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猪萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
对表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离得到的34株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),采用针对Bb flagellum gene的一对引物进行PCR扩增,结果所有分离物均能扩增出237bp特异性DNA条带,与传统生化鉴定结果相一致,且其最小检出量为0.64pg;而猪鼻腔和肺组织中常见的多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌及大肠埃希氏菌均未能出现任何DNA条带。这表明,本试验建立的PCR方法具有特异性强、灵敏度高、可靠性好等特点,可用于猪萎缩性鼻炎的临床诊断。 相似文献
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猪源多杀性巴氏杆菌的生物学鉴定与荚膜PCR分型 总被引:8,自引:1,他引:8
从表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离出13株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm),采用Pm种特异性的KMT1-KMT2引物进行PCR扩增,结果与传统的生化反应鉴定完全一致。基于对甘露醇、卫茅醇、山梨醇、海藻糖的发酵能力和产生鸟氨酸脱羧酶的特性,Q_1、Q_3、Q_6、Q_7、Q_(10)、Q_(13)和C_(48-1)鉴定为Pm多杀亚种(Pm subsp.multocida);Q_2、Q_4、Q_5、Q_8、Q_9、Q_(11)、Q_(12)鉴定为Pm败血亚种(Pm subsp.septica)。对13株Pm分离物采用A型、B型和D型引物进行PCR扩增,8株鉴定为A血清型(61.5%);5株鉴定为D血清型(38.5%);没有发现B血清型的菌株。同时对金黄色葡萄球菌抑制试验、中性吖啶黄沉淀试验与荚膜PCR分型的相关性进行了讨论。 相似文献
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参考相关资料,针对支气管败血波氏杆菌Bordetella bronchiseptica FlaA基因上游序列选择合成1对特异性引物,对贵州分离株(B8株和B27株)进行PCR扩增,将扩增产物连接在pMD18-T载体上,并转化到DI-L5a感受态细胞中,提取重组质粒进行PCR和双酶切鉴定后测序。结果获得分子长为237bp的特异性DNA片段;核苷酸同源性分析表明,贵州分离株间的同源性高达99.1%,与Bb参考株的同源性为97.8%~99.6%,与Bpp参考株的同源性为95.6%-97.4%;系统进化树分析表明,贵州分离株与Bb参考株亲缘关系较近,而与Bpp参考株亲缘关系远。 相似文献
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猪萎缩性鼻炎(Atrophic rhini-tis,简称AR)是由支气管败血波氏杆菌和产毒素多杀性巴氏杆菌引起猪的一种慢性、渐进性、接触性呼吸道传染病。本病临床上以鼻炎、鼻梁变形、鼻甲骨萎缩为主要特征,患病猪群生长性能下降,易继发其他感染造成巨大的经济损失,被国际兽医卫生组织(OIE)列为A类动物疫病,我国将其列为一类动物疫病,并作为猪群检疫的必检对象。根据引起猪萎缩性鼻炎病原和发病特点的不同,将其分为两种:由支气管败血波氏杆菌(Bb)引起的称非进行性萎缩性鼻炎(Non-Progressive AR,简称NPAR),由产毒素多杀性巴氏杆菌(DNT Pm)引起的… 相似文献