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对市售猪饲料中铜、锌、铬含量的评测 总被引：6，自引：0，他引：6
铜、锌、铬是动物饲料中几种必需的微量元素，它们对于动物的生长、发育、繁殖有着不可替代的作用，如果饲料中这几种元素缺乏将会影响动物生产和经济效益。但如果饲料中的这几种元素的含量过多又会引起中毒，造成不良影响甚至严重后果。为了了解目前各饲料厂这几种元素的... 相似文献
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传染性法氏囊病RT-PCR诊断方法研究 总被引：3，自引：0，他引：3
本文在研究传染性法氏囊病病毒的Ａ片断ｃＤＮＡ结构的基础上,用Ｐｒｉｍｅｒ Ｄｅｓｉｇｎ引物设计软件,在ＶＰ_５和ＶＰ_２的重叠基因区设计了一对引物,使用该引物对６种ＩＢＤＶ的标准毒株,１０例自然发病病鸡组织标本,８例ＩＢＤＶ Ｊ_１Ｃ_７Ｆ_３种毒株攻毒病理法氏囊组织标本,进行了ＲＴ－ＰＣＲ检测均得到了阳性的扩增结果。２种参考鸡病病毒和８例健康鸡的法氏囊组织在同样条件下进行扩增均为阴性结果。本法具有扩增方法简单,对各种病毒株的适应性广,特异性高,检测成本较低的特点。 相似文献
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制备禽腺病毒4型（FAdV-4）Fiber2蛋白的特异性单克隆抗体,将重组蛋白FAdV-4 Fiber2纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠,分离脾脏中的淋巴细胞,与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,筛选得到10株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株1B5F1、1B5G11、1B5C1、1B5D2、1B5E3、1B5F3、1B5E4、1B5G4、1B5A8、1B5G8,取分泌抗体水平最高的1B5F1细胞株制备腹水,利用斑点杂交（Dot blot）和间接免疫荧光试验（IFA）进行特异性检测。结果表明,成功制备10株杂交瘤细胞株;制备的腹水能与FAdV-4 Fiber2蛋白及FAdV-4攻毒后的鸡肝组织产生特异性反应,证明成功制备了FAdV-4 Fiber2蛋白特异性单克隆抗体。 相似文献
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M基因序列设计2对引物,通过PCR扩增得到了PRRSV M基因的全长片段和N-末端截短67个氨基酸序列的MNd67基因片段,分别将这些片段插入到表达质粒pET-28a(+)的多克隆位点上构建重组表达质粒,PCR、酶切及测序鉴定表明,成功构建了2种重组表达质粒(pET28a-PRRSV M和pET28a-PRRSV MNd67)。重组质粒转化到E.coli BL21(DE3)后利用α-乳糖诱导其表达,SDS-PAGE电泳分析表明,E.coli BL21(DE3)/pET28a-PRRSV MNd67成功表达分子质量为14ku的重组蛋白,而E.coli BL21(DE3)/pET28a-PRRSV M未见明显的表达蛋白。试验结果表明已成功表达截短的PRRSV M蛋白,可为PRRSV诊断抗原和疫苗研究奠定基础。 相似文献
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新城疫病毒JZ05株F基因重组pGAPZα的构建 总被引：1，自引：0，他引：1
以RT-PCR扩增新城疫病毒JZ05株,基因F1片段和F2片段,以核酸内切酶κpnI和XbaI对目的基因片段及质粒pGAPZαA进行酶切,连接酶切产物,转化Eacterium coli DH5α.以PCR方法确定JZ05 F1的阳性重组子为2个,JZ05 F2的阳性重组子为4个.对阳性重组子进行酶切鉴定及序列分析,结果发现,重组质粒pGAPZαA-F1、pGAPZαA-F2及质粒pGAPZαA的酶切电泳条带与试验设计大小相符;基因测序得到的重组子中F1和F2序列长度分别为1198bp、269bp,与新域疫病毒JZ05株F基因序列比对,其序列长度和核苷酸排列完全一致.这表明重组质粒中目的基因片段的核苷酸序列、大小和插入位置是正确的,为以酵母表达系统表达F1和F2、研究强毒株与弱毒株F蛋白的抗原性差异程度及研制重组亚单位疫苗打下了基础. 相似文献
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采用自制传染性法氏囊病(IBD)灭活油乳剂疫苗免疫家兔,第2次免疫后4~5周,血清IBD抗体水平可达1-64。对每一份血清样品以两种方法进行纯化,即亲和层析与盐析-透析中,IBD抗体丢失量约15%左右。血清和透析所得液体经亲和层析,收集的混合液中IBD抗体水平均为1/8,蛋白含量在1.07%~1.25%,但血清样品比透析液样品的蛋白水平高4.8%~10.7%。对血清样品和透析液样品亲和层析后收集的混合液的蛋白水平进行t检验,t=1.64,t0.05(3)=3.182,t0.05,差异不显著。结果表明,血清样品直接进行亲和层析比盐析-亲和层析节省时间和成本,并可减少血清抗体的丢失量。 相似文献
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根据GenBank上公布的鸡传染性贫血病毒VP1的基因序列设计一系列引物,通过基因扩增得到了鸡传染性贫血病毒(CAV)VP1基因的全长片段和一系列不同N末端截断的VP1基因片段,分别将这些片段插入表达质粒载体pET28a的多克隆位点上,构建成4种重组表达工程菌(E.coli BL21/pET-28-CAVVP1、E.coli BL21/pET-28-CAVVP1Nd29、E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd56、E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd137),研究了4种不同长度VP1片段在重组大肠杆菌中的表达,并通过SDS-PAGE电泳筛选最佳表达方式。结果表明:E.coli BL21/pET-28-CAVVP1Nd29能表达分子质量为44ku的可溶性蛋白,E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd56能表达分子质量为40ku的不可溶性蛋白,而在E.coli BL21/pET-28-CAV VP1和E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd137的诱导表达产物中未见明显的表达蛋白出现。其中可溶性的CAV VP1Nd29蛋白将有可能用于研制CAV诊断抗原和亚单位疫苗研究。 相似文献
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