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采用硫酸铵分级分离法和凝胶层析法,从相思子种仁中分离纯化出一种毒蛋白P1′。凝胶薄层扫描测得纯度≥97%;SDS-PAGE电泳测定其相对分子质量为64300;经β-巯基乙醇处理,P1′分离为A、B 2条链,相对分子质量分别为29100和35400;经腹腔注射,小鼠LD50为2.11μg/kg;P1′质量浓度≥3.91 mg/L时,可凝集兔红细胞;P1′的B链N末端8个氨基酸序列为:I-V-E-K-S-I/L-I-N,与相思子毒素-a(abrin-a)和相思子毒素-b(abrin-b)同源性较高,为75%;肽质量指纹谱(PMF)分析表明,P1′与abrin-a匹配强度最高,为86%,与abrin-b、相思子毒素-c(abrin-c)和相思子毒素-d(abrin-d)匹配强度均为10%,表明毒蛋白P1′为abrin-a。abrin-a经1%甲醛减毒处理制备类毒素,家兔5次免疫后获得了效价高、特异性较强的抗血清。 相似文献
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取单层培养36 h生长良好的犊牛肝细胞,采用单因素重复试验,分别添加0、2.5、5、10、50、100 ng/mL的牛重组牛瘦蛋白(leptin),每个处理3个重复(每重复2孔),再培养12 h后分别提取RNA和制备细胞上清液.应用荧光定量PCR方法检测外源NPY 对肝细胞糖异生关键酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(Phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)基因表达的影响,同时用比色法检测其对肝细胞PEPCK活性的影响.结果表明:一定浓度的leptin显著抑制了肝细胞PEPCK mRNA表达,降低了PEPCK活性. 相似文献
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犬瘟热(canine distemper,CD)是由犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)引起的一种急性、传染性的病毒性疾病,在幼犬中本病的死亡率比其它任何传染病都高。CDV的自然宿主为犬科动物和鼬科动物,且本病一年四季均可发生,但以春冬两季多发,并有一定的周期性。病犬是本病最主要的传染源,病毒大量存在于鼻液、唾液中,也可见于血液和脑脊液、淋巴结、肝、脾中。并能通过尿液长期排毒,污染环境。病犬早期表现为双相型热,急性鼻卡他,随后以支气管炎、肺炎、严重的胃肠炎和神经症状为特征,少数病例出现鼻液和脚垫的高度角化及皮肤上出现水泡。… 相似文献
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加标香肠及水样品中相思子毒素-a高效液相色谱检测 总被引:2,自引:0,他引:2
应用高效液相色谱法(HPLC)定性和定量检测加标香肠和水样品中相思子毒素-a(abrin-a)。在固定相为Shodex Protein KW-802.5色谱柱,流动相为0.5mol/L的磷酸盐缓冲液(PB,pH7.3),流速为1mL/min,柱温为25℃,检测波长为280llin等条件下,测定结果:abrin-a保留时间(9.80±O.02)min(n=25);浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性范围11.765—941.200μg/ml;最低检测限44ng;加标香肠和水样品中abrin-a回收率分别为104.6%和97.9%。测定结果表明,该方法简便、快速、灵敏度较高、重现性好。 相似文献