鸭疫里墨氏杆菌病及其在我国的流行动态和防治对策   总被引：3，自引：0，他引：3  

程安春  汪铭书  郭宇飞  朱德康  陈孝跃  刘维平  孟琼华  李淑梅 《中国家禽》2003,25(11):29-31

1疾病简史和分布鸭疫里墨氏杆菌病(RiemerellaAnatipestifer,RA)最早由Riemer于1904年报道鹅群中发生此病。1932年,Hendrickson报道美国纽约长岛三个鸭场的北京鸭发生此病,当时在该地区称之为“新鸭病”。该病开始发生于7～10周龄鸭,后来逐渐演变为侵害2～7周龄幼鸭。1938年Gra  相似文献   

我国鸭疫里默氏杆菌血清型调查及新血清型的发现和病原特性   总被引：75，自引：5，他引：70  

程安春  汪铭书  陈孝跃  朱德康  黄城  刘菲  周毅  郭宇飞  刘兆宇  方鹏飞 《中国兽医学报》2003,23(4):320-323

从全国29个省(市、自治区)不同代次(原种、祖代、父母代和商品代)的5～90日龄患有典型鸭传染性浆膜炎的病死鸭分离到l842株鸭疫里默氏杆菌,血清型分布为l(638株)、2(367株)、3(102株)、4(146株)、5(89株)、6(49株)、7(87株)、8(68株)、10(43株)、ll(35株)、13(56株)、14(61株),另有101株不属于1～2l血清型,而分属于4个相同的抗原型,被命名为22(2l株)、23(18株)、24(34株)和25(28株)血清型。各血清型对雏鸭均具有较强致病性和免疫原性。  相似文献   

光生物素标记六邻体蛋白基因探针检测减蛋综合征病毒的研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

汪铭书  程安春等 《中国兽医科技》2002,32(2):13-15

根据基因文库中减蛋综合征病毒（EDSV）AV127株的序列设计1对引物，从四川本地分离的EDSVSG9301株中扩增出六邻体蛋白基因并将其克隆到PUC18的多克隆位点中，经PCR、酶切分析、DNA杂交分析和序列测定证明，所扩增、克隆的基因包括了六邻体蛋白基因从起始密码子到终止密码子在内的完整序列。用光生物素对含六邻体蛋白基因的重组质粒标记后，采用斑点印迹法对4株EDSV（标准株AV-127株和3株四川分离株）、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和鸭瘟病毒的核酸进行检测，结果，该探针能检测出4株EDSV，但不能检出新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和鸭瘟病毒。表明该六邻体蛋白基因探针具有特异性，检测的灵敏度高达1pg。  相似文献   

聚合酶链反应(PCR)检测鸭瘟病毒方法的建立和应用   总被引：7，自引：0，他引：7  

宋涌  程安春  汪铭书  刘菲  廖永洪  袁桂萍  韩晓英  徐超  陈孝跃 《中国兽医杂志》2005,41(2):17-20

鸭瘟(Duck Plague，DP)是由鸭瘟病毒(DPV)引起的鸭、鹅等水禽的一种急性败血性传染病，发病率和死亡率都甚高，是危害养鸭业的最为严重的传染病之一。Baudet(1923)首次在荷兰报道鸭瘟，现该病呈世界性分布。目前实验室检测DPV的方法包括病毒分离鉴定、血清中和试验、反向被动血凝试验、琼脂凝胶沉淀试验、荧光抗体试验、微量固相放射免疫测定法、酶联免疫吸附试验(ELIsA)、核酸探针等”，这些方法用于感染DPV死亡鸭组织中病原的检测存在这样或那样的不足，  相似文献   

鸭病毒性肠炎病毒强毒在人工感染鸭体内形态结构和发生学的电镜观察     

袁桂萍  程安春  汪铭书  周毅  刘菲  韩晓英  郭宇飞  廖永洪  徐超  文明  贾仁勇  周伟光  陈孝跃 《畜牧兽医学报》2005,36(5):486-491

