噬菌体展示技术及其在抗原表位筛选中的应用     

陈启伟  王永录 《畜牧与兽医》2009,41(6)

噬菌体展示技术(Phage display technology)是以噬菌体或噬菌粒为载体,使外源肽或蛋白基因与噬菌体表面特定蛋白基因在其表面进行融合表达,进而通过亲和富集法筛选表达有特异肽或蛋白质的噬菌体,此技术现已被广泛应用于生命科学的许多领域。本文主要介绍了噬菌体展示技术的原理,并就噬菌体表面展示系统的不同类别的表达载体分别做了描述,同时阐述了该展示技术在抗原表位研究中的应用。  相似文献   

母源抗体对猪口蹄疫疫苗免疫应答的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

高世杰  窦永喜  程爱华  王永录  邓光明  才学鹏 《中国兽医学报》2011,31(1)

用液相阻断ELISA(Liquid phase blocking ELISA,LPB-ELISA)和正向间接血凝(Indirect hemagglutination test,IHAT)2种血清学试验方法对规模化饲养猪群仔猪的口蹄疫母源抗体、母源抗体的传递途径、消长规律、母/仔代特异抗体相关性及母源抗体对口蹄疫疫苗免疫的影响进行了研究和分析。结果表明,2种血清学方法均没有从未吸吮初乳的新生仔猪中检出特异抗体;在吸吮初乳后的仔猪血清中可检出特异性抗体,并于10日龄左右抗体效价升至峰值,而后随着日龄的增加,特异性抗体的效价呈明显的线性下降,母源抗体半衰期约为10～20d,至45～60日龄母源抗体效价降至不完全保护带(lgX<1.8)或更低;仔猪母源抗体水平与母体特异抗体水平呈正相关。通过对不同日龄仔猪接种口蹄疫疫苗后抗体水平检测发现,仔猪体内较高水平的母源抗体对疫苗免疫应答具有明显或一定的负面影响。  相似文献   

猪圆环病毒同义密码子的使用模式及其影响因素     

牟一娇  吴润  王永录 《安徽农业科学》2013,41(1):149-151

[目的]揭示猪圆环病毒(PCV)基因组的进化特点和遗传多样性。[方法]通过计算PCV基因组的相对同义密码子使用频率(RSCU)、有效密码子数目(ENC)和核苷酸含量等指标,对PCV基因组的密码子使用模式进行了综合分析。[结果]PCV基因组具有较低的GC含量和低的密码子偏好性,不同基因型的PCV在密码子使用上具有显著差异,并且PCV与圆环病毒科中的其他病毒的密码子使用模式也存在差异。PCV与其宿主的密码子使用模式存在一定程度的相似性。此外,地理因素、蛋白质总的平均疏水性和芳香性等可能与PCV的密码子使用模式的形成有关。[结论]PCV基因组的密码子使用模式的形成是突变压力与自然选择相互作用的结果。该研究对阐明PCV的密码子使用规律以及分子进化过程提供了最新的信息。  相似文献   

质谱技术在抗原表位研究中的应用     

刘新生  王永录 《江西农业学报》2010,22(5):152-154,166

综述了质谱技术的原理及其发展概况,并阐述了该技术在抗原表位研究中的应用现状和前景。  相似文献   

白细胞介素-2免疫增强作用的研究     

于康震  郑永辉  王永录  李节棠 《中国预防兽医学报》1991,(6)

用白细胞介素-2(IL-2)体外诱导培养小鼠脾细胞制得的淋巴因子活化的杀伤(LAK)细胞对SP2/0、NS-1骨髓瘤细胞、P815肥大细胞瘤细胞及BW5147胸腺瘤细胞都具有杀伤作用,其杀伤率分别为35％、40％、45％和32％。证明IL-2可通过诱导LAK细胞而发挥抗肿瘤作用。IL-2和M5-y_(90)布鲁氏菌疫苗联合免疫鼠与疫苗单独免疫鼠相比,前者的抗布鲁氏菌抗体效价比后者高58～128％;前者的白细胞总数显著高于后者(31～83％);前者的细胞在淋巴细胞中的比例也比后者高10％。证明IL-2是一种潜在的免疫佐剂。  相似文献   

