栉孔扇贝Foxl2蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体制备与检测   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘晓玲  王振东  孙涵甜  王振华  赵振军  李忌 《海洋渔业》2018,(4)

以栉孔扇贝(Chlamys farreri)卵巢cDNA为模板,采用PCR扩增Foxl2(forkhead box l2)基因,通过双酶切与pET-28a构建重组质粒表达载体,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,筛选鉴定阳性克隆,经测序鉴定后提取质粒转化大肠杆菌感受态细胞BL21,以IPTG诱导Foxl2蛋白表达,用SDS-PAGE鉴定表达情况,经镍柱纯化表达蛋白,通过免疫新西兰白兔(New Zealand white rabbits)制备多克隆抗体,以ELISA测定抗体效价,最后用WB(Western Blot)检测抗体特异性。结果表明,重组载体转化BL21后经1.0 mmol L~(-1)IPTG于37℃诱导6 h可产生大量Foxl2蛋白,主要以包涵体形式表达。经镍柱柱纯化可得到纯度较高的Foxl2蛋白,浓度达800 ug·mL~(-1)。免疫新西兰白兔获得多克隆抗体,效价大于1∶128 000。WB检测显示:该抗体能特异识别扇贝卵巢中的Foxl2蛋白,同时发现Foxl2蛋白在卵巢中强表达,而在精巢中几乎不表达,揭示栉孔扇贝中该蛋白具雌性性别相关性。研究成功获得效价高且能特异识别天然Foxl2的多克隆抗体,为后续深入研究Foxl2在栉孔扇贝卵巢中的功能提供了分子工具。  相似文献   

高邮湖大规格罗氏沼虾网围养殖技术及效益分析     

蔡媛媛  沈春忠  王假真  胡兆明  魏文志 《水产养殖》2016,(3):25-26

正罗氏沼虾又名马来西亚大虾、淡水长臂大虾等,为世界上最大的淡水虾类之一,具有个体大、食性杂、生长快、适应能力强、肉味鲜美等优点。高邮市罗氏沼虾养殖面积1万hm~2左右,占全国总产量的1/4以上,为高邮市水产养殖的主导产业。  相似文献   

福建泉州湾环境质量评价   总被引：5，自引：1，他引：5  

蔡清海  钱小明  方民杰  许翠娅  蔡建堤  林燕 《福建水产》2005,(2):33-37

本文依据2000～2001年福建主要港湾水产养殖容量研究的调查资料，分析并评价了泉州湾的环境质量。结果表明：泉州湾DO、pH值、COD和活性磷酸盐基本符合二类海水水质标准，而无机氮严重超标。由于福建省第三大河流晋江携带大量工农业废水排入该海湾，造成水质无机氮和活性磷酸盐含量偏高，潜在富营养化因素，应加强污水排放的治理和海域环境保护。  相似文献   

基于牡蛎疱疹病毒DNA聚合酶基因的巢式PCR检测方法的建立及应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

高文辉  白昌明  蔡生力  王崇明 《水产学报》2016,40(3):326-333

为了建立适用于Os HV-1不同变异株的检测方法,在牡蛎疱疹病毒(Os HV-1)3个变异株全基因组序列比对的基础上,筛选到牡蛎疱疹病毒基因组中高度保守的DNA聚合酶(DNA polymerase)基因,据此设计巢式PCR引物,优化PCR反应体系和条件,建立了基于Os HV-1 DNA聚合酶基因的巢氏PCR检测方法(P-n PCR检测方法),利用P-n PCR与Cn PCR检测方法对不同年份和宿主来源的Os HV-1疑似感染样本进行检测。结果显示,Pn PCR检测方法能稳定地检出100拷贝/μL的病毒DNA;P-n PCR较C-n PCR检测方法具有更强的特异性和更高的检出率。研究表明,本研究建立的P-n PCR检测方法适用于Os HV-1不同变异株的检测,可为该病毒的检测和流行病学调查提供可靠的技术支持。  相似文献   

缓释腐植酸有机复合肥示范应用效果     

蔡维杰 《上海蔬菜》2009,(6):66-67

缓释腐植酸有机复合肥（SRCF）项目列入省科技成果推广计划,示范面积逐年增加,主要在通州、海安、海门等地的科技示范园区、丰产方、平衡配套施肥示范方等多种示范方进行大范围试验示范,增产效果显著,现将其总结如下。  相似文献   

双孢蘑菇培养料贴堆再发酵技术     

张祖堂  龚国桢  李强  翁汉东  蔡开地 《中国食用菌》2009,28(2)

前发酵采用并排贴近式小堆群,以增加好气发酵比重,省工省时;后发酵根据二次发酵后培养料偏生、偏干或氨味3种情况,区别进行再发酵,以提高发酵品质。  相似文献   

五大发展理念与思想政治教育的逻辑构建中茶文化思维融入     

陈树根  蔡中兴 《福建茶叶》2018,(10)

五大发展理念以"创新、协调、绿色、开放、共享"为核心内容,具有很强的现实针对性和历史内涵、哲学价值。可以说,五大发展理念的提出,是在新时代里实现中华民族伟大复兴中国梦的关键所在,能够在很大程度上破解我国经济社会发展所面临的种种难题。五大发展理念既有着深刻的现实意义,更蕴含着深厚的中华民族文化内涵和思想内涵。另外,五大发展理念与中国传统茶文化有着千丝万缕的关联。将五大发展理念融入到思想政治教育是当前我国所面临的一个重要工作,如何更好地让二者有机融合,取得更好的效果?一个重要方面,就是要针对五大发展理念与茶文化在思想文化方面的契合度,在五大发展理念与思想政治教育的逻辑构建中融入茶文化的思维内涵。  相似文献   

微生物法测定米粉中维生素B_6含量不确定度评估   总被引：1，自引：0，他引：1  

熊娟  蔡大川  张燕忠  陈敏儿  黄璇莹 《福建农业科技》2017,(4)

应用微生物法测定米粉样品中维生素B_6含量,并从多个方面分析测量的不确定度。试验结果表明:相对合成标准不确定度为0.01393,扩展不确定度为0.1653,测量结果为(5.932±0.1653)μg/hg;影响维生素B_6测定结果的最主要不确定度分量为微量移液枪容差。  相似文献   

抗菌类药物的热值测定     

蔡艳萍  高锦红 《湖北农业科学》2017,56(8)

采用氧弹式量热计对12种抗菌类药物的热值进行了测定。结果表明,12种抗菌类药物的热值15.63~25.40 k J/g,其中,阿莫西林克拉维酸钾热值最小,盐酸左氧氟沙星胶囊热值最大。  相似文献   

大豆脱氢抗坏血酸还原酶基因的电子克隆及进化分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

李晓晓  李蕊  李雅轩  蔡民华  胡英考 《大豆科学》2007,26(1):45-50

利用生物信息学和实验验证的技术路线,以拟南芥脱氢抗坏血酸还原酶基因cDNA序列为信息探针,对大豆EST数据库进行同源搜索,经同源性比对和序列组装,获得全长为955bp的大豆脱氢抗坏血酸还原酶基因的cDNA序列(GenBank登录号为DQ006810),经RT-PCR扩增,分子克隆和序列分析验证,结果表明与电子克隆完全一致.该cDNA序列具有完整的开放阅读框架(ORF,36bp-815bp),推测编码蛋白为259个氨基酸.通过与几种植物脱氢抗坏血酸还原酶蛋白序列的比较,发现该基因具有较高的保守性.结果表明根据物种问同源基因序列,对跨物种问EST数据库进行同源检索筛选,拼接,是新基因克隆的一条有效途径.  相似文献