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根据禽多杀性巴氏杆菌psl基因序列,设计了1对引物,从猪源多杀性巴氏杆菌5:A型Ts-8株中扩增出453bp的psl基因,将其克隆到pMD18-T载体后测序。序列分析表明,该基因与禽多杀性巴氏杆菌T16株的psl基因序列只相差2个碱基,同源性高达99%;与流感嗜血杆菌编码P6蛋白的基因序列同源性为83%。猪psl基因的推导氨基酸序列与禽psl基因、P6蛋白的氨基酸序列同源性分别为100%,87%。结果表明,多杀性巴氏杆菌psl基因在猪和禽的菌株中是高度保守的,而且与P6蛋白的氨基酸序列具有较高的同源性。 相似文献
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猪胸膜肺炎放线杆菌、肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌联合检测芯片的研制及应用 总被引:3,自引:1,他引:2
本研究旨在建立联合检测胸膜肺炎放线杆菌、猪肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的DNA芯片.用7个从3种病菌基因组中扩增出的不同特异性靶DNA制作基因芯片,并对芯片的靶DNA和探针浓度、杂交温度、重复性、特异性和灵敏度进行了研究.结果表明,检测芯片的特异性强,能与测试的李氏放线杆菌、猪鼻支原体和副猪嗜血杆菌等9种病原区分;灵敏度高,在50μL标记反应体系中,能检测到10~50 pg基组DNA,芯片可重复利用.用芯片对44株目标菌的不同型标准菌株、分离株和疫苗株进行了检测.其信号值≥1 000,信号噪音比(SNR)≥6.用芯片对45头病猪和97头健康猪的临床样品选择培养物进行了检测,其检出率分别为多杀性巴氏杆菌71.1%和49.5%、胸膜肺炎放线杆菌42.2%和26.8%、猪肺炎支原体20%和22.7%,混合感染率分别为42.2%和24.7%.在检测临床样品时,芯片法与PCR的符合率为97.8%~100%,与分离鉴定法的符合率为87.6%~95.6%.研究表明,研制的芯片特异性强、敏感性高、可重复使用,是一种能有效用于胸膜肺炎放线杆菌、猪多杀性巴氏杆菌和猪肺炎支原体鉴定和联合检测的新工具. 相似文献
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<正>胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App)是猪胸膜肺炎的病原,可引起各种年龄的猪发病[1]。目前,App有2个生物型和15个血清型:1型~12型、15型为生物I型,13型和14型为生物II型[2]。所有血清型均能引起猪发生胸膜肺炎,但生物II型比生物I型的毒力弱,有些血清型毒力明显更强[1,3]。App致病性强,可通过空气传播,各血清型之间交叉保护力低。因此,很难被有效控制,给养猪业造成了严重的经济损失。 相似文献
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为了探明2010年三峡水库175m蓄水完成后重庆主城江段水质的变化特征及其成因,采用《水质采样方案设计技术规定HJ495-2009》规定的方法,于2011年1—12月逐月采集表层水样,初步研究了溶解氧(DO)、高锰酸盐指数(CODMn)、氨氮(NH4+-N)和总磷(TP)含量等指标的变化特征及其可能成因。结果表明:与2009年相比,2011年水体中DO、CODMn和NH4+-N的含量无明显变化,TP的含量出现下降。重庆主城江段水质整体污染较轻,TP的含量高于富营养化的限值,DO的含量在3—8月较低,NH4+-N的含量在1—2月较高,CODMn和TP的含量在5—10月较高。DO、CODMn、NH4+-N和TP的含量在不同水期均有显著性差异;在调查时空内,NH4+-N和DO的含量呈显著正相关(R=0.742,P<0.01),TP和CODMn的含量相关性由2009年的弱负相关(R=-0.036)转变为2011年的显著正相关(R=0.673,P<0.01)。 相似文献
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应用RT-PCR扩增猪传染性胃肠炎病毒SC-H株N基因,将扩增的N基因克隆到pMD18-T载体中,进行BamHⅠ和SalⅠ双酶切鉴定,将获得的N基因片段以pET32a(+)载体进行亚克隆,构建了pET32-N重组表达质粒并进行鉴定。将pET32-N重组质粒转化BL21(DE3)大肠杆菌中进行表达,并对表达条件进行了选择,对表达产物进行了定位和纯化。结果表明,N基因全长1149 bp,编码382个氨基酸,克隆的N基因包含完整的阅读框且能在大肠杆菌中正确表达,表达的最佳IPTG诱导浓度为0.8 mmol/L,最佳诱导时间为3 h,表达的N蛋白约为47 000,主要以包涵体形式存在于细胞质中。 相似文献
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Dot-PAA-ELISA快速检测猪丹毒抗体方法的建立与应用 总被引:3,自引:0,他引:3
以猪丹毒CD3004(1a型)和C43-12(2型)菌株为抗原提取菌株,EDTA渗透法提取的抗原作为膜载抗原,建立了Dot-PAA-ELISA检测猪丹毒血清抗体方法,经研究确定了Dot-PAA-ELISA的最佳工作条件.试验制备的诊断膜片特异性强,不与猪瘟、猪伪狂犬病、猪肺疫、猪链球菌病、猪大肠杆菌病、仔猪副伤寒、猪布氏杆菌病、猪衣原体病的阳性血清发生交叉反应;灵敏度高,能够最低检出猪血清中含2.61 × 10-9g的猪IgG抗体;膜片保存期长,在室温可保存4个月,4℃可保存7个月其检测活性不变.用该方法检测了仔猪免疫后抗体变化,并通过猪丹毒三型混合强毒攻毒试验确定了猪能抗强毒攻击的抗体临界保护值为1:32.对336份血清进行猪丹毒抗体检测,阳性检出率为96.13%.试验结果表明,本试验方法操作简便、快速准确、结果可存档、重复性和稳定性好,所用试剂材料均可做到标准化,适合基层检疫单位和养猪企业用于猪群免疫监测和猪丹毒流行病学调查. 相似文献
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我国养猪业历史悠久,在漫长的养猪历史中,我国的劳动人民经过长期选育培育出了许多优良的地方品种。这些地方猪种对我国的养猪业发展起到举足轻重的作用,同时也对世界优良猪种的选育作出巨大贡献。荣昌猪是我国著名的地方优良猪种,是我国推广数量最大,覆盖地域最广的地方猪种。 1 荣昌猪的历史及特征 1.1 荣昌猪的历史 荣昌猪是我国最优良的地方猪种之一,其品种的形成有三百多年的历史。据文献记载,大约在明末 相似文献
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