基于猪流行性腹泻病毒变异毒株重组全长S2蛋白IgA抗体ELISA检测方法的建立及应用     

牟一娇  于瑞明  张莉萍  王永录 《中国畜牧兽医》2023,(3):1185-1194

【目的】建立一种猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的IgA抗体ELISA检测方法。【方法】以PEDV流行株CH/HNPJ/2017(MF152604.1)为生物材料,通过RT-PCR扩增出S2基因(2 368—4 170 bp),并将其插入到原核表达载体pET-24a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG诱导表达,经镍柱纯化。Western blotting验证重组蛋白S2与PEDV阳性血清的反应原性和特异性。将其作为包被抗原,建立一种基于PEDV变异毒株重组全长S2蛋白的IgA抗体ELISA方法,用棋盘法确定该方法的最优检测条件,对其敏感性、特异性和重复性进行测定,并初步应用于130份猪血清和40份猪口腔黏液的检测。【结果】通过RT-PCR方法扩增出S2基因,成功构建重组表达载体pET-24a-S2,转化大肠杆菌经诱导表达纯化后获得重组S2蛋白。SDS-PAGE结果显示,纯化的S2蛋白条带特异且无杂带;Western blotting试验表明该蛋白与PEDV阳性猪血清具有良好的反应性。ELISA方法反应条...  相似文献   

口蹄疫病毒3D聚合酶B细胞表位的筛选鉴定     

张昱  王永录  张永光  潘丽  方玉珍  刘力宽  蒋守田  吕建亮  张中旺  张淑刚  李正丰  杜进鑫 《华北农学报》2009,24(3)

以口蹄疫病毒株AFT2 RNA为模板,反转录并扩增3D聚合酶基因,PCR纯化产物与pGEM-T easy载体连接并转化JM109菌株,对经凝胶电泳、PCR和EcoRI酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序,通过序列比对获得AF72 3D聚合酶的核苷酸序列和推导氨基酸序列,综合分析3D聚合酶的亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数,预测其潜在B细胞抗原表位并人工合成表位肽段,利用间接ELISA对潜在表位进行筛选鉴定,结果显示,表位3D2和3D4为病毒株AFT2 3D聚合酶的优势B细胞表位,该结果将为进一步的FMDV多表位疫苗研究奠定基础.  相似文献   

口蹄疫A型病毒AF/72株标准细胞毒株的研制   总被引：1，自引：0，他引：1  

杜进鑫  王永录  张永光  方玉珍  蒋守田  吕建亮  潘丽  刘力宽 《华北农学报》2009,24(3)

用口蹄疫A型病毒AF/72株的第3代乳鼠组织毒,通过乳鼠继续适应3代后,转适BHK-21细胞,获得该毒株的细胞毒AF/72/MF6/BF12,经测定其TCID50为10-8.0/mL;经RT-PCR获得其VPI基因序列,并与GenBank中的其他6株口蹄疫A型病毒株比对,同源性均大于85%;经无菌检验和外源病毒检验,纯净性达到兽用生物制品标准要求;经间接夹心ELISA测定,OD值均大于0.2,且该毒仅能被口蹄疫A型标准血清中和,具有型特异性;经紫外分光光度法测定其146S含量,均值为189 ng/mL,远大于22 ng/mL的国际标准.综合纯净性检验结果、特异性检验结果和146S含量,确定AF/72/MF6/BF12为口蹄疫A型病毒株AF/72的标准细胞毒.  相似文献   

转亚洲Ⅱ型口蹄疫病毒VP1基因烟草研究     

王文秀  顾节清  陈德坤  邓文  潘丽  王宝琴  王永录  张永光 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2007,(1)

将亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒结构蛋白VP 1基因克隆到植物表达质粒pB in438中,构建了植物表达载体pB in-VP 1,通过根癌农杆菌叶盘转化法,将亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒结构蛋白VP 1基因导入NC 89烟草基因组中,对经卡那霉素筛选获得的20株抗性植株,进行PCR和RT-PCR检测。结果表明,抗性烟草植株中已整合了VP 1基因。  相似文献   

江淮地区棉花铃病的防治技术     

王永录 《现代农业科技》2004,(6):13

棉花铃病是指侵染棉铃造成危害的多种病害的通称,一般又叫烂铃.其中最重要的病害是棉花疫病,其次还有其他10余种由各种病原危害的铃病.江淮流域棉区雨水多,湿度大,容易发生烂铃.尤其是秋雨连绵,田间湿度增高,烂铃现象更为严重,受害轻的可造成棉铃脱落或僵瓣,形成烂铃,受害严重的,可严重影响棉花的产量和品质.  相似文献