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运用PCR-DGGE分析比较瘤胃中不同饲料固相粘附微生物区系 总被引：4，自引：0，他引：4
通过研究奶牛瘤胃中苜蓿、青贮玉米和羊草3种饲料固相粘附微生物菌群结构,分析比较附着于不同粗饲料微生物区系的差异。选择3头健康且体质量相近的装有永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛,将苜蓿、青贮玉米和羊草分别装入尼龙袋,在瘤胃中孵育24h后取出,PBS洗脱获得固相粘附微生物,提取总DNA,采用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)分析群落结构,选取清晰条带测序后构建系统发育树。不同样品的DGGE图谱条带的数目和条带颜色深浅有一定差异;苜蓿与青贮玉米和羊草间相比相似性较低,青贮玉米与羊草间的相似性较高;3种饲料及瘤胃内容物固相粘附微生物的Simpson多样性指数差异显著(P0.05),Shannon-Wiener多样性指数差异不显著(P0.05);3种饲料固相粘附微生物条带近源种分别归属Butyrivibrio sp.、Fibrobacter sp.、Prevotella sp.、Succiniclasticum sp.、Pseudobutyrivibrio sp.5个属。3种饲料固相粘附微生物的种群构成存在差异。 相似文献
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利用小鼠模型的脲酶免疫刺激物效果评价 总被引：1，自引：0，他引：1
建立小鼠模型对制备的脲酶免疫刺激物进行免疫效果及其安全性评价。利用IPTG诱导脲酶基因克隆菌,大量表达脲酶UreB蛋白,用SDS-PAGE及Bradford方法对表达产物进行定性和定量分析;将脲酶UreB蛋白与弗氏(不)完全佐剂混合并乳化,制备成脲酶免疫刺激物。选择健康昆明小白鼠40只,随机分为4组,分别注射脲酶免疫刺激物、弗氏(不)完全佐剂和生理盐水,同时设置非注射为空白对照。利用间接ELISA测定特异性抗体效价,利用血常规分析仪和流式细胞仪测定小鼠血常规。结果表明:构建克隆菌株可以大量表达脲酶B蛋白,质量浓度为0.39 mg/mL。小鼠血清中特异性IgG抗体效价能达到1∶10 000以上,显著高于其他3个对照组(P<0.05),而特异性抗体IgA和IgM效价与对照组比较差异不显著(P>0.05)。脲酶免疫刺激物能显著提高小鼠血中白细胞、淋巴细胞和中间细胞数及比例(P<0.05),而对血液其他指标没有显著影响(P>0.05)。本试验成功制备脲酶免疫刺激物,并能有效刺激机体免疫应答,为后期奶牛免疫试验打下基础。 相似文献
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蛋白质营养是生命活动的最基本营养源。反刍动物具有自身特有的消化生理特点,如何合理搭配日粮,优化瘤胃内氮素环境,提高氮素的利用效率,进而提高胃肠道和组织器官的吸收,增加乳产量、乳蛋白产量和改善乳蛋白组分和含量,降低氮素排放对环境的污染等已成为当前反刍动物氮素代谢的热点和重点问题。同时,由于蛋白质资源的日益短缺,精细化饲养模式迫在眉睫。分子生物学技术、血插管技术和各种组学技术的进步,为深入研究乳蛋白合成底物的转运、利用机制及其机理提供了可能。作者主要从蛋白质如何在消化道内代谢、影响乳蛋白合成的因素等方面对2009年蛋白质营养研究新进展进行综述。 相似文献
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饲喂纳豆枯草芽胞杆菌对荷斯坦犊牛瘤胃细菌区系的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
本研究选取8头(60日龄)犊牛随机分为对照组和处理组,对照组犊牛饲喂开食料,处理组在开食料中添加纳豆枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)(1×10~6 CFU/g日粮)菌液,于断奶后2个月进行屠宰,采集瘤胃食糜构建16S rDNA克隆文库,随机挑取克隆进行测序,对照组16S rDNA克隆文库共有111个克隆,可分为88个操作分类单元;处理组16S rDNA克隆文库中有142个克隆,可分为131个操作分类单元.序列分析和多样性指数分析表明,两组犊牛瘤胃细菌区系多样性存在显著差异.拟杆菌门(Bacteroidetes)和壁厚菌门(Firmicutes)是两克隆文库中主要的代表菌群.对照组和处理组中的拟杆菌门分别占文库中总克隆数的38%和25%,而壁厚菌门分别占47%和57%.与瘤胃球菌相关的克隆在对照组克隆文库中分别占5%,而在处理组文库中分别占10%.RT-PCR结果显示,处理组中白色瘤胃球菌(R.albus)(log_(10)7.7/mL)和黄色瘤胃球菌(R.flavefaciens)(log_(10)8.1/mL)的数量比对照组(分别为log_(10)7.2/mL和log_(10)7.7/mL)分别增加了3倍和2.4倍.研究结果提示,饲喂纳豆枯草芽胞杆菌有助于促进断奶后犊牛瘤胃中细菌区系的建立,促进纤维分解菌群的定植和生长. 相似文献
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本研究的目的是建立一种可以同时测定红三叶草提取物中大豆苷元、染料木素、刺芒柄花素和鹰嘴豆素A含量的高效液相色谱检测方法。采用χBridge C18（250 mm×4.6 mm，5 μm，Waters）色谱柱，以甲醇（A）和10 mmoL磷酸氢二钠溶液（B）为流动相，流速为1 mL/min，进样量为10 μL，在不同的洗脱梯度、检测波长和柱温下检测四种异黄酮的含量。确定了最佳色谱条件：柱温为40 ℃，检测波长为270 nm，洗脱梯度为：0 ～ 5 min，20% ～ 40% A|5 ～ 20 min，40% ～ 75% A|20 ～ 23 min，75% ～ 100% A|23 ～ 26 min，100% A|26 ～ 26.5 min，100% ～ 20% A|26.5 ～ 35 min，20% A。结果表明：四种异黄酮在浓度为1 ～ 50 μg/mL时具有良好的线性关系（R2>0.999），保留时间稳定，精密度和稳定性的相对标准偏差（RSD）均小于2%，加标回收率为96% ～ 100.10%。建立的检测方法符合分析方法学评价的要求，可用于同时检测红三叶草提取物中的鹰嘴豆素A等四种异黄酮。
[关键词] 红三叶草提取物|鹰嘴豆素A|HPLC|异黄酮 相似文献
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