高效毛细管电泳法同时分离氟喹诺酮类和磺胺类药物的研究     

邵黎  檀华蓉  祁克宗  王艳红  李慧 《中国饲料》2008,(16)

采用高效毛细管电泳建立3种氟喹诺酮类与5种磺胺类药物同时分离的方法,研究了缓冲液离子浓度、pH、有机添加剂以及分离电压、温度等电泳参数,最终通过正交实验得到了最佳分离条件:紫外检测波长262 nm,缓冲液为40 mmol/L磷酸氢二钠-20 mmol/L柠檬酸,pH 8.47,电压为22 kv.结果表明,8种药物在9 min内完全分离,且各组分浓度与峰面积呈良好的线性关系,r为0.999～0.9995.RSD为0.44%～1.15%(迁移时间)和1.12%～2.32%(峰面积).该法快速、简便、准确.  相似文献   

禽防御素代替抗生素作为饲料添加剂的研究现状   总被引：1，自引：0，他引：1  

王海英  祁克宗  彭开松 《兽药与饲料添加剂》2008,13(5)

禽防御素是一种阳离子抗菌肽,是先天免疫的重要因子,有广谱抗菌作用。对畜禽具有促生长和治疗疾病的功能,是无毒、无害、无残留、无细菌耐药性的绿色产品,有望成为抗生素替代品在畜牧生产上发挥重要作用。对禽防御素的特性、作用机理及存在问题作一综述。  相似文献   

氧氟沙星人工抗原的合成及鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

潘孝成  祁克宗  朱良强  涂建  张小飞  赵瑞宏 《安徽农业科学》2006,34(3):487-488,602

采用碳二亚胺法制备了氧氟沙星与牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)的结合物,通过FeCl3显色反应,紫外扫描以及动物免疫证明了人工抗原的成功合成。经紫外光谱法测定,每分子牛血清白蛋白连接的氧氟沙星分子数为11.16个;每分子卵清蛋白连接的氧氟沙星分子数为5.9个。  相似文献   

流行性肉芽肿性丝囊霉菌病研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

彭开松  樊慧敏  马倩倩  唐庆权  许晓牧  程起群  朱若林  祁克宗  万全  鲍传和 《安徽农业大学学报》2018,45(1):25-29

流行性肉芽肿性丝囊霉菌病(epizootic granulomatous aphanomycosis,EGA),俗称流行性溃疡综合征(epizootic ulcerative syndrome,EUS),是世界动物卫生组织(OIE)《水生动物卫生法典》所列的疫病,也是我国法定的二类动物疫病,目前危及4大洲20多个国家的94种咸水或淡水鱼类,造成巨大经济损失。近年国内EGA疑似病例日益增加,但由于该病原分离纯化困难,导致各界对国内是否存在该病有很大争议。通过从病原学、流行病学、病理生物学、诊断和防控等角度对EGA进行综述,期望有利于该病的研究和控制。  相似文献   

中西药综合治疗波尔山羊痘     

江龙海  祁克宗  王朝良 《当代畜牧》2006,(10):16-17

<正>山羊痘又名山羊“天花”,是由山羊痘病毒引起的山羊的一种急性、热性、接触性传染病。该病具有全年四季流行特点,但一般以春秋两季为多发生季节,常呈地方性流行或广泛流行。主要传染源为病羊和潜伏期感染羊,病羊主要通过脱落的痂皮、  相似文献   

鸡cGAS基因的克隆、表达特性分析及FAdV-4感染前后亚细胞定位变化     

曹影丽  刘琪  柴震震  杨侃侃  梁月巧  宋祥军  邵颖  涂健  祁克宗 《江苏农业学报》2023,(2):453-460

cGAS作为一种新型的胞质DNA受体，在宿主抵抗DNA病毒而触发的天然免疫中起着至关重要的作用。血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)是无囊膜的一种双链DNA病毒，可引起鸡肝炎-心包积液综合征。为明确鸡cGAS(chcGAS)基因功能，探究在鸡肝癌(LMH)细胞中过表达chcGAS以及FAdV-4感染前后细胞定位的变化情况。本研究针对chcGAS序列设计引物进行PCR扩增，并分析该基因序列与其他物种之间的同源性以及预测该基因的结构域，构建重组质粒pET-32a-chcGAS进行原核表达，通过SDS-PAGE和Western blot鉴定，利用激光共聚焦观察FAdV-4感染LMH细胞前后chcGAS细胞定位变化。结果表明，本试验克隆得到大小为1 317 bp的chcGAS基因，与其他物种同源性为50.5%～84.4%,SDS-PAGE分析结果显示，chcGAS蛋白主要以可溶性蛋白质的形式在上清液处表达，目的蛋白质相对分子质量为75 000,与预期大小相符。亚细胞定位结果显示，FAdV-4感染可导致定位于细胞核膜上的chcGAS蛋白转移到细胞...  相似文献   

