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为了建立兔出血症病毒(RHDV)快速、敏感的检测方法。本研究利用RT-PCR技术扩增出RHDVVP60基因中201bp的保守序列,并克隆到p MD18-T载体中作为标准品制作标准曲线,建立了RHDV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达6×101拷贝,与兔水疱性口炎病毒和轮状病毒均不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性。结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床RHDV的检测。 相似文献
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84.
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将新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)SDWF2003株经10日龄SPF鸡胚增殖后,提取病毒基因组RNA,并以此为模板,RT-PCR扩增获得与F基因预期大小一致的DNA片段,亚克隆到pMD18-T载体并酶切鉴定正确后进行测序。软件分析显示:基因全长1662bp,编码553个氨基酸,裂解住点为^112R-R-Q-K-R-F^117,是典型强毒株氨基酸序列结构;此分离毒株属于基因Ⅶ型,该型F蛋白第101位、第121位特征性氨基酸残基分别是K(赖氨酸)和V(缬氨酸),而本研究分离病毒F蛋白第101位、第121位分别是Q(谷氨酰胺)和V(缬氨酸);同源性比较,与LaSota、F48E9、Ch99核苷酸同源性分别为84.4%、87.1%、98.9%,氨基酸同源性分别为88.3%、91.7%、98.4%。 相似文献
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为有效预防肠毒素性大肠杆菌(ETEC)引起的犊牛和羔羊腹泻,将PCR扩增获得的ETECK99菌毛抗原基因和人工合成的ST1基因片段,借助pUCm—T载体,构建了重组质粒pUCm-K99-ST1,从而获得了融合基因K99-ST1;使用EcoRⅠ+SalⅠ双酶切将该融合基因定向插入表达载体pET-30a中,成功构建了表达载体pET—K99-ST1,将其转入表达菌株BL21(DE3)中,经IPTG诱导,获得31ku的蛋白;Western—blotting结果显示,该融合蛋白可与K99阳性血清发生特异性反应。 相似文献
87.
海盐县稻作文化历史悠久,是全国商品粮基地县。近年来,该县工业化、城市化快速推进,耕地面积逐年减少,生产能力有所削弱,粮食产量不断下降.随着大量外来人口涌人,大量农村人口转移到城镇,粮食供应压力越来越大,粮食生产和粮食安全问题应当引起高度重视。 相似文献
88.
本研究测定了肥育秦川阉牛血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)及硷性磷酸酶(AP)活性和尿氮(UN)含量。分析了增重剂Revalor对此四项生化指标的影响及日增重与后者的相关关系,研究结果表明,埋植剂Rcvalor显苦(P<0.05)降低了秦川阉牛血清UN含量,极显著(P<0.01)提高了血清GOT活性,同时也有提高GPT活性和AP活性的趋势(P<0.1)。血清三种酶活性与增得呈正相关,血清UN含量与日增重呈负相关,但均未达显著水准(P>0.05)。 相似文献
89.
本文提出了固定家畜多个不相连锁显性性状的全同胞家系选择体制,并探讨了其育种进度,研究证明,全同胞家系选择效果全同胞家系大小N的制约。N越大,选择越准,育种进度越大,。N=1JF ,该系统体制就退化成所谓的“理想型横交固定”,此时选择效果最差“多元测交”体制的育种进度高于全同胞家系选择,但后世代间隔短,简便易行,育种成本低。选择位点越多,群体育种水平越高,不同选择体制的育种进度差异越大。 相似文献
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少用农药防治好南方葡萄病害的综合措施 总被引:1,自引:0,他引:1
海盐县地处浙江北部,属南方东部暖湿地区,年平均温度16.7℃,年降雨量多数年份1 300~1 400 mm,年日照1 700小时左右。1987年引种巨峰葡萄,尔后每年均引入新品种。根据当时总结的经验,葡萄防病7天左右用一次药,雨后必用药,多药混用。频繁使用农药,不但使生产成本增高,果实农药污染较重,而且黑痘病、灰霉病和炭疽病等主要病害仍控制不住,每年均受到一定的损失。我们在认真总结1987—1993年病害发生规律和病害防治经验教训的基础上,从1994年开始,在海盐县农业 相似文献