植物抗病毒基因工程研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘佳  吴忠义  张秀海  王永勤  黄丛林 《中国农学通报》2009,25(1):30-38

植物病毒是一类重要的植物病原微生物,每年都给全球的农业生产带来了巨大的损失。近年来,通过基因工程技术培育抗病毒植物已经成为抵抗植物病毒的有效手段。本文阐述了目前植物抗病毒基因工程的主要方法策略,包括由蛋白质介导、RNA介导、非病毒来源基因介导及交叉保护介导的抗性机制,分析了这些机制的存在问题及发展趋势,同时还对一些RNA水平的抗性策略进行了探讨  相似文献   

环介导等温扩增技术检测菊花中番茄不孕病毒   总被引：4，自引：2，他引：2  

刘佳  黄丛林  吴忠义  张秀海  王永勤 《中国农业科学》2010,43(6):1288-1294

【目的】环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术。本研究拟用该技术建立菊花中番茄不孕病毒(TAV)的检测方法。【方法】设计能识别TAV CP序列6个特定区域的4种LAMP特异引物,对MgCl2、dNTPs、甜菜碱等LAMP反应条件进行优化,利用新建的LAMP法检测TAV,比较LAMP和RT-PCR2种不同方法的检测灵敏度。【结果】建立了检测番茄不孕病毒的LAMP技术;LAMP比RT-PCR具有灵敏度更高、快速、简便等优点。【结论】建立的LAMP技术能快速、准确、简便地检测出菊花中的番茄不孕病毒。  相似文献   

非生物胁迫诱导的玉米蛋白激酶基因ZmCIPK1的cDNA克隆和表达分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

边鸣镝  吴忠义  赵久然  王永勤  张秀海  黄丛林  曹鸣庆 《农业生物技术学报》2008,16(6)

CIPK（CBL-interacting Protein Kinase）在植物非生物胁迫信号转导中起重要作用。应用电子克隆的方法在玉米中克隆了一个cDNA全长为1395bp的蛋白激酶基因ZmCIPK1（GenBank接受号为EF158034）。其编码的蛋白含有465个氨基酸,分子量为51.98KD,等电点为6.92。推断的ZmCIPK1催化结构域中包含蛋白激酶催化结构域保守的11个亚结构域, 蛋白C端具有植物CIPK蛋白家族特有的包含24个氨基酸的NAF结构域。半定量RT-PCR结果表明,在甘露醇、氯化钠、ABA和4°C低温诱导时,ZmCIPK1在玉米幼苗叶片中表达量明显上调,在24小时内保持较高的转录水平。试验结果表明,ZmCIPK1是一个新的玉米蛋白激酶基因,响应多种非生物胁迫信号。  相似文献   

原生质体技术与观赏植物育种     

王蔚林  张秀海  黄丛林  王永勤  吴忠义 《中国农学通报》2007,23(3):98-102

原生质体培养和植株再生技术在观赏植物育种中起重要作用。原生质体的来源、原生质体的分离、培养基的成分、培养方法等,都对原生质体的培养有重要影响。近年来,观赏植物原生质体在细胞融合、遗传转化上有了一定发展,为创造观赏植物新种质提供了新途径和方法。  相似文献   

施硒对大蒜产量和含硒量的影响   总被引：46，自引：2，他引：44  

王永勤  曹家树  李建华  赵猛  赵桂芳 《园艺学报》2001,28(5):425-427

  以土壤施硒(0. 1 g·m^-2) 研究大蒜对硒的吸收、转化及硒对大蒜产量的影响。结果表明, 4 个大蒜品种吸收硒的能力为: 应县大蒜> 忻州大蒜> 榆次大蒜和太谷大蒜。以土壤施硒(0. 01、0. 1、1、10 g·m^-2) 、叶面施硒(10、100、1 000 mg·kg^-1) 和硒浸种10、100 mg·kg^-1) 3 种方式处理应县大蒜, 结果随着硒处理浓度的提高, 大蒜的产量先升后降,大蒜含硒量随着硒处理浓度的提高而提高, 但无机硒转化成有机硒的比率下降。  相似文献   

