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本研究利用抗三肽囊素(Bursin)单克隆抗体免疫SPF来航鸡,获得产生抗独特型抗体的脾细胞,从中提取总RNA,经反转录合成cDNA第一链.以cDNA第一链为模板,根据来航鸡 IgG 抗体重链(VH)、轻链(VL)可变区基因FR设计引物,进行PCR扩增.在体外扩增出该抗体的可变区VH和VL基因(大小分别约为370和320 bp).通过重叠延伸反应(SOE),以(Gly4Ser)3为连接肽,将VH和VL基因连接成为VH-Linker-VL ScFv,将ScFv DNA与噬菌粒载体pHEN1的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13K07感染后,获得重组的鸡源抗三肽囊素独特型抗体全套单链噬菌体抗体库.并测得该库容量约为5×105,噬菌体中ScFv基因的插入率为80%,用辅助噬菌体援救后,得到滴度为1011PFU/mL的初级噬菌体抗体库.用抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)进行4轮"吸附-洗脱-扩增"的淘筛,出现特异性富集.经ELISA、动物试验表明所筛选的5个阳性克隆可与抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)特异性结合,并能促进抗体的生产. 相似文献
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<正> 近年来江西省一些集约型养猪场因仔猪水肿病造成严重的经济损失。世界各国公认本病是由溶血性大肠杆菌引起。作者等自崇仁、进贤等地猪场典型发病例分离的溶血性大肠杆菌12株,就其一些生物学特性进行了探讨,现将结果报告如下。材料与方法1.病原材料与分离:6例典型发病仔猪来自崇仁(1例代号为 CR)与进贤(5例代号为 JW)两猪场,其中5例为发病死亡猪,1例为扑杀致死。取小肠内容物、肠 相似文献
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在一起以眼炎、呼吸道症状及腹泻为主症的白颈长尾雉中，高比率分离到奇异变形杆菌。所得分离物具有较相似的药物敏感性，且表现出对小鼠较强的致死性作用及由雏伊莎公鸡人工攻菌造病成功。据此确认，奇异变形杆菌是引起本次白颈长尾雉发病死亡的主要致病菌。 相似文献
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饲料中黄曲霉毒素的产生及防治 总被引：2，自引：0，他引：2
黄曲霉毒是一种高度致癌性物质，它不是危害畜禽的生长，健康和生育，而且还可以通过动物性食品进入人体内，影响人的健康，现在是雨水较多的季节。容易诱发黄曲霉毒素的生长，本文阐述了黄曲霉毒素的来源，理化性质及产生原因，并详细介绍了防治和检测措施。 相似文献
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以戊二醛法制备ＢｕｒｓｉｎＫＬＨ，免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取脾细胞，以ＰＥＧ为融合剂，与ＳＰ２融合，用间接ＥＬＩＳＡ法筛选出与Ｂｕｒｓｉｎ－ＢＳＡ结合、不与ＢＳＡ结合的２Ｆ９－４克隆株，经鉴定，抗体属性为ＩｇＭ，Ｋ轻链。水溶性Ｂｕｒｓｉｎ可阻抑２Ｆ９－４对鸡法氏囊的反应，切片标本经ＰＢＳ处理，反应性消失，免疫组织化学染色于法氏囊上获得特征性阳性结果。 相似文献
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江西省两场鸡白痢沙门氏菌分离株微生物学特性谌南辉，黄庚明（江西农业大学牧医学院）分离株血清型鉴定结果本文对１９９３年４～５月份江西省两大型鸡场死亡商品代罗曼雏鸡所分离的２２株鸡白痢沙门氏菌进行细菌学检查，获得了一些有意义的结果，现报告如下。１材料与方... 相似文献
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谌南辉 《江西畜牧兽医杂志》1983,(3)
<正> 作者曾经报道过,用多蒙L(DomonL以下简称DL)治疗犊牛感冒和下痢症以及数例猪、包括乳猪的传染性胃肠炎,获得了明显的疗效。后来在茨城县真壁郡大量发生由病原性大肠杆菌引起的仔猪下痢症,作者在过去治疗方法的基础上,合并使用DL,获得了极好的疗效。仔猪发病于1981年末至1982年初,共6窝65头,为7日龄和10日龄的仔猪,病情均为中等程度,缺乏精神,悄然呆立,体温下降,眼结膜苍白贫血。吃奶减 相似文献
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为研制三肽囊素(Bursin,KHG-NH2,BS)抗体,采用EDC法将三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基与载体蛋白(BSA、OVA)定向偶联,分别制备免疫抗原(BSA-KHG-NH2)和检测抗原(OVA-KHG-NH2)。以BSA-KHG-NH2免疫5只BALB/c小鼠,经4次免疫后,均产生了较高的抗体水平,其中5号小鼠血清抗体效价达1∶125 000。免疫小鼠血清多克隆抗体与检测抗原的结合不仅能被三肽囊素阻断,而且能被GKHG-NH2四肽特异性阻断,但不能被KHGK四肽阻断,表明本试验制备的三肽囊素人工抗原是由载体蛋白的羧基与三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基定向偶联而成。利用小鼠多克隆抗体建立了三肽囊素间接竞争ELISA检测方法,线性范围为15～1 000 ng/mL,IC50为160 ng/mL。 相似文献