为研究鸭病毒性肠炎病毒(DEV)CH强毒株在感染鸭体内的分布和形态学发生规律，应用透射电镜和超薄切片技术对人工感染DEV的成年鸭各组织器官进行观察。结果表明：感染后12h在脾脏和法氏囊首先观察到少量的DEV出现，24h后在脾、胸腺和法氏囊以及死亡鸭的肝、肠和胰中均观察到具有典型的疱疹病毒粒子及其核衣壳形态的DEV。DEV病毒核衣壳有空心型、致密核心型、双环型和内壁附有颗粒型4种形态，存在胞核和胞浆两种装配方式。病毒成熟有两种方式：一为细胞核内核衣壳在核内获得皮层，通过核内膜获得囊膜成为成熟病毒；二为核内核衣壳通过内外核膜进入胞浆，核内和胞浆内的核衣壳在细胞浆中获得皮层，然后在各种质膜上获得囊膜，最后成熟病毒通过细胞破裂或其他方式释放到细胞外。伴随着病毒的复制、装配和成熟，细胞中出现多种核内和胞浆包涵体、核内致密颗粒、核内微管和中空短管、胞浆电子致密小体等结构。  相似文献   

鸭疫里默氏菌铝胶佐剂与铝胶复合佐剂4价灭活疫苗的比较     

程安春  汪铭书  郭宇飞  方鹏飞  刘兆宇  陈孝跃  周毅 《中国兽医学报》2005,25(2):152-157

以血清 1、2、4、5型鸭疫里默氏菌 (Riemerella anatipestifer,RA)制备 4价铝胶佐剂和铝胶复合佐剂 2种灭活苗 ,经过无菌及安全检查合格后 ,对 3日龄樱桃谷鸭颈背部皮下注射 0 .5 m L/只。(1 )免疫后 1 0、1 3、1 6 d对同源 RA的攻击 ,铝胶佐剂苗表现出 5 %～ 2 0 %、75 %～ 90 %、1 0 0 %免疫保护 ,2 3～ 30 d免疫保护力开始下降 ;铝胶复合佐剂苗表现出1 0 %～ 35 %、80 %～ 1 0 0 %、1 0 0 %免疫保护 ,5 1～ 6 5 d免疫保护力开始下降。(2 ) 2种疫苗 1次免疫后 2 3d抗体水平均达高峰 ,至 93日龄时仍能检出抗体的存在 ,1 0日龄进行第 2次免疫后可产生更高的抗体水平 ,到 6 5 d时仍能保持较高抗体水平 ;其中 1 6～ 6 5 d进行 2次免疫的铝胶复合佐剂苗产生的抗体水平显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1 )地高于铝胶佐剂苗。 (3) 2种疫苗免疫雏鸭后能够显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1 )地增强 T细胞的免疫力 ,时间达 2周。对攻毒保护试验、抗体消长规律和细胞免疫测定结果综合分析表明 ,RA4价铝胶佐剂和铝胶复合佐剂 2种灭活苗免疫雏鸭后 ,免疫保护的形成是体液免疫与细胞免疫协同作用的结果。经实验室攻毒保护试验、EL ISA抗体消长规律测定、T细胞免疫水平测定和田间试验表明 ,研制的 2种疫苗均具有  相似文献   

鸭病毒性肠炎病毒的提纯及其结构蛋白SDS-PAGE分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

文明  程安春  汪铭书  周毅  刘菲  袁桂萍  郭宇飞  贾仁勇  周伟光  陈孝跃 《中国兽医学报》2006,26(3):243-246

将鸭病毒性肠炎病毒（DEV）分离株SC-1经鸭胚成纤维细胞培养增殖后，采用差速离心结合蔗糖不连续密度梯度离心法进行提纯，获得多量、纯净的完整病毒粒子。病毒粒子主要位于40％～50％蔗糖层交界处，电镜下可观察到DEV具有典型的疱疹病毒特征，完整病毒粒子由囊膜、衣壳和核芯3个部分组成，直径为170～190nm。将纯化的DEV粒子经SDS—PAGE分析，发现其结构蛋白由11种多肽组成，即VP1（190000）、VP2（136000）、VP3（106000）、VP4（88000）、VP5（75000）、VP6（68000）、VP7（56000）、VP8（48000）、VP9（42000）、VP10（38000）和VP11（32000）．其中VP1、VP2、VP3、VP6、VP8和VP9等6条蛋白区带的相对百分含量较高，约占病毒结构蛋白总量的89．04％，为DEV的主要结构多肽。  相似文献   

