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高致病性PRRS VORF3基因在昆虫细胞中的表达与免疫原性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3的结构、功能和免疫学特性,本研究根据GenBank登录的高致病性PRRSV变异株(HP-PRRSV) HuN4株ORF3基因序列,经序列分析去除其N端的一部分疏水性区域(1aa～49aa),设计合成引物。将扩增的基因连接于pFastBac HTb杆状病毒载体中,构建重组质粒pF-ORF3,转化至感受态DH10Bac中,获得重组杆粒rBac-ORF3。再将其转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rAc-ORF3。用western blot和间接免疫荧光试验(IFA)分析表明GP3在昆虫细胞Sf9中获得正确表达,而且具有良好的反应活性。用纯化的GP3免疫小鼠,制备抗GP3多克隆抗血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其效价。本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达了重组GP3,经GP3免疫的小鼠体内产生了较高滴度的特异性抗体,证明表达的GP3具有特异的免疫原性。 相似文献
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目的利用复合因素建立金黄地鼠动脉粥样硬化模型,观察造模后各段主动脉的病理学变化,为这一疾病的基础研究提供实验对象和材料。方法随机将30只金黄地鼠分为对照组(15只)和模型组(15只),对照组给予普通饲料,模型组用高脂饲料喂饲加以注射牛血清白蛋白,饲养8周。主动脉切片进行病理形态学观察。结果模型组主动脉各部位出现粥样斑块,主动脉弓、胸主动脉、腹主动脉、髂动脉内膜增厚,出现大量的斑快和炎细胞浸润。结论本方法可在短时间内造成金黄地鼠出现动脉粥样硬化病变,可作为研究动脉粥样硬化疾病的实验材料。 相似文献
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鸡副嗜血杆菌（HPG—A221.C668）对10个家系BWEL—SPF鸡胚的感？… 总被引：1，自引：1，他引：0
用鸡副嗜血杆菌国际标准株（ＨＰＧ－Ａ２２１．Ｃ６６８０分别接种１－１０个家系的ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡６月龄鸡胚,观察攻毒后１６－３０小时鸡胚死亡的情况。结果,第５,７,８家系死亡率为１００％,１,４,６家系死亡率为９０％;２,３,９,１０家第死亡率为８０％。８５％,１０个家系ＨＰＧ平均死亡率为９０．５％。对照组（ＨＷＬ－ＳＰＦ鸡胚）平均死亡率为９０％。 相似文献
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影响养猪业经济效益的主要原因之一是传染病的频发和仔猪因疾病而大量死亡,可以说疾病给我国养猪业造成了1／3的损失。有效控制猪繁殖障碍相关疾病的肆虐,严防此类疫病在大中型养猪场的传播和蔓延是我国当前的紧迫问题。我们要有一个全方位的防疫思想和总体的卫生防疫概念,做好猪场的选址和布局,建立健全卫生管理制度,定期进行猪舍消毒、饮水消毒和带猪喷雾消毒,及时处理猪粪与病死猪, 相似文献
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为了验证采用切向流超滤的方法浓缩蓝耳病疫苗半成品对提高其效价的效果,我们作了多次浓缩试验,并于每次试验之后进行TCID50检测。选取其中4次试验的样品灭活乳化成苗,进行仔猪的免疫试验,于免疫后21日采血分离血清做ELISA检测。从动物试验的检测结果来看,浓缩后的仔猪阳性率高于浓缩前,证明以超滤的方法提高蓝耳病疫苗半成品的效价是可行的。 相似文献
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常用的实验用家兔主要有日本大耳白兔和新西兰兔两个品种,因其繁殖力强,年平均产仔5～7胎,每胎产仔约5～12只,普通环境下就能满足实验用家兔生长的基本要求,因而在科研、教学、移植等各种实验中广泛使用。但由于家兔的 相似文献
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东北地区猪群链球菌分离鉴定及流行病学调查分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为了解猪链球菌在东北地区正常猪群中的流行情况,对黑龙江、吉林、辽宁省等地无菌采集的2 204份鼻拭子接入含有1‰抗生素的链球菌液体选择培养基中,37℃静止培养24 h,挑取细菌培养物涂片,革兰氏染色后镜检,将镜检为革兰氏阳性的链球菌利用PCR方法进行猪链球菌种的鉴定,在此基础上再利用PCR方法进行猪链球菌1、2、7、9血清型的分型鉴定.结果显示,黑龙江、吉林、辽宁3省猪群链球菌的携带率分别为29%、27%、34%,东北地区分离得到猪链球菌共155株,其中1型猪链球菌7株,2型猪链球菌39株,7型猪链球菌4株,9型猪链球菌11株,其他型猪链球菌94株. 相似文献
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猪链球菌2型毒力因子研究进展 总被引：2，自引：1，他引：1
猪链球茵(SS)病是一种严重危害养猪业的人畜共患病,呈世界性分布.根据荚膜抗原特性的不同,猪链球茵被分为35个血清型(1/2型,1型～34型),其中以猪链球菌2型(SS2)流行最广,毒力最强.SS2主要的毒力因子有溶菌酶释放蛋白、胞外蛋白因子、荚膜抗原、溶血素等.然而,新近发现的一些与SS2致病性相关的基因序列和蛋白片段已经成为当前研究的重点和热点.在基因水平上的新发现主要有orf2毒力因子、89 kb毒力岛、转录调节因子、氨基酸通透酶、ABC转运子及表面锚定蛋白基因、反应调节因子RevS基因、纤连蛋白结合蛋白基因、编码噬茵体的基因序列Ssl和分泌性核酸酶SsnA基因等.蛋白水平上的新发现主要有脂磷壁酸的D-丙氨酰位点、自溶素、精氨酸脱亚氨酸酶系统、浑浊因子,38,45,39,44 ku蛋白,以及一些蛋白酶和纤维蛋白溶血酶原受体等. 相似文献
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对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株致弱过程中不同代次病毒(S39、S70、S148、S171)及国内分离株(GD3、JS1、JS5)的结构蛋白基因(ORF2～ORF7)进行了克隆和测序,并与国内外毒株序列进行比较和系统发育进化分析.结果表明,PRRSV CH-1a株各传代毒株和国内分离毒株各个结构蛋白序列均存在不同程度的变异,与GenBank上的登录序列进行了比对,发现GP2～GP5同源性在83.1%～100%,M蛋白同源性在95.4%～100%,N蛋白同源性在87%～100%,其中以GP2、GP3和GP5发生突变几率较大;另外,发现PRRSV CH-1a不同代次病毒GP5的H38突变为Q38(S70),L146突变为Q146(S148),而2006年分离的PRRSV变异毒株由F39突变为I39,而且分离毒株的毒力明显强于经典毒株.进化分析表明,GD3毒株与2006年～2007年分离的毒株以及PRRSV CH-1a株的亲缘关系均较近,处于二者的中间位置. 相似文献