胡萝卜肉质根线粒体DNA提取方法研究     

张智  王永勤  侯雷平  关绚丽  李梅兰  梁毅 《分子植物育种》2010,8(1):191-195

本研究以胡萝卜根为材料,通过高盐差速离心和蔗糖沉淀差速离心两种方法提取线粒体DNA。通过改变缓冲液、使用DNaseⅠ处理得到了无核DNA污染的线粒体。用SDS和蛋白酶K裂解线粒体,经酚:氯仿:异戊醇抽提除去蛋白,并用RNaseA消化从而得到单纯线粒体DNA。本实验还特别设计了叶绿体特异性引物检测线粒体DNA纯度。结果表明:利用优化后的蔗糖沉淀差速离心法提取胡萝卜线粒体DNA,所得线粒体DNA纯度高、产量高,每克肉质根能够得到27.60μg线粒体DNA。  相似文献   

Ca²⁺对拟南芥侧根生长发育影响的递进因子分析     

周索  赵丽英  杜瑞卿  马纳纳  雷莹  王永勤 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2010,38(2):147-152

【目的】确定Ca2+在异三聚体G蛋白调控的拟南芥侧根生长发育过程中的作用及可能的信号传递途径。【方法】以拟南芥的野生型(ws)、异三聚体G蛋白α亚基基因GPA1缺失突变体(gpa1-1,gpa1-2)和超表达突变体(wGα,cGα)为材料,在含有不同质量浓度(0~0.2 mg/L)NAA的培养基内,添加无机钙通道抑制剂AlCl3,对拟南芥侧根生长发育的形态进行观测,并对NAA、Ca2+、AlCl3的影响作用大小进行递进因子分析。【结果】相同质量浓度的NAA对5种基因型拟南芥侧根的生长发育无显著影响;Ca2+对5种基因型拟南芥侧根生长发育均有显著影响,侧根数目依次为缺失突变体野生型超表达突变体;AlCl3对5种基因型拟南芥侧根生长发育影响显著;Ca2+和AlCl3是拟南芥侧根生长发育的重要影响因素。【结论】(1)Ca2+通道可能是异三聚体G蛋白α亚基调节的下游效应器,Ca2+可能是下游信号,AlCl3对细胞膜上的Ca2+通道阻断数量可能是按一定比例阻断,而不是一个绝对数量,机制尚不明确。(2)3个处理因素在不同的处理层次中所起的作用不同,对5种不同基因型拟南芥个体侧根生长的影响也不同。递进因子分析结果与实际情况基本一致,是一种科学的、可行的、有创新性的方法,值得推广应用。  相似文献   

优化野生黄蔷薇不定芽的分化     

庞发虎  杜瑞卿  王永勤 《安徽农业科学》2011,39(28):17166-17167

[目的]优化野生黄蔷薇不定芽的分化,为野生黄蔷薇的组织培养与离体快繁提供技术参考。[方法]利用均匀设计试验,采取不同的影响因素对野生黄蔷薇不定芽进行诱导分化,并对结果进行了通径分析。[结果]影响分化率（Y）的3个因素的最佳理论组合水平是：6-BA（X1）1.0mg/L,NAA（X2）0.50mg/L,CPPU（X3）0.3mg/L,重要性依次为NAA〉6-BA〉CPPU,标准回归方程为Y=0.6195X1＋0.5686X2-0.3628X3,具有统计学意义。[结论]均匀设计方案与通径分析在优化野生黄蔷薇不定芽分化方面的应用是成功的,值得在植物组织培养方面推广应用。  相似文献   

油菜菌核病防治技术研究     

庄义庆  王琴  侯绪波  陈跃荣  王国平  王永勤 《农业装备技术》1996,(1)

油菜菌核病防治技术研究镇江市植保站庄义庆丹徒县植保站王琴，侯绪波，陈跃荣，王国平，王永勤过去，对油菜菌核病的防治对策，一直是提倡油菜初花期喷细雾防治，但实践证明，采用此对策，不能有效地控制病害的发生和危害。因此，有必要全面研究其防治技术，改进和完善防...  相似文献   

鲜枣采后生理及贮藏研究进展   总被引：23，自引：0，他引：23  

王春生  李建华  王永勤  赵猛 《果树学报》1999,16(3):219-223

枣（ZizyphusjujubaMill．）原产中国。鲜枣富含维生素C,营养价值高,果实一经变软,维生素C几乎全部被氧化。鲜枣果实具有独特的采后生理特点,贮藏保鲜难度较大。综述了80年代以来国内外在鲜枣采后生理包括果实形态、呼吸类型、内源激素、软化机理及营养成分变化等方面的研究进展,介绍了影响鲜枣贮藏寿命的外界因子及内在因素。  相似文献