miR-200a对奶山羊乳腺上皮细胞乳脂合成相关基因mRNA表达的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

林先滋  罗军  张犁苹  朱江江  石恒波  苟德明 《畜牧兽医学报》2012,43(7):1028-1036

旨在构建pAd-pri-miR-200a重组腺病毒,使其在奶山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,研究miR-200a对乳脂合成相关基因mRNA表达的影响。以西农萨能羊DNA为模板扩增pri-miR-200a。采用Ad-Easy系统构建重组腺病毒载体pAd-pri-miR-200a,并于HEK 293细胞株中进行病毒的包装、扩繁。TCI50法测定病毒滴度。qRT-PCR检测miR-200a及16个乳脂合成相关基因mRNA表达水平。序列分析结果显示,pri-miR-200a包括pre-miR-200a86bp和侧翼序列共297bp。酶切结果证实pAd-pri-miR-200a构建成功。Ad-pri-miR-200a滴度达8×109 PFU.mL-1。实时定量结果表明,Ad-pri-miR-200a(MOI为200)感染奶山羊乳腺上皮细胞72h,miR-200a的表达量较对照高出2.4倍。同时miR-200a的过表达引起10个基因mRNA表达量下调,6个基因mRNA表达量上调。其中脂肪酸从头合成相关基因FASN、脂滴生成相关基因TIP47及脂肪酸运输相关基因FABP4降幅较大,分别下降了0.47、0.89及0.65倍。而TAG生成相关基因DGAT1和脂解相关基因HSL较对照分别增加了0.52和1.49倍。本研究获得的重组腺病毒Ad-pri-miR-200a能在山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,同时miR-200a过表达影响乳脂合成相关基因mRNA表达水平。  相似文献   

DNA-SIP鉴定甘蔗//大豆间作土壤¹⁵N-DNA富集位置的氮循环功能基因qPCR方法     

苟永刚  余玲玲  许霞  王建武 《农业环境科学学报》2019,38(1):140-147

为筛选有效鉴定甘蔗//大豆间作系统的稳定性同位素核酸探针技术(DNA-SIP)中超高速离心后15N-DNA富集位置的指示功能基因,利用实时荧光定量PCR技术(qPCR),检测6个氮素循环功能基因在不同浮力密度离心液DNA中的相对丰度分布,通过对氮素循环功能基因相对丰度作图分析,nifH和amoA基因在甘蔗//大豆间作和大豆单作种植模式中15N标记组与对照组基因丰度峰发生偏移,chiA基因丰度峰仅在大豆单作种植模式下存在偏移,而nirS、nirK、nosZ等3个基因的丰度峰值在两种种植模式下均不发生偏移。结果表明nifH和amoA基因可作为指示基因,能够有效鉴定甘蔗//大豆间作系统中DNA-SIP技术15N-DNA位置。  相似文献   

红鳍东方鲀不同家系群体的形态性状差异与相关性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

苟盼盼  王秀利  窦冬雨  荆笛  刘圣聪  刘福君  刘海金  杨君  孟雪松  仇雪梅 《大连海洋大学学报》2019,34(5)

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离心挤压式油棕果果核分离机的研制     

郑爽  邓干然  李国杰  崔振德  李玲  李玉林  刘智强 《现代农业装备》2019,40(1):77-80

传统小型油棕果榨油设备采用果肉、果核混合压榨的出油方式,为防止压破果核影响油质而降低压力,造成不完全压榨,油渣含油高。为提高出油率,选用先分离果核再压榨果肉的工艺,为此设计研制了一种基于离心挤压的油棕果果核分离机,可将高温杀酵后从果穗脱离的果实进行高速离心捣碎并再次加热,降低物料粘度,使果肉更容易从分离栅栏挤出,达到果核分离目的。  相似文献   

环陶家湖片区水稻农药化肥减量增效集成技术示范     

任智强  王前涛  韩玉江  刘晓娜  史明会 《湖北植保》2020,(6):64-66

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蔬菜农药残留快速检测——酶抑制法检测常见问题     

苟建新 《新疆农业科技》2018,(2)

