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101.
荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平 总被引:2,自引:0,他引:2
白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并采用该方法对26-50日龄商品鸡外周血淋巴细胞(PBL)中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示:所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%;线性范围分别在10^-4-10^-9和10^-3-10^-9;相关系数分别为0.998 0和0.999 9;最低分别能检测105和120拷贝;熔解曲线分别在78.2和86.7℃附近出现1个单特异峰;组内变异系数分别在1.13%-2.15%和1.17%-3.68%,组间变异系数分别在1.16%-3.25%和1.66%-2.86%。26-50日龄鸡PBL CD4和CD8的mRNA表达水平有小幅波动,与采用流式细胞术检测结果的报道一致。本试验建立的RRT-PCR方法敏感性高、稳定性和再现性好,为检测鸡CD4、CD8基因表达水平提供了精确定量的新方法。 相似文献
103.
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108.
33株H9N2亚型禽流感病毒分离株分子流行特点的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
在1998至2007年期间,采集了我国不同地区、不同宿主来源的H9N2亚型禽流感病毒株,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HA基因,获得33株H9N2亚型禽流感病毒的核苷酸序列。结合GenBank中公开发表的其他国内H9亚型禽流感HA基因序列共65株,应用计算机软件绘制进化树,进行H9亚型禽流感病毒谱系全景分析,探索H9亚型禽流感的流行趋势。分析结果表明:这65株的基因进化树主要分为三个系列,每个系列毒株均呈现全国性流行分布;三个系列毒株可在同一时间段内、同一地区发生流行;不同时间的流行毒株虽有变异,但大部分归属于三个系列中。无论从时间的推移上还是地域的转变中,病毒均没有表现出明显的时间演变与地理分布特征,进一步显示了H9亚型禽流感的复杂性和多样性。 相似文献
109.
鸡腺胃型传染性支气管炎(综述) 总被引:15,自引:0,他引:15
1996年9月份以来,中国青岛及附近地区养鸡场20-90日龄蛋用育成鸡连续发生了一种以流泪,肿眼,伴有呼吸道症状,极度消瘦,拉稀,死亡为特征的一种新的呼吸道传染病。主要剖检表现为腺胃肿大如球状,腺胃壁增厚,腺胃粘膜出血溃疡,腺胃乳头平整融合,轮廓不清,可挤出脓性分泌物的腺胃炎症变化。本病病原通过鸡胚盲传5-6代,电镜观察到典型的冠状病毒。因为引起腺胃的特征性的病理变化,因此将此病暂定名为腺胃型传染性支气管炎。我们青岛地区鸡场的分离株定为QXIBV株。本篇从病原学、临床症状、发病机理和流行病学、免疫学、实验诊断和疾病控制方面进行综合论述。本病与肠型传支在理化特性、形态和毒力上相似,可能是同一种新的IBV变异株。 相似文献
110.
抗致病性大肠杆菌O78特异单克隆抗体的研制及其初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
应用淋巴细胞杂交瘤技术将提纯O_78:K_80:H_9标准菌株免疫BALB/C小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞命名为1G_7、2C_6、3C_1、3E_1、3D_12,这5株杂交瘤细胞经三次克隆化都能稳定分泌抗体。玻板凝集试验、酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光试验结果表明:这5株单抗对所试37个菌株中O_78菌株都能发生反应。但3E_1、3D_12还可与另外6个菌株出现交叉反应。3C_1可与另外所试14个菌株发生反应,1G_7和2C_6则只与O_78菌株发生反应。用上述1G_7,单抗对临床分离123株细菌进行鉴定,与常规单因子血清鉴定结果完全符合。试验结果表明对,O_78特异单抗可以取代常规O_78单因子血清。 相似文献