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951.
旨在克隆山羊载脂蛋白E(Apolipoprotein E,APOE)基因序列并进行生物信息学分析,明确APOE基因在山羊各组织及分化前后脂肪细胞中的表达模式,利用RT-PCR及3′RACE方法克隆山羊APOE基因序列,利用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qPCR)方法检测该基因在山羊心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脂肪等13个组织中的表达水平以及在皮下前体脂肪细胞成脂分化过程中的表达变化情况。结果表明,RT-PCR方法获得山羊APOE基因序列970 bp,其中ORF 951 bp,5′UTR 7 bp,3′UTR 12 bp(GenBank登录号:MN049956);3′RACE法获得3′UTR 152 bp(登录号:MN049957);Targetscan和Mirbase预测得知miR-22-3p可能靶标山羊APOE基因;蛋白预测显示山羊APOE编码316个氨基酸,是一个具有信号肽、无跨膜结构域的不稳定酸性蛋白;亚细胞定位结果发现APOE在细胞外、细胞质、液泡、细胞核以及内质网中均发挥生物学作用;进化树显示该基因在各物种的同源性较高,与绵羊、藏羚羊和牛的亲缘关系最近;基因组织表达谱显示山羊APOE在皮下脂肪中的表达量最高,极显著高于其他组织(P0.01);时序表达结果显示随着皮下前体脂肪细胞分化的进行,APOE基因表达呈上升趋势且在诱导分化60 h时表达量最高。结果为最终进一步揭示APOE基因在脂肪细胞分化、脂肪沉积及脂质代谢中的作用提供了基础理论数据。 相似文献
953.
954.
以番茄品种"嘉信金骊娜"为试验材料,分别在种子期、幼苗期、种子期和幼苗期用浓度为0. 029 mol/L的Sulfanili Acid和0. 028 mol/L的ASA对番茄幼苗进行诱导处理,以研究Sulfanili Acid和ASA对番茄病毒病的诱导抗性。结果表明:诱导物Sulfanili Acid的3个处理与对照的相对免疫效果分别为51. 46%、63. 34%和49. 62%,诱导物ASA的3个处理与对照的相对免疫效果分别为66. 62%、75. 56%和77. 66%;对发病后不同时间与其病情指数的回归方程进行计算,各处理的初始病情指数和病情增长速率均低于各自对照,其中种子期和幼苗期都用诱导物ASA处理过的植株初始病情指数最低,为0. 618%,且病情增长速率最慢,为1. 940%。 相似文献
956.
PNPLA3蛋白属于patatin样磷脂酶家族,能够参与脂肪积累和脂肪动员,且该蛋白与肝脏炎症、肝纤维化密切相关。本研究旨在克隆PNPLA3基因序列并进行生物信息学分析,以简州大耳羊为实验对象,屠宰后,采集皮下脂肪组织,Trizol法提取组织总RNA,利用RT-PCR法克隆山羊PNPLA3基因序列,对所获得的序列进行生物信息学分析。结果显示:克隆得到山羊PNPLA3基因序列1564 bq(GenBank登陆号:MN643056),其中CDS区1344bp,5'UTR234bp,3'UTR49bp,编码447个氨基酸残基;山羊PNPLA3氨基酸序列与绵羊(Ovis aries)、牛(Bos taurus)、大鼠(Rattus norvegicus)、小鼠(Mus musculus)和人(Homo sapiens)的氨基酸序列相似性分别达到83.89%、81.21%、56.38%、56.15%、58.42%;山羊PNPLA3蛋白与绵羊亲缘关系最近,而与原鸡(Gallus gallus)的亲缘关系较远;山羊PNPLA3蛋白为疏水性酸性蛋白,大部分由α螺旋和无规则卷曲构成,分别占比44.07%、39.6%,有18个丝氨酸、3个苏氨酸、3个酪氨酸磷酸化位点,无信号肽剪切位点,有2个跨膜结构域,具有1个PNPLA家族同源结构域,STRING数据库检索到PNLIP、PNPLA2、LIPC、PNLIPRP3等蛋白可能与PNPLA3蛋白存在相互作用关系。本实验成功克隆出山羊PNPLA3基因,为进一步阐明PNPLA3基因在调控山羊脂质代谢中的作用及分子机制提供基础资料。 相似文献
957.
958.
在西气东输二线管道工程中,首次大规模使用建筑模块化设计方法,全面提升了站场建筑设计水平,保证了设计质量与工程进度。论述了模块化设计的基本概念,模块化与标准化的关系,以及建筑模块化设计需要解决的问题。介绍了管道站场的建筑特点,包括站场类型多,工程规模大;站场环境多变,设计条件复杂;站场需求增加,设计要求提高;建筑功能复杂,设计协调量大。应用模块化设计方法,首先将站场建筑单体按功能划分为办公性建筑模块和生产性建筑模块两大类,然后按需求进行二级模块的划分,最后进行房间模块的细分,其遵循的基本原则是以少变应对多变,以简单应对复杂,以集成应对分散。针对目前存在的问题,提出了持续改进设想:优化建筑设计模块、改进模块连接设计及研发新技术模块等。 相似文献
959.
为建立CpTI基因定性PCR检测方法,通过数据库查询和测序获得CpTI基因序列,设计特异性定性PCR引物,对引物、PCR反应条件和反应体系进行优化,并对检测方法的特异性、灵敏度等进行分析试验。结果表明,CpTI基因特异性定性PCR检测方法选择退火温度为58℃,引物浓度为0.4μmol/L较好,该方法能够特异性检测样品中CpTI基因,检测灵敏度达0.05%(质量比)。该方法符合农业转基因生物产品成分检测标准对特异性、灵敏度、重复性的要求,可为抗虫转CpTI基因植物生物安全管理提供技术支撑。 相似文献
960.