一株产低温碱性蛋白酶嗜冷海洋细菌YS-9412-130的分离和培养条件研究   总被引：17，自引：0，他引：17  

孙谧  王跃军  张云波  洪义国  阎晓玲  陈毓桢  王春波  刘晓萍 《海洋水产研究》2000,21(4):1-5

自海水贝类中取样,经分离培养基和酪蛋白培养基复合培养,用检测蛋白酶产生水解圈和Folin-酚碱性蛋白酶活性测定相结合的方法从1000多份样品中初步筛到了产碱性蛋白酶活力高、性能优良的菌株YS－9412－130。对其初步研究结果表明,该菌只能利用有机氮源生长;在接近自然海水盐度、温度20℃、pH在7.0-9.0条件下,菌体生长和产酶较好。  相似文献   

产低温碱性蛋白酶黄海黄杆菌YS-9412-130的复合诱变原生质体选育   总被引：7，自引：0，他引：7  

王跃军  孙谧  张云波  洪义国  阎晓玲  王春波  刘晓萍 《海洋水产研究》2000,21(4):20-25

以黄海黄杆菌YS－9412－130突变株SW1－104为出发菌,在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体,对原生质体进行复合诱变,对大量再生突变株进行筛选和淡水驯化,最终获得了高产、稳定的碱性蛋白酶产生菌SW2－104,在自来水培养基中能够大量产酶,产酶活力为3910U／ml。从而解决了黄海黄杆菌YS－9412－130低温碱性蛋白酶大规模工业化生产设备和产业化区域的局限性。  相似文献   

黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶多克隆抗体的制备   总被引：3，自引：0，他引：3  

洪义国  孙谧  王跃军  张云波  郑家声  郝建华  王瑞娟  王春波 《海洋水产研究》2000,21(4):41-45

利用纯化的黄海黄杆菌海洋低温碱性蛋白酶（Marine Low-temperature Alkaline Protease,MLAP),采用背皮内多点注射和皮下组织注射免疫相结合的方法对新西兰白兔进行免疫,制备了多克隆抗体,并对多克隆抗体进行了纯化。用ELISA的方法对其效价检测表明,其效价为128000。作者所做的Western印迹实验证明了抗原抗体的结合具有高度的特异性。  相似文献   

海洋低温溶菌酶的制备及酶学性质   总被引：17，自引：0，他引：17  

王跃军  孙谧  张云波  洪义国  郝建华  刘晓萍  王春波 《海洋水产研究》2000,21(4):54-63

对一株海洋杆菌产低温溶菌酶的分离纯化及理化性质进行了研究。20℃下将菌株在含有葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨的标准海水培养基中震荡培养40h。获得活性大约为150U/ml的溶菌酶上清液。上清液经SMB-20生物型错流超滤系统浓缩、透析及CM-Sepharose-FF阳离子交换层析（  相似文献   

海洋低温碱性蛋白酶亚慢性毒理学研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

于业军  仲伟珍  房丽华  万瑞香  綦淑芬  闫凤霞  王跃军  张云波  王春波 《海洋水产研究》2000,21(4):75-86

应用大鼠经口、经皮肤亚慢性毒性试验,对海洋低温碱性蛋白酶毒理学进行研究。120只Wistar大鼠,随机分为6组：对照组,海洋低温碱性蛋白酶1.2g/kg(经口）,1.2g/kg、0.135g/kg、0.015g/kg(经皮）和1.2g/kg(经皮追踪组）,用药周期90d,追踪组增加28d观察。记录和检测大鼠的一般状况和体质量增长、脏器系数、血常规、凝血时间、肝肾功、部分血液生化和离子浓度及病理检查。结果表明,海洋低温碱性蛋白酶各组（经皮、经口）大鼠的各项指标与对照组比较均未见明显异常（P均＞0.05）,提示大鼠能耐受长期给予1.2g/kg（经皮、经口）的海洋低温碱性蛋白酶。  相似文献   

81．3％2，4-滴·嗪草酮·乙草胺乳油防除玉米田杂草效果试验     

李桂荣  王跃军 《农业科技与装备》2008,(3):37-39

为验证81．3％2,4-滴·嗪草酮·乙草胺乳油在玉米田的施用效果及其安全性,进行了田间药效试验。试验结果表明：81.3％2,4-滴·嗪草酮·乙草胺乳油对玉米生长发育无明显影响,并能有效防除5种玉米田间杂草;推荐用药量为180～320ml／667m^2。  相似文献   

