基于酿酒酵母的多片段质粒的构建     

汤雅萍  程毅  王吐虹  陈佳  高春生  郭利桃  宋志强  唐超  严准  李智敏 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2023,49(4):421-427

为避免现有的多片段质粒构建技术的弊端,提高多片段质粒构建效率,以构建树干毕赤酵母Agglutinin-like基因的敲除载体为例,利用酿酒酵母活体细胞重组系统,一次性将多个外源DNA片段和线性化质粒重组,形成环状质粒。通过引物设计在相互连接的DNA片段之间引入50bp重叠序列,用PCR扩增DNA片段后,与线性化质粒一起转化酿酒酵母,再用PCR和测序等方法鉴定阳性酵母菌落中质粒的正确性。通过本方法构建的多片段质粒正确率高、耗时短。  相似文献   

静原鸡ELOVL2基因遗传多态性研究     

母童  顾亚玲  赵平  冯小芳  陈佳萍  陈亚飞  刘丽元  蒋秋斐  张娟 《中国畜牧兽医》2018,(3)

为了探讨静原鸡极长链脂肪酸延伸酶蛋白2(elongation of very-long-chain fatty acids 2,ELOVL2)基因的遗传特性,确定核苷酸的变异位点,本研究采用PCR-SSCP及DNA测序技术对静原鸡ELOVL2基因进行多态性检测。结果显示,静原鸡ELOVL2基因外显子6无多态性,内含子2和6呈中度多态。在ELOVL2基因内含子2扩增片段上共检测到5种基因型:A_2A_2、B_2B_2、C2C2、D2D2和A_2C2,4种等位基因:A_2、B_2、C2和D2,其中A_2为优势等位基因(0.62),A_2A_2基因型为优势基因型(0.54);3个SNPs位点:g.63372228+4918GA的转换、g.63372228+5024TC的转换和g.63372228+4928CA的颠换。在E2e6I6扩增片段上共检测到3种基因型:A_1A_1、B_1B_1和A_1B_1,2种等位基因:A_1和B_1,其中A_1为优势等位基因(0.67),A_1A_1基因型为优势基因型(0.54),等位基因B_1存在g.63388000+748GC的颠换。群体遗传学分析发现,静原鸡ELOVL2基因内含子2、6遗传纯合度均较高,且偏离了Hardy-Weinberg平衡(P0.05)。本研究结果表明,静原鸡ELOVL2基因内含子2和6序列突变较高,且呈中度多态,表现出纯合子优势,外显子6上无突变。  相似文献   

超声波破碎辅酶Q10工艺研究     

朱勇峰  柯崇榕  陈佳  杨诗颖  黄建忠 《安徽农学通报》2014,(6)

  相似文献   

苯酚/氯仿抽提法提取牛血与鸡血DNA部分条件的比较研究     

母童  陈佳萍  赵平  顾亚玲  冯小芳  陈亚飞  刘丽元  蒋秋斐  张娟 《黑龙江畜牧兽医》2018,(15)

为了探讨苯酚/氯仿抽提法中加入血液和红细胞裂解液(PBS)的量对DNA提取效果的影响以及找到针对牛血和鸡血最合适的DNA提取条件,试验以安格斯牛和静原鸡为研究对象,采用苯酚/氯仿抽提法提取血液基因组DNA。结果表明:在试验第1步加入200μL鸡血1次,用1 500μL PBS重复裂解2次,可以得到高质量鸡的基因组DNA。当加入鸡血的量过大时,提取的DNA浓度过高且不纯,蛋白质等外源核酸的污染较严重。在试验第1步加入500μL牛血1次,用1 500μL PBS裂解,重复2次,可以得到高质量牛的基因组DNA。苯酚/氯仿抽提法可以节省时间,还可以避免血液的浪费。  相似文献   

N~+注入选育产CLA乳酸菌及其发酵条件的研究     

蔡玉华  王彩玲  李有超  程曙光  高翔  陈佳  程茂基 《饲料工业》2008,29(8)

<正>共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)是一种在双键位置和几何构型上存在差异的亚油酸异构体混合物。许多研究表明,CLA的特定异构体具有促进健康的潜在功能,如抗动脉粥样硬化(Nicolos,1997)、增强免疫功能(Hayek,1999)、减肥(Park,1979)等,同时,CLA还被认为是皮肤刺瘤、乳腺瘤、结肠畸变、前列腺瘤和试验动物体内、人体乳腺癌细胞组织扩散的潜在抑制剂(Visonnean,1997)。由于CLA特有的生理作用,因此对CLA产品、富含CLA的发酵食品有潜在的市场需求。  相似文献   