ETT2结构基因epaPQR对禽致病性大肠杆菌生物学特性及致病性的影响     

邵颖  傅丹丹  吴晓妍  谷一  宋祥军  涂健  祁克宗 《畜牧兽医学报》2022,53(10):3631-3641

大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2（Escherichia coli type III secretion system 2，ETT2）参与禽致病性大肠杆菌（avian pathogenic Escherichia coli，APEC）的致病作用。本研究旨在探究ETT2结构基因epaPQR对禽致病性大肠杆菌的生物学特性及致病作用的影响，为进一步阐明ETT2的致病机制提供依据。基于CRISPR-Cas9基因编辑技术，构建epaPQR基因缺失株和回复株，通过生长曲线测定、运动性和生物被膜形成能力等试验，分析epaPQR基因对APEC生物学特性的影响；通过血清杀菌与组织载菌量等试验分析epaPQR基因对APEC致病性的影响。结果表明，成功构建ETT2结构基因epaPQR基因缺失株和回复株，epaPQR基因缺失后，其生长能力和生物被膜形成能力并没有显著改变（P>0.05）；但epaPQR基因缺失后，其运动能力显著降低（P<0.05），在透射电镜下观察到缺失株鞭毛数量明显减少，通过荧光定量PCR发现，鞭毛T3SS结构基因及鞭毛输出蛋白基因的转录水平均显著下调（P<0.05）。epaPQR基因缺失后其抗血清杀菌能力显著增强（P<0.05），缺失株AE81ΔepaPQR在雏鸡体内不同器官的定殖能力显著降低。结果说明，ETT2结构基因epaPQR参与调控APEC的鞭毛形成，影响APEC抗血清杀菌能力以及在体内组织器官的定殖能力，表明epaPQR在APEC致病过程中发挥重要作用，本研究为深入探究ETT2功能和APEC致病机制提供参考。  相似文献   

鸡DDX41基因克隆表达、细胞定位及其在禽腺病毒4型感染调控天然免疫中的作用          下载免费PDF全文

刘琪  曹影丽  魏宁波  杨侃侃  梁月巧  宋祥军  邵颖  涂健  祁克宗 《浙江农业学报》2023,(5):1028-1036

为获得鸡DDX41(chDDX41)的原核表达蛋白，探讨chDDX41的细胞定位及其在禽腺病毒4型(FAdV-4)感染引起的天然免疫中的作用。根据GenBank中chDDX41基因序列，设计特异性引物，以LMH细胞cDNA为模板扩增，将扩增序列连接至pET-32a、pCAGGS-HA、pCMV-3×Flag和pmCherry-C1空载体，构建重组质粒。将pET-32a-chDDX41转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中，经IPTG诱导表达。利用激光共聚焦显微镜观察chDDX41在鸡肝癌细胞(LMH)和鸡巨噬细胞(HD11)中的亚细胞定位；利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测在LMH细胞中过表达chDDX41对IFN-β等细胞因子表达量的影响。结果表明，克隆得到1 854 bp的chDDX41基因，共编码617个氨基酸。SDS-PAGE结果显示，重组蛋白pET-32a-chDDX41主要以可溶性蛋白的方式在上清液中表达，经Western Blot鉴定，在90 ku左右有特异性条带，与预期结果一致；chDDX41在LMH和HD11细胞中主要定位在细胞核；FAdV-4感染过...  相似文献   

禽致病性大肠杆菌Hcp2b对雏鸡脾脏mRNA表达谱的影响     

宋祥军  宋自超  沈啸  陈哲  蒋胡艳  侯曼曼  邵颖  涂健  祁克宗 《华北农学报》2022,37(1):232-238

为研究效应蛋白Hcp2b在禽致病性大肠杆菌(APEC)感染雏鸡过程中对脾脏的转录组学影响，利用兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室构建保存的hcp2b基因缺失株Δhcp2b及回复株Chcp2b肌肉注射7日龄雏鸡(以AE17菌株为阳性对照),感染24 h后采集精神沉郁的雏鸡脾脏检测组织载菌量并制作病理切片。选取缺失株Δhcp2b及野生株AE17感染脾脏组织进行转录组学测序，采用Real-time PCR进行测序结果鉴定；而后对差异表达基因进行GO分析、KEGG通路富集分析。结果显示，野生株AE17、缺失株Δhcp2b及回复株Chcp2b在脾脏组织载菌量差异不明显。组织切片观察发现，野生株AE17和缺失株Δhcp2b脾脏均出现组织间隙扩大，有充血现象出现。转录组学分析发现，缺失株Δhcp2b感染雏鸡脾脏后，诱导了脾脏基因mRNA的差异表达，筛选到515个差异表达基因(330个基因下调表达，185个基因上调表达)。Real-time PCR结果发现，Δhcp2b感染雏鸡后，脾脏中IL22、TNFRSF6B、TNFRSF8基因mRNA表达量下调，与测序结果变化趋势一致。GO分析发现，感染2...  相似文献