五种核酸提取试剂盒对新城疫病毒RNA提取效率的比较     

吕艳  王静静  罗瑶瑶  李林  赵云玲  郑东霞  左媛媛  于松梅  刘华雷  王志亮 《中国动物检疫》2017,34(6):98-101

本研究采用罗氏、天隆、赛默飞世尔等公司生产的5种核酸提取试剂盒,对新城疫病毒RNA的提取效率进行比较,以优选出提取效率高、耗时短、成本低的核酸提取方法,为各级实验室开展新城疫病毒核酸检测提供技术参考。采用5种商品化核酸提取试剂盒,对不同浓度(稀释度10~0~10~(-8)/EID50 10~(8.3))的新城疫病毒标准样品进行RNA提取,通过实时定量荧光RT-PCR进行检测,以Ct值评价5种试剂盒的RNA提取效率,并对试剂盒的RNA提取时间和价格等进行综合比较分析。结果显示:High Pure Viral RNA Kit(罗氏)、动物疫病病毒RNA核酸提取试剂盒(天隆)和Lab Serv Viral Total NA Kit(赛默飞世尔)的RNA提取效率较高。其中,Lab Serv Viral Total NA Kit对低浓度样本的RNA提取效率最高,价格最便宜;Tian Long的RNA提取所需时间也较短,但操作最为简便。综合提取效率、时间及成本等因素,分析认为Lab Serv Viral Total NA Kit(赛默飞世尔)性价比最高,适用于大批量临床样品的集中检测。  相似文献   

新城疫疫苗对SPF鸡和商业肉鸡的免疫学效力分析     

郑东霞  宋翠平  赵云玲  刘相娥  王志亮 《猪业科学》2004,21(6):60-62

将不同新城疫病毒疫苗免疫SPF鸡和商业用肉鸡,对免疫后抗体水平变化和对野毒株攻击的保护率进行了监测。利用Clone30、F48E8和NXF3单联苗和联苗免疫过的SPF和商业肉鸡,对105EID50两次攻毒保护率均为100%;而只用LaSota疫苗免疫的SPF鸡保护率为40%。试验数据表明,分离株NXF3具有较好的免疫原性和对强毒攻击的保护,可以作为候选疫苗用于商业肉鸡。  相似文献   

一株Class Ⅰ新城疫病毒中国分离株分子特性的研究   总被引：1，自引：1，他引：1  

刘华雷  蒋小刚  张维  赵云玲  郑东霞  孙承英  陈飞  王志亮 《中国动物检疫》2008,25(8):30-33

对从健康家鸭中分离到的一株Class I新城疫病毒分离株Duck/China/08-004/2008进行了遗传进化特性研究。利用RT-PCR扩增了该分离株F基因的主要功能区片段,并进行了克隆与序列分析。序列测定结果已经登录到GenBank,登录号为EU589149。该分离株F蛋白裂解位点的组成为112E-Q-Q-E-R-L117,具有典型新城疫弱毒株的分子特征。同源性分析表明其与国内普遍使用的弱毒疫苗株LaSota和V4核苷酸的同源性较低(分别为55.4%和57.7%)。通过构建F基因的遗传进化树,结果表明该分离株在分类地位上属于ClassI,与我国目前普遍使用的弱毒疫苗株LaSota(Class II中的基因II型)和V4(Class II中的基因I型)处在不同的进化分支。通过构建57株ClassI新城疫病毒的遗传进化树,表明本分离株与近年来香港活禽市场分离株较为类似,同属于基因3型。  相似文献   

肠球菌对糖肽类抗生素抗性的分子机制     

郑东霞  赵云玲  王志亮 《中国动物检疫》2003,20(4):40-43

肠球菌在医院感染中一直占主要地位 ,但随着细菌进化和抗生素选择压力的结果 ,其对几乎所有的抗生素都产生了抗性。在对 β-内酰胺类抗生素抗性的Ｇ+菌或过敏人群常用万古霉素 (ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ)或替考拉宁 (ｔｅｉｃｏｐｌａｎｉｎ)来解决。然而自１９８６年 ,人们在欧洲首次分离到对糖肽类抗生素产生抗性的肠球菌以来 ,几乎各国都发现了大量耐药菌株 ,到１９９８年已经到了很严重的地步［１、２］ ,而且万古霉素抗性菌往往已经对多种药物产生了抗性。万古霉素和其它糖肽类抗生素在欧美等发达国家的使用量呈逐年增多趋势 ,更多的耐药…  相似文献   

