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牛O—A型口蹄疫双价灭活苗研究：效力试验和最小免疫剂量试验 总被引：5，自引：1，他引：4
用制备的６批牛Ｏ－Ａ型口蹄疫又价灭活疫苗对黄牛进行了安全性试验,效力和最小免疫剂量试验。结果表明：免疫牛对Ｏ型和Ａ型同源强毒攻击的近期免疫保护率分别为９１．３％和１００％;免疫后１８０ｄ时,保护率分别为１００％和９３．３％;免疫后２４０ｄ时,保护率分别为６０．０％和５０．０％。 相似文献
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用牛Ｏ型和Ａ型口蹄疫（ＦＭＤ）双价灭活苗疫免小白鼠后，通过四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色分析法检测了其病毒特异性Ｔ细胞增殖应答，相应抗原对免疫组淋巴结细胞的刺激增生作用高于未免疫对照组；通过氨基黑－１０Ｂ比色分析法检测了其致敏淋巴细胞对靶细胞的杀伤率，免疫组为１４．３％￣１５．５％，未免疫组为３．２％；通过常规毛细管法检测了白细胞移动指数（ＭＩ），免疫组为０．７５和０．７０，未免疫组为１．１３。以上 相似文献
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提取2株A型口蹄疫病毒FMDV-L1和FMDV-L2的RNA，用1对通用引物经RT-PCR扩增出2株病毒VP1基因的DNA片段，将扩增的VP1编码序列克隆到质粒载体pGEM-T Easy中，转入大肠埃希氏菌JM109，得到大量携带目的基因的质粒；经过重组质粒的鉴定、测序获得其核苷酸序列；利用序列分析软件及系统发生树绘制软件对FMDV—L1和FMDV-L2以及作为参考毒株的A22／India／17／77进行序列分析。结果表明，核酸序列中的变异多发区要多于氨基酸序列，氨基酸序列最明显的变异发生在构成FMDV抗原位点1的βG-βH环内，其中毒株FMDV-L1和FMDV-L2 RGD序列中的精氨酸(R)发生了变异，分别变成了亮氨酸(L)和谷氨酰胺(Q)。 相似文献
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近年来,动物转基因技术得到了迅猛的发展,在病毒的研究中得到了广泛的应用,并取得了显著的成果。随着该技术的不断完善,它将在病毒学研究中发挥越来越重要的作用。本文综述了动物转基因技术的发展及研究方法,并介绍了该技术在病毒研究中的应用。 相似文献
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提取亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒总RNA，用特异性引物通过RT—PCR反应获得了约750bp的核酸片段，将其与pGEM—T Easy载体连接，并转化大肠埃希氏菌JM109。重组质粒经PCR、酶切鉴定及测序，证明所克隆的片段含有完整的VP1基因；将重组质粒与表达载体pcDNA3．1( )分别用Barn HⅠ和Eco RⅠ双酶切后连接，构建成重组表达质粒，转化宿主菌DH5α，筛选阳性克隆。测序结果证明，目的基因正确插入到表达载体中，命名为pcDNAV；用同样方法将IL-18基因插入pcDNAV中，命名为pcDNAVI。用pcDNAVI免疫豚鼠，2周后加强免疫1次，每周用ELISA检测豚鼠血清中的抗体水平。结果表明，pcDNA VI可引发机体产生体液免疫。 相似文献
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FMDV结构基因P1的克隆与植物双元表达载体的构建 总被引：2，自引：0，他引：2
通过RT-PCR法获得阿克苏(Akesu/O/58)FMDV结构基因P1,将该基因克隆到pGEM-T Easy载体进行核苷酸序列测定。将P1基因、Kozak序列等插入中间表达质粒pB in438,构建重组中间表达载体pB inP1。采用三亲融合法构建植物双元表达载体pB inFMDV-P1。结果表明:P1基因为2 208 bp。重组中间表达载体pB inP1经BamHⅠ/SalⅠ双酶切、PCR扩增和序列测定,表明P1基因、Kozak序列等已插入pB inP1。在含50mg/L卡那霉素、25 mg/L链霉素和50 mg/L利福平的YEB培养基上筛选及对融合农杆菌质粒进行P1基因的PCR检测,证明植物双元表达载体pB inFMDV-P1构建正确。 相似文献
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通过限制性酶切位点将P12A和3C基因插入到带有双启动子(Pp10和PPH)的杆状病毒表达载体p Fast BacTMDual,转化E.coli DH10感受态细胞进行蓝白斑筛选,将鉴定正确的重组杆状病毒质粒转染Sf9细胞后收获重组杆状病毒r Bac-Dual-P12A3C,通过间接免疫荧光(IFA)和蛋白质印迹(Western-blot)检测衣壳蛋白的表达。IFA结果表明表达产物能够被A型FMDV猪抗阳性血清所识别,鉴定正确并具有良好反应原性。Western-blot检测到81 k D(P12A)、57 k D(VP0+VP3)、47 k D(VP3+VP1)、33 k D(VP0)和24 k D(VP1/VP3)5条蛋白条带,与预期相符。该研究为进一步研究A型口蹄疫病毒空衣壳的体外组装提供了试验依据。 相似文献
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免疫是预防口蹄疫的重要理论基础,研究动物机体针对口蹄疫的免疫机理,寻求预防口蹄疫的技术途径,为疫苗研制提供技术支撑。本文主要研究口蹄疫的体液免疫,细胞免疫以及细胞因子在预防口蹄疫方面的重要机理,以及各种口蹄疫疫苗在免疫学方面的优缺点,以便为最大程度的利用其免疫优势,为口蹄疫新苗的设计和防控提供理论依据。 相似文献
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