鸡组织滴虫病PCR病原学诊断方法的建立     

曲昌宝  王尚尚  侯照峰  宿世杰  刘丹丹  曹李琴  陶建平  许金俊 《中国预防兽医学报》2013,(2):160-163

为建立鸡组织滴虫(H.meleagridis)的PCR检测方法,本研究以确诊的感染火鸡组织滴虫的阳性鸡的肝组织DNA为模板,设计针对18S rRNA基因高度保守的特异性引物,建立组织滴虫病的PCR诊断方法。敏感性试验显示阳性样品组织DNA的最低检出限为4 ng/μL。特异性试验表明与其他常见鸡寄生虫的DNA样品均无交叉反应。该PCR方法对临床样品的检出率为100%,与组织病理学诊断结果符合率为100%。该诊断方法敏感、特异,可以用于组织滴虫病的临床诊断。  相似文献   

执业兽医资格考试制度下动物医学专业动物寄生虫病学课程教学改革与实践简     

许金俊  陶建平  熊桂林  王小波  高崧 《安徽农业科学》2013,(22):9510-9511,9513

探讨了执业兽医资格考试制度下的动物寄生虫病学课程考试概况、教学内容和体系的调整、教学方法和手段的改进、实践教学模式的创新、考核方式的改革.通过改革,该课程初步成为一门有自身特色、教学内容新颖生动、教学方法与手段先进、理论和实践结合效果较好的课程,提升了人才培养质量,为学生毕业后顺利通过考试奠定了基础.  相似文献   

江苏盐城某规模化猪场隐孢子虫感染现状调查     

汪飞燕  施网强  侯照峰  赵振兴  冯娟  许金俊  陶建平  刘丹丹 《畜牧与兽医》2019,(3):78-82

为了调查江苏盐城某猪场的隐孢子虫感染情况,采集300份仔猪新鲜粪样,提取基因组DNA,应用PCR方法对隐孢子虫18S rRNA和ITS序列进行扩增、克隆和序列分析。共检出41份阳性样品,阳性率为13.67%,克隆得到的序列大小分别为429 bp和532 bp。系统发育进化树分析显示,该猪场感染的隐孢子虫为鸵鸟隐孢子虫(Cryptosporidium struthioni)。猪感染鸵鸟隐孢子虫在我国尚属首次。本研究结果不仅丰富了我国猪隐孢子虫感染的流行病学资料,也为本地区隐孢子虫病的防控奠定了基础。  相似文献   

毒害艾美耳球虫配子体gam22基因的克隆与序列分析     

刘丹丹  曹李琴  朱玉兰  许金俊  吴力力  金文杰  陶建平 《畜牧与兽医》2014,(5):10-13

提取毒害艾美耳球虫(En)配子体总RNA,应用RT-PCR进行gam22基因的克隆,测序后对其进行序列分析。结果表明,Engam22基因全长为713 bp,其中包含一个完整的开放阅读框,大小为561 bp,编码186个氨基酸,含有一个富含组氨酸和脯氨酸的特征性结构域;与柔嫩艾美耳球虫(Et)配子体Etgam22基因序列进行比对,同源性为97.7%。此配子体蛋白基因具有较高的保守性,可以作为抗球虫疫苗的候选基因。  相似文献   

10株巨型艾美球虫rDNA-ITS-1部分序列测定与分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

陶建平  辛玲  许金俊 《中国预防兽医学报》2008,30(4):267-270

用一对种特异性引物,对国内10株巨型艾美球虫ITS．1区进行PCR扩增,对扩增产物纯化、测序与分析,并用DNAStar软件对所检测的10株巨型艾美球虫与GenBank中的所有巨型艾美球虫的ITS．1相应序列进行系统发生进化关系分析。结果显示,扬州株、龙岩株和福州株的ITS-1部分序列片段长度为152bp,其余各株均为151bp。10株巨型艾美球虫的同源性为90．7％～100％,在构建的系统发生进化树中分成2大系群,凤阳株形成一个单系群,其余9株为另一系群。虫株间的亲缘关系与地理位置不尽一致,与免疫交叉保护力无相关性。  相似文献   

