犬细小病毒的分离鉴定及VP2基因的克隆分析     

易立  程世鹏  闫喜军  柴秀丽  罗国良  张海玲  王建科  赵建军 《畜牧与兽医》2008,40(4):60-63

2006年从南京疑似细小病毒感染的病犬中分离犬细小病毒一株,分离的病毒培养物能凝集猪红细胞,凝集效价达到128倍,并能被已知的犬细小病毒阳性血清所抑制。其衣壳蛋白基因VP2被克隆并测序,核酸、氨基酸序列同源性分析表明:血清型为CPV-2b。通过软件对其氨基酸序列分析,预测VP2区域可能的B细胞表位分别为:5-30,300-320,360-380,380-400,400-420区段,这为犬细小病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础。  相似文献   

犬细小病毒VP2蛋白的表达及间接ELISA方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

易立  程世鹏  王建科  柴秀丽  罗彬  张海玲  吴威  闫喜军 《中国兽医学报》2010,30(8)

以犬细小病毒(Canine parvovirus virus,CPV)VP2基因的原核表达产物为抗原建立检测CPV抗体的间接ELISA方法.在分析CPV VP2基因稀有密码子(大肠杆菌系统)的基础上,克隆去除5'和3'端的稀有密码子的VP2基因,构建了VP2蛋白原核表达载体pET28a-VP2和pET32a-VP2,利用HIS标签对融合表达产物进行纯化.经SDS-PAGE和Western-blot检测证实该基因获得表达,并存在低相对分子质量产物,其中纯化后的pET28a-VP2具有良好的免疫学活性.以pET28a-VP2蛋白为基础,建立检测VP2抗体的iVP2-ELISA方法:抗原包被质量浓度为17.8 mg/L,血清最佳稀释度为1:20,阳性判定标准初步定为:待测样品D值>0.367,且待测样品D值/阴性样品D值>2.0.采用iVP2-ELISA对20份背景清晰的犬血清样品进行检测,结果显示,iVP2-ELISA与HI试验的阴阳性符合率一致,但不呈现正比关系.本试验为犬场CPV抗体水平检测和进行CPV流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法.  相似文献   

水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)血清学效力检验及与靶动物免疫保护相关性研究     

冯二凯  易立  施鹏飞  尹茉莉  罗国良  王振军  陈立志  程世鹏  郭利  程悦宁 《黑龙江畜牧兽医》2020,(10):128-131

  相似文献   

水貂犬瘟热活疫苗与水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗制备及其联合免疫效果研究     

罗国良  王振军  冯二凯  易立  郭利  程悦宁  程世鹏  王守富  王宏正  张洪亮 《特产研究》2019,(1)

制备了水貂犬瘟热活疫苗(以下简称犬瘟活疫苗)与水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗(以下简称肠炎灭活苗)各3批,通过半成品及成品检验结果显示,生产的2种疫苗合格且生产工艺稳定。通过采用肠炎灭活苗稀释犬瘟活疫苗,实现2种疫苗联合(简称联合疫苗)后,体外接种Vero细胞,采用专用稀释液稀释的犬瘟活疫苗作对照,在25℃存放条件下,5 h内两者的犬瘟热病毒含量无明显差异,表明该方法对犬瘟热病毒的存活无明显影响。将联合疫苗免疫水貂10只,犬瘟活疫苗、肠炎灭活苗分别免疫10只水貂作为单苗对照组,免疫后21 d采血,测定3组的抗体水平,联合疫苗组的犬瘟热病毒中和抗体和细小病毒HI抗体分别与对应单苗的抗体水平无明显差异,表明联合疫苗具有与单苗相当的免疫效力。该研究为进一步研发水貂犬瘟活疫苗与肠炎灭活苗联苗奠定了基础。  相似文献   

水貂奇异变形杆菌的分离鉴定及16S rRNA基因序列分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

王建科  程悦宁  易立  赵航  林鹏  仝明薇  程世鹏 《中国畜牧兽医》2015,42(4):852-858

从辽宁某貂场发病水貂中分离到1株致病菌,命名为PMSD株,通过形态学观察和生化试验等常规鉴定发现符合奇异变形杆菌特性,进一步经VITEK 2Compact 30全自动细菌鉴定及药敏分析系统鉴定该株细菌为奇异变形杆菌。药敏试验结果显示PMSD株对氨基糖苷类药物、喹诺酮类药物等敏感,而对β-内酰胺类药物和磺胺类药物等不敏感。以细菌16SrRNA基因为模板应用通用引物进行PCR扩增,得到PMSD株的16SrRNA基因序列,长约1 504bp,提交到GenBank中,登录号:KM229530。将该序列与GenBank中序列进行BLAST比对,结果发现与其匹配度最高的均是奇异变形杆菌各株系的16SrRNA序列,均高达99%以上。选取其中前20株作为参考序列,运用生物学软件构建系统发育树并进行同源性比对,结果表明,分离菌PMSD株与20个代表菌株的同源性为98.9%~99.7%,其中与BB2000株、HI4320株、B1株和FCC141株同源性最高,为99.7%。本研究为预防和控制奇异变形杆菌引起的水貂疾病奠定了一定的基础。  相似文献   

水貂阿留申病诊断方法的研究进展     

肖家美  程世鹏  赵艳 《特产研究》2007,29(2):70-72

综述了水貂阿留申病诊断方法的研究进展,为有效检测水貂阿留申病提供可靠的理论依据,将有利于水貂养殖场对水貂阿留申病的防制工作。  相似文献   

狐貉犬瘟热病综合诊断技术研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

程世鹏  吴威 《特产研究》1999,(2):40-41

本项研究依据临床示病病状结合膀胱粘膜包涵体检查确诊犬瘟热病，具有快速、简便和准确等特点。  相似文献   

布鲁菌感染早期抗免疫机制研究进展     

周玉成  张海威  程世鹏  杨艳玲 《动物医学进展》2019,40(1):88-93

布鲁菌引起的布鲁菌病在我国被列为二类动物疫病之首。虽然宿主本身具有复杂的免疫机制,用以抵御病原体,并保持宿主抗性和布鲁菌毒力之间的平衡,但布鲁菌作为一种成功的细胞内病原体,已经进化出多种策略来逃避免疫应答并在宿主内建立持续感染和繁殖。论文将从布鲁菌的毒力因子、布鲁菌在先天性免疫和适应性免疫系统中隐身策略,以及布鲁菌调控并抑制细胞凋亡、布鲁菌微小RNA(mircoRNA)在宿主免疫应答中的研究进展等方面进行综述,为了解布鲁菌病发病机理、开发新型疫苗和治疗布鲁菌病提供参考。  相似文献   

我国毛皮动物主要传染病防控现状及防控建议     

程悦宁  易立  司方方  王建科  程世鹏  钱爱东 《经济动物学报》2013,17(1):49-54

文中对我国毛皮动物主要传染病流行特点和防控现状进行了概述,总结了毛皮动物传染病防控制剂研究现状,并提出了毛皮动物传染病防控建议。  相似文献   

犬瘟热病原学研究进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

程世鹏  易立 《特产研究》2009,31(1):59-62

概述了犬瘟热病原学和犬瘟热病毒生物学特性的研究进展,为毛皮动物犬瘟热疫苗研制和预防控制犬瘟热的发生提供了理论基础。  相似文献