人工感染黄曲霉毒素雏鸭的病理学动态变化     

刘艳丽汪铭书  程安春彭西 周毅胡骑  陈孝跃 《中国兽医科技》2006,36(5):396-400

给7日龄樱桃谷鸭饲喂含黄曲霉毒素AFB，的饲料，分别于采食AFB1后第12、24、48、72、96、120、144、168、192h各剖杀2只雏鸭，观察病理变化并采取组织病料，制作石蜡切片观察组织病理学变化和超薄切片观察超微结构变化。眼观病变为气囊有黄色纤维性物质渗出，肝、肾肿大，质地变脆。组织病理学变化为胆管增生，肝细胞空泡变性及后期极度肿胀；肾小管上皮细胞颗粒变性和散在凝固性坏死；脾红髓淤血，脾窦扩张；大脑膜水肿扩张，脑实质毛细血管扩张；心肌纤维、十二指肠腺上皮细胞、胰腺细胞颗粒变性。超微结构变化为肝细胞中空泡大量聚集导致细胞核变形，肾上皮细胞线粒体肿胀变形，大脑神经细胞髓鞘溶解及胰腺细胞酶原颗粒减少。表明，AFB，对雏鸭心、肝、脾、肺、肾、脑、十二指肠、胰腺等均有明显病理损害，以肝的病变最为严重和典型。  相似文献   

Ⅰ型鸭肝炎病毒间接免疫酶染色检测方法的建立     

陈海军程安春  汪铭书陈孝跃 《中国兽医科技》2007,37(5):369-373

以蔗糖密度梯度离心提纯的Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHV—Ⅰ）免疫兔制备兔抗DHV—Ⅰ抗体，建立了检测石蜡组织切片中DHV—Ⅰ抗原的间接免疫酶染色（indirect immunoperoxidase staining，ⅡS）方法，并对DHV—Ⅰ强毒人工感染死亡或濒死雏鸭的各个组织器官进行了检测。结果表明，ⅡS与DHV—Ⅰ感染死亡或濒死雏鸭的肝等呈现阳性反应，与鸭瘟病毒、鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门菌、多杀性巴氏杆菌感染发病和死亡雏鸭的肝以及健康雏鸭的肝呈现阴性反应。感染DHV—Ⅰ死亡或濒死雏鸭的肝、脾、肾、心、胸腺、腔上囊、胰腺、十二指肠、盲肠、空肠、回肠、直肠的免疫组织化学检测呈阳性或强阳性，DHV—Ⅰ抗原主要分布于感染细胞的细胞质。该ⅡS法具有良好的特异性，可用于DHV—Ⅰ在感染雏鸭组织细胞中的亚细胞定位、DHV—Ⅰ感染雏鸭的实验室诊断、甲醛固定组织的回顾性诊断。  相似文献   

鸭瘟病毒抗体间接ELISA检测试剂盒的研制     

齐雪峰程安春  汪铭书杨晓燕贾仁勇  陈孝跃 《中国兽医科技》2007,37(8):690-694

将鸭瘟病毒（DPV）CHv株经过鸭胚成纤维细胞增殖、反复冻融、差速离心和蔗糖密度介质离心制备纯化抗原,建立了用于检测鸭血清中抗DPV特异性IgG抗体的间接ELISA方法,并对其进行了标准化研究,确定了最佳工作条件,研制了相应的检测试剂盒并对盒内各组分的保存条件、质量控制以及试剂盒的特异性、重复性进行了研究。结果显示,4.75μg/孔的纯化DPV抗原包被反应板可获得良好的特异性和敏感性,1∶100稀释的待检血清样品反应后D405 nm值换算为抗体效价的标准直线方程为y=1.573＋3.552x（r=0.953,n=40）。试剂盒在4℃保存3个月或-20℃保存10个月后各项性能都很好。应用该试剂盒对皮下注射、口服和滴鼻免疫DPV弱毒的20日龄樱桃谷鸭血液中抗DPV特异性IgG抗体效价进行了测定,皮下免疫鸭于第6 d,口服和滴鼻免疫鸭于第9 d可在血清中检测到DPV特异性抗体,且至第60 d时依然可检测到高效价抗体。证实,该试剂盒可用于鸭瘟的血清流行病学调查和鸭场免疫抗体水平的监测。  相似文献