猪链球菌2型检测技术概述     

赵云玲  王君玮  王华  王志亮 《中国动物检疫》2009,26(10):69-70

猪链球菌(Streptococcus suis)病是由多种不同群的链球菌引起的一种人畜共患的急性、热性传染病,世界各地多个国家均有猪感染发病且致人死亡的报道。本文结合我们对猪链球菌2型的检测技术研究成果,从微生物学检测、血清学检测、分子生物学检测等方面进行了综述。  相似文献   

中华苦荬菜抗烟碱作用研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

赵云玲  李华洲 《动物毒物学》2003,18(1):69-70

用中华苦荬菜的干品和鲜品分别作成口服剂．将干品作成注射剂，分别对染烟碱(nicotine)毒的动物进行解救实验，生理盐水作对照。经统计学分析处理，中华苦荬菜鲜品口服砬用解毒作用与对照组比较有显著差别。  相似文献   

一步法多重RT-PCR检测新城疫、禽流感、传染性支气管炎病毒试验的研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

赵建梅  魏荣  王志亮  孟良玉  郑东霞  赵云玲 《中国动物检疫》2003,20(1):22-24

为了提高检测鸡肉中新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV)，禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)，传染性支气管炎病毒（Avian infectious bronchitis virus,IBV)的效率和敏感性，利用引物设计软件Primer Primer5.0设计了NDV的F基因片段，AIV的M基因片段，IBV的M基因片段的引物，在以前一步法RT-PCR扩增各种病毒RNA的基础上，进行了两种病毒和三种病毒的一步法多重RT-PCR的试验。结果确定了两种病毒的一步法多种RT-PCR的试验条件。三种病毒的一步法多重RT-PCR的试验条件基本确立，本试验初步建立了检测NDV，AIV，IBV一步法多重RT-PCR技术。  相似文献   

禽流感诊断方法概述   总被引：14，自引：1，他引：13  

赵云玲  柴同杰  赵宏坤 《中国家禽》2001,23(3):5-6

禽流行性感冒 (AI)简称禽流感，是由正粘病毒科、流感病毒属 A型流感病毒 (AIV)引起的一种禽类疾病综合征。禽类感染 AIV后，表现从亚临 床到轻度上呼吸道症状、精神萎顿、食欲减退、种鸡产蛋量和种蛋孵化率严重下降，到急性全身致死性疾病综合症。 AIV广泛存在于多种家禽和野生禽类中，而且其临床症状和病理剖检易与 ND、 IB、 EDS－ 76相混淆。虽然禽流感分离株大部分都不是高致病力毒株，但由于禽流感病毒抗原性及致病力的易变性，对养禽业已构成潜在的威胁。 1 AIV的遗传变异性 　　AIV的遗传变异包括抗原性变异和致病性变异…  相似文献   

疫苗新秀─核酸疫苗   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘文波  柴同杰  赵云玲 《黑龙江畜牧兽医》2001,(10):41-43

核酸疫苗是近几年才发展起来的一种新型疫苗，它的出现被誉为疫苗发展史上的第三次革命。现论述核酸疫苗的发展简史，制备和应用，免疫机理，核酸疫苗的优点及影响核酸疫苗免疫效果的主要因素，并对其前景作出了展望。  相似文献   

基因Ⅶ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

孙军峰  刘华雷  王志亮  赵云玲  郑东霞  张维  刘文华  冯莉莉  常娓娓 《畜牧兽医学报》2010,41(11)

根据基因ⅤⅡ型新城疫病毒F基因裂解位点特征设计一对引物和TaqMan探针,建立一种敏感、特异、重复性良好的基因ⅤⅡ型毒株荧光定量RT-PCR鉴别检测方法。以体外转录法制备的cRNA标准品为标准阳性模板,构建标准曲线,并进行各项指标的检测。结果表明,建立的方法特异性良好,最低可检测到102拷贝·μL-1的模板RNA,敏感性比普通RT-PCR高100倍。本试验建立了基因ⅤⅡ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法,且该方法能够鉴别检测常规方法不能区分的新城疫病毒基因ⅤⅡ型强毒株,表明本研究建立的方法可用于此种基因型毒株的快速鉴别检测。  相似文献