目前,蔬菜农药残留快速检测主要使用酶抑制技术,这种技术对检测人员的工作经验和操作熟练程度有较高的要求,接触此技术时间较短的检测员在检测操作过程中,容易出现样品空白值偏低、样品吸光度值偏高、抑制率为负值或无效以及假阴性和假阳性等问题。针对这些问题,本文从操作技术层面上对检测操作过程进行探讨,从每一个环节上规范操作,能大幅度提高检测数据的有效性和精确度。  相似文献   

海上采油技术的优化研究     

苟建元 《山东饲料》2014,(2)

由于海洋采油技术应用的设备多,而且采油的生产成本较高,为了充分的利用海上平台,最大效率的进行海上油气资源的开采,海上采油优化技术是一种有效的途径。文章通过调研研究结合海上采油系统的实际,开展了海上采油技术电潜泵采油系统和整个系统的优化研究。通过研究对于提高海洋采油的效率具有重要的意义。  相似文献   

区直林业系统主题教育第一批总结暨第二批部署会在邕召开     

陈春咏  杨智强 《广西林业》2019,(10)

正2019年9月24日,自治区直属林业系统"不忘初心、牢记使命"主题教育第一批总结暨第二批部署推进会议在南宁召开。自治区林业局党组书记、局长黄显阳强调,通过这次主题教育,全区林业干部职工更加深刻认识到:习近平新时代中国特色社会主义思想是党和国家必须长期坚持的指导思想,是走好新时代林业改革发展长征路的行动指南;坚定理想信念、坚守政治方向是共产党员必须长期坚持的政治原  相似文献   

基于单克隆抗体的O型口蹄疫病毒抗体固相竞争ELISA检测方法的建立     

许智强  李敏杰  刘彦玲  周国辉  于力 《中国预防兽医学报》2020,(2):145-149

为建立评价O型口蹄疫病毒(FMDV)疫苗免疫水平的方法,本研究以单克隆抗体(MAb)3D9为捕获抗体,以HRP标记的MAb 8E8作为检测MAb,经过条件优化建立了基于MAb的检测O型FMDV抗体的固相竞争ELISA(SPCE)方法。对该方法进行了特异性、敏感性、重复性试验。结果显示,MAb 3D9的最佳稀释度为1:25 000,灭活O型FMDV抗原的最佳稀释浓度为1:3,HRP标记的MAb 8E8的最佳稀释度为15 000,当血清1:32稀释时,检测的临界值确定为45%。该方法分别检测A型FMDV抗体阳性参考血清以及牛冠状病毒、牛轮状病毒以及猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒的标准阳性血清,检测结果均为阴性,未出现交叉反应。经检测,当阳性标准血清的抗体稀释度在1:512时,该方法仍具有较好的敏感性;批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,表明其重复性较好。并将该方法与液相阻断ELISA(LPBE)方法和病毒中和试验(VNT)的相关性进行了比较,结果显示该方法与LPBE和VNT的相关性分别为0.896和0.923。本研究为国内评价O型FMDV疫苗免疫水平建立了一种新的方法。  相似文献   

千斤粮万元钱种植模式探索     

苟峰陈义 《四川农业科技》2014,(2):16-17

<正>早在2011年下半年,我市农业技术人员就按照阆中市农牧业局领导的安排,在阆中方山乡雪洞村规划落实了50亩"洋芋—水稻—生姜"千斤粮万元钱种植模式的探索,通过2012~2013年连续两年的实施,取得了良好的效果,实现了"双超"的奋斗目标。现总结如下,供种植户或同行参考。一、模式的季节安排2012年1~5月上旬种植春洋芋,2012年5月下旬至9月种植水稻,2012年10月至2013年3月实行休耕以恢复地力,2013年4~11月种植生姜。二、模式的效果  相似文献