扇贝超氧化物歧化酶的纯化及性质研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

王跃军  孙谧 《海洋水产研究》1998,19(2):69-75

采用加热,盐析及ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０柱层析的方法,从扇贝内脏团中分离得到一种高等电点的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）该酶由２８１个氨基酸组成,等电点为８．３０。纯酶的比活为２６１６．４Ｕ／ｍｇ蛋白,最大紫外吸收峰２７０．５ｎｍ,为Ｃｕ．Ｚｎ－ＳＯＤ,由二个亚基组成,亚基分子量为１５０００Ｄｒ。此外还研究了该酶其他的理化性质。  相似文献   

黄杆菌属中的一个新种   总被引：3，自引：0，他引：3  

孙谧  张云波  洪义国  王跃军  邱秀宝  董美娜  桑玉泉  王春波 《海洋水产研究》2000,21(4):6-13

由海产贝类中分离到一菌株YS-9412-130,为革兰氏阴性短杆菌、末端圆、有鞭毛、不能滑行运动、大小为0.4～0.7μm×1.0～1.5μm,裂殖生殖,不生成芽孢,胞内无多-β-羟基丁酸颗粒。菌落光滑,黄色、半透明,边缘完整。其色素无荧光,含类胡萝卜素,其正己烷提取液经光谱测定最大吸收峰为450nm。该菌生长的温度范围为0～25℃,最适为18～22℃,最高25℃(在25℃生长极弱或几乎不生长)。此菌株于pH7.0～9.0能生长,最适pH为7.5,耐6％NaCl,80μg／m1的链霉素或80μg/ml的氨卞青霉素。YS-9412-130菌株为好气菌,严格的有氧呼吸代谢,过氧化氢酶、氧化酶阳性和磷酸酶阳性,利用多种糖、水解淀粉但不分解纤维素、琼脂和几丁质。水解干酪素、胨化石蕊牛奶最后变碱。液化明胶试验阴性,还原硝酸盐;不产H2S和吲哚;MR和V．P．试验阴性;YS-9412-130菌株DNA中G+C含量为32.2mol％。该菌株的特征符合黄杆菌属的特征,但与此属中的其他种比较又有显著的差别,因此将其定为黄杆菌属一新种,命名为黄海黄杆菌（Flavobacteriumyellowseasp.nov）。  相似文献   

产低温碱性蛋白酶黄海黄杆菌YS-9412-130高产菌株的选育   总被引：6，自引：0，他引：6  

张云波  孙谧  洪义国  王跃军  阎晓玲  董美娜  桑玉泉  田杰  王瑞娟 《海洋水产研究》2000,21(4):14-19

以黄海黄杆菌YS－9412－130菌株为出发株,经亚硝基胍、硫酸二乙酯、紫外线（UV）与微波（MI）复合诱变和自然选育,获得1株产低温碱性蛋白酶高产稳定的突变株YS－9412－130－SW1－104,其产低温碱性蛋白酶为出发株的16倍。在摇瓶发酵培养条件下,酶活力达2320U／ml(20℃测定）,该诱变株具有Ref^r、Str^r、Amp^r和Met^-、Lys^-标记。突变株与出发菌株在细胞形态上比较,结果表明二者没有显著差异。  相似文献   

黄海黄杆菌YS-9412-130产酶发酵条件的优化   总被引：4，自引：0，他引：4  

张云波  孙谧  王跃军  洪义国  阎晓玲  田杰  谢峰  姜展军 《海洋水产研究》2000,21(4):26-35

以产低温碱性蛋白酶的黄海黄杆菌YS－9412－130突变株SW2－104为培养菌株,进行碳源、氮源、无机盐、起始pH值、培养时间、接种量和接种龄等发酵条件的优化实验。实验结果证明,在以1％葡萄糖为碳源,以3.5％豆饼粉为氮源,无机盐：0.4%Na2HPO4、0.03%KH2PO4、0.02%MgSO4、0.1%Na2CO3、0.2?Cl2,起始pH值7.0,接种12h种龄的种子4％,20℃、250r/min的条件下在旋转摇床中培养36h,菌株产酶活性最高。  相似文献