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81.
猪A组轮状病毒Vp4基因与乳酸菌双标记表达载体的重组及其原核表达 总被引：2，自引：1，他引：1
用Sal I和Kpn I双酶切克隆质粒pGEM-T-Vp4和(以胸苷酸合成酶基因(thvmidvlatesynthase,thyA)及红霉素基因(Erythromycin)为选择压力的双标记的可以在乳酸茵与大肠杆菌之间穿梭表达的)质粒载体pW425et,并将纯化回收的Vp4基因亚克隆至表达载体pW425et中,构建出可以在乳酸茵与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425et-Vp4,并将pW425et-VP4分别转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coli X13和乳酸杆菌感受态中,经生长功能弥补筛选阳性克隆,SDS-PAGE分析,可见约87 ku的融合蛋白.Western-blot分析结果表明,该蛋白具有与轮状病毒多克隆抗体的反应原性. 相似文献
83.
84.
农村生态环境问题的成因与对策 总被引：3，自引：0，他引：3
由于我国城乡环境保护实质存在的非均衡发展,农村环境污染严重已经成为不争的事实,成为社会主义新农村建设中无法回避的问题。良好的农村生态环境同城市环境的改善是相辅相成,互为因果,相互支撑的。必须树立城乡环境的一体意识,采取系统工程,走城乡环境治理统筹协调的科学发展、科学治理之路,才能使城乡环境真正得到改善。 相似文献
85.
绿色荧光蛋白标记穿梭表达载体构建及重组乳酸菌制备 总被引：1，自引：1，他引：0
以红霉素耐药性基因/thy A基因双筛选压力大肠杆菌-乳酸杆菌穿梭表达载体pW425et为基本骨架,将绿色荧光蛋白(GFP)基因插入该载体,构建GFP标记的穿梭表达载体pW425et-GFP.通过连续的荧光强度检测,验证gfp基因能否在重组菌中得到稳定表达.重组表达质粒pW425et-GFP酶切和PCR鉴定结果与预期片段大小相符,SDS-PAGE显示27 kD的绿色荧光蛋白获得表达,在蓝光的激发下,可见明显的绿色荧光,且荧光稳定性强,连续传代30次仍可见荧光.结果表明已成功构建了GFP标记穿梭表达载体pW425et-GFP,为乳酸菌作为益生生理菌载体进行体内定植规律研究和食品级、疫苗级乳酸菌产品的开发奠定了基础. 相似文献
86.
87.
88.
目前,病毒性腹泻是我国钎的常见病、多发病,引起腹泻的病毒种类较多,但危害严重的主要有钎传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和钎轮状病毒(PRV)3种,其中TGEV和PEDV属于冠状病毒属,PRV属于呼肠孤病毒科轮状病毒属. 相似文献
89.
90.