素对打破杜梨种胚休眠促进萌发的影响.结果表明,1/2MS培养基上附加GA3和6-BA可以有效地促进去皮杜梨种胚的萌发,以6-BA的促进萌发作用优于GA3,其中分别以7.5 mg/L 6-BA和15.0 mg/L GA3促进萌发和成苗效果较好,但根系发育以附加GA3的培养基为好,易发生侧根.低温和去种皮处理均有利于种胚的萌发,且表现接种后低温预培养方式优于低温处理后再接种培养.活性炭有利于侧根的发生,以0.1%水平促进萌发成苗作用较好;IAA具有很好的促进生根的作用,平均生根率可达89.54%,且以IAA为2 mg/L时侧根条数较多. 相似文献
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新疆核桃种质资源遗传多样性AFLP分析 总被引:2,自引:0,他引:2
用AFLP技术对取自新疆温宿、巩留、和田、若羌、叶城、库车、阿拉尔的122份核桃种质材料进行了遗传多样性和亲缘关系的分析,筛选出7对多态性引物对122份核桃种质材料进行选择性扩增,共获得21989条扩增带,其中8810条具有多态性,平均多态检出率为40.1%。根据AFLP标记的结果,用DPS统计软件分析了核桃种质间的遗传相似系数、遗传距离,并对分析结果进行UPGMA聚类,聚类结果将122份核桃种质材料分为两大类群。第一类群被分为5个亚类,“温81”单独成一个亚类;第二类群被分成2个亚类,叶城的“千年核桃王”和阿拉尔的“阿7”独立成亚类;122份材料的遗传距离变幅在0.12000—0.93103之间。聚类结果很好地将栽培种质和古老种质分开,表明新疆不同地区的核桃种质间存在明显的遗传多样性。还揭示了“温81”、“温179”等优良栽培种质及南疆一些古老核桃种质的遗传基础。 相似文献
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为给阿克苏地区的苹果栽培提供技术支撑,以两年生烟富8号为试体,探讨了增施土壤和叶面混合配比的复合谷氨酸液颗粒肥,研究了不同配比浓度对于试验试体生长的影响,为该地区果树高效优质生产提供理论依据。结果表明:每亩施用200 kg复合谷氨酸液颗粒肥同时喷施200倍复合谷氨酸液肥,能显著增加株高、茎粗、新梢以及叶片的增长量。在土壤施肥结合叶面喷施的9种不同处理下树体的株高、茎粗、新梢以及叶片都呈增长趋势,其中在土壤施肥量相同的条件下,200倍叶面喷施肥比400倍和600倍对于株高和新梢的促进作用更好。 相似文献
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