乳杆菌培养物对肉鸡肠道菌群及形态的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈佳  王彩铃  程曙光  高翔  蔡玉华  程茂基 《饲料研究》2008,(6):20-23

将1 500只从肉仔鸡随机分成5组,每组6个重复,1个对照组和4个试验组,对照组肉仔鸡采食基础日粮.试验1组肉仔鸡采食添加0.2%的高产共轭亚油酸(CLA)乳酸菌日粮,试验2组肉仔鸡采食添加0.3%的高产CLA乳酸菌日粮,试验3组肉仔鸡采食添加含0.5%的高产CLA乳酸菌日粮,试验4组肉仔鸡采食添加0.6%的高产CLA乳酸菌日粮,试验期4周.结果表明,试验组可显著降低肠道中大肠杆菌和厌氧菌数量,增加肠道乳酸杆菌的数量;试验组鸡的小肠肠腺和绒毛长度均长于对照组(P<0.01或P<0.05).  相似文献   

PRRSV tGP5基因克隆及pcDNA3.1-tGP5真核表达载体的构建     

陈佳  黄娟  秦晓冰  杨瑞梅  温建新  单虎 《动物医学进展》2008,29(5):25-27

根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株ORF5基因的核苷酸序列设计一对特异性引物,用PCR扩增PRRSV GP5蛋白非中和性表位缺失的tGP5基因,将基因定向连接在真核表达载体pcDNA3.1的HindⅢ和EcoRⅠ多克隆位点之间,构建重组质粒pcDNA3.1-tGP5。转化DH5α感受态大肠埃希菌,提取质粒。重组质粒经PCR、双酶切鉴定及DNA序列测定,成功构建了pcDNA3.1-tGP5基因的重组体。  相似文献   

霉菌毒素介导的氧化应激研究进展北大核心CSCD     

陈凤鸣陈佳亿李颖慧黄兴国 《动物营养学报》2019,(9):3944-3952

霉菌毒素是霉菌生长产生的次级代谢物,其高毒性和强致癌性严重威胁动物生产性能和人类健康,给畜牧业和食品工业带来巨大经济损失,因此,研究霉菌毒素的毒性机制具有重要的意义。霉菌毒素引起机体氧化应激,继而引发细胞毒性作用,如细胞凋亡、DNA损伤等。本文综述了主要的几种霉菌毒素吸收与代谢,重点阐述了由氧化应激介导的毒性作用,以期对霉菌毒素毒性机制有更加全面认识,为从缓解氧化应激的角度解决畜禽生产中霉菌毒素问题提供理论依据。  相似文献   

花青素增强反刍动物抗氧化性能作用机制的研究     

周迪  王胤晨  田兴舟  陈佳琪  莘海亮  倪萌萌  班超  Paengkoum Pramote  吴文旋  陈胜昌  夏先林 《畜牧兽医学报》2019,(8)

花青素是植物中富含的一类水溶性天然色素,因其具有较高的安全性及极强的清除自由基的能力而备受学者青睐。本文主要综述花青素的结构和安全性,其在反刍动物中可能的消化代谢途径及增强机体抗氧化能力与缓解氧化应激的作用机制,探讨其作为反刍动物新型饲料添加剂的可行性。旨在为相关研究提供理论参考。  相似文献   

3种冷季型草坪草苗期对干旱胁迫的生理响应     

宋娅丽  王莎  王克勤  张倩  马志  陈佳钰  李珠宇 《草原与草坪》2018,(3):9-16

为研究昆明地区广泛种植的黑麦草(Lolium perenne)、高羊茅(Festuca arundinacea)和早熟禾(Poa pratensis)幼苗的抗旱性,采用盆栽控水试验方法测定了不同时间干旱胁迫下的草坪外观质量(TQ)、叶片萎蔫系数(LWS)、叶片相对含水量(RWC)、地上部分和根系生物量(Bio)3种草坪草根冠比(RS)、叶片光合速率(Pn)、叶片暗呼吸速率(R)、脯氨酸含量(Pro)、细胞膜透性(RC)以及可溶性糖含量(Sol)等生理生态指标。结果表明:随着干旱胁迫时间的持续,高羊茅的TQ、LWC、RWC、Bio和Pn降低的比例显著低于黑麦草和早熟禾,而R、Pro、RC和Sol的增加量显著高于黑麦草和早熟禾。用隶属函数法对试验测定的9个生理生态指标进行综合评价,3种冷季型草坪草幼苗抗旱性表现为:高羊茅黑麦草早熟禾。  相似文献