支原体的流行病学、检测方法和控制措施     

陈连宜  许金俊 《中国禽业导刊》2008,25(8):39

鸡毒支原体和滑液囊支原体在许多家禽养殖场仍然是重要的传染病原。向养殖场提供没有支原体污染的种禽,同时采取良好的生物安全措施,是解决支原体污染问题的重要措施。 鸡毒支原体可引起鸡和火鸡的呼吸道疾病,使产蛋、体重、饲料转化效率下降。而滑液囊支原体致病性似乎一、不那么明显,主要引起亚临床感染。但是在生产实践中,常存在协同感染,特别是存在呼吸道病毒和大肠杆菌致病性血清型感染时,则会加重任何一种支原体感染。．  相似文献   

高邮麻鸭白细胞介素-2基因的克隆与序列分析     

陈诚  佘步宏  任春芝  陶建平  许金俊 《安徽农业科学》2010,38(28):15670-15672

[目的]对高邮麻鸭白细胞介素-2（CIL-2）基因进行克隆和序列分析。[方法]以高邮麻鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,根据已发表的鸭IL-2基因cDNA序列设计并合成1对引物,应用两步RT-PCR技术扩增出IL-2基因的特异性片段。将扩增片段插入pGEM-T-easy载体,并进行测序分析和结果验证。[结果]阳性克隆所含插入片段的DNA序列全长为433bp,与预期大小一致,含有1个423bp大小的开放性阅读框,共编码141个氨基酸的前体蛋白,N端21个氨基酸形成信号肽,成熟蛋白为120个氨基酸,分子量约为13.66kD,含1个糖基化位点。该序列与绿头鸭、绍兴鸭、固始鸭相应序列的同源性均为99.8%,与广州白鸭的同源性为99.3%,存在少量核苷酸差异。[结论]高邮麻鸭IL-2编码区基因相对高度保守,为其用于临床疾病治疗提供了一定参考。  相似文献   

巨型艾美球虫配子体gam82基因的克隆表达与免疫原性分析     

彭昊  陶建平  许金俊  刘丹丹  李建梅  任春芝 《中国兽医学报》2010,30(9)

提取巨型艾美球虫(Eimeria maxima)南通株(NT株)配子体总RNA,应用RT-PCR技术对gam82基因进行克隆,并对其核苷酸及氨基酸进行序列分析.结果表明,克隆的基因全长为1 791个核苷酸,具有一个完整的开放阅读框,编码596个氨基酸,与GenBank中发表的Houghton株gam82基因同源性为100%.根据对推导的氨基酸序列的二级结构和抗原表位分析的结果,筛选免疫原性良好的区域,命名为gam82-Y,进行原核表达.重组菌经过IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳和Western-blot检测,gam82-Y基因片段在大肠杆菌中得到了融合表达,相对分子质量约为53 000.可溶性分析表明,融合蛋白主要以包涵体形式存在.以 E.maxima高免血清为一抗进行Western-blot检测,显示重组抗原gam82-Y具有免疫原性.  相似文献   

鸡组织滴虫门诊病例的流行病学调查     

陈静  陈雪  陶建平  焦库华  许金俊 《中国畜牧兽医》2010,37(9):217-219

对2008年1月—2009年12月间来扬州大学动物医院门诊部登记就诊的鸡组织滴虫病病例进行统计,分析组织滴虫病的流行特点。结果显示,该病主要感染放养或散养的草鸡,雏鸡和青年鸡最易感,呈散发性,发病率和死亡率低,病程长,没有明显的季节性,主要表现精神委顿、缩头垂翅和排黄绿色稀粪,剖检肝脏和盲肠的病变特征较为典型,传播与异刺线虫有一定的关系。以上调查结果为临床上该病的诊治和防控提供了一定的参考。  相似文献   

欧盟决定禁售牛内脏/美发现患海绵状脑病的羊/印度鸡蛋加工商处境艰难/美国肉禽屠宰加工厂(场)全面推行HACCP的管理体系等     

许金俊 《畜禽业》2000,(9)

为避免疯牛病给人类造成更大危害,欧盟委员会最近决定,将从2000年10月1日起禁止在欧盟国家继续出售牛头、牛内脏及所有用牛下水制成的食品。 据悉,法国等国是此项决定的积极支持者。法国已从1990年开始禁止在牲畜饲料中加入牛骨粉,1997年开始禁止在商店里销售供人类食用的牛内脏。然而,德国对这一决定投了弃权票,西班牙、芬兰、希腊和奥地利投了反对票。截至目前,德国等国一直还在销售和食用此